作为葛瑞林o-酰基转移酶抑制剂的被取代的哌啶基-乙基-嘧啶的制作方法
【专利说明】作为葛瑞林ο-酰基转移酶抑制剂的被取代的哌啶基-乙基- 嘧啶
[0001]本发明涉及可用于抑制葛瑞林〇-酰基转移酶(GOAT)的化合物、用于治疗与GOAT活 性有关的疾病的药物组合物和方法。
[0002] GOAT属于膜结合的0-酰基转移酶(ΜΒ0ΑΤ)家族的酶。它通过将脂肪酸转移至脱酰 基葛瑞林肽的Ser3残基而将脱酰基-葛瑞林(也被称作未酰化的葛瑞林或UAG)转化成生物 活性形式，即酰基-葛瑞林(AG)。已经证实酰基-葛瑞林会在人类中和在啮齿类动物中增加 食物摄入和增加体脂肪率。还已经证实AG在人类中的输注会抑制葡萄糖诱导的胰岛素分 泌。已经证实葛瑞林基因的消除会增强胰岛素释放以预防或改善高脂肪饮食饲喂的ob/ob 小鼠的葡萄糖不耐受性。
[0003] 肥胖和糖尿病的流行以及对肥胖和糖尿病的当前治疗的可变有效性和应答，要求 患者可得到更多的治疗选择。认为GOAT抑制剂在肥胖的治疗中是一种有用的药剂。进一步 认为，GOAT抑制剂也可以用于减少重量增加或重量恢复（由饮食和/或锻炼、被设计成减少 重量增加或治疗肥胖的其它治疗药物试剂或程序引起）。类似地，GOAT抑制剂单独地或与II 型糖尿病的其它治疗组合地可以用于治疗II型糖尿病。
[0004] 本发明提供了一种化合物，其为GOAT抑制剂。具体地，本发明提供了下式的化合物 或其药学上可接受的盐
[0005] 本发明还提供了一种化合物，其为下式的GOAT抑制剂
[0006] 本发明提供了一种药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐以 及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在另一个实施方案中，本发明提供了 一种药物组合物，其包含本发明的化合物和一种或多种其它治疗剂。
[0007] 本发明的另一个方面提供了一种减少重量增加或重量恢复或治疗II型糖尿病或 肥胖的方法，所述方法包括给有此需要的患者施用本发明的化合物或其药学上可接受的 盐。
[0008] 本发明也提供了用于治疗中、尤其是用于减少重量增加或重量恢复或治疗II型糖 尿病或肥胖的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。此外，本发明提供了本发明的化合 物或其药学上可接受的盐在药物制备中的用途，所述药物用于减少重量增加或重量恢复或 治疗II型糖尿病或肥胖。
[0009]本发明的化合物在宽剂量范围内是通常有效的。例如，每天的剂量落在约0.03至 约150 mg/Kg体重的范围内。在一些情况下，低于前述范围下限的剂量水平可能已经足够， 而在其它情况下，仍可以在维持有利的益处/风险比（profile)的同时使用更大剂量，且因 此以上剂量范围无意以任何方式限制本发明的范围。应该理解，化合物的实际施用量将由 医师考虑到有关情况来确定，所述情况包括要治疗的病症、所选择的给药途径、施用的一种 或多种实际化合物、个体患者的年龄、重量和应答、以及患者的症状的严重程度。
[00?0] 本文中使用的术语"治疗（treating)"（或"治疗（treat)"或"治疗（treatment)"） 表示抑制、减慢、终止或逆转现有症状、病症或障碍的进展或严重程度。
[0011] 本文中使用的术语"减少重量增加"表示减少患者的重量的增加。术语"减少重量 恢复"表示减少在重量减轻以后经历重量反弹的患者的重量增加。重量恢复可以是由于重 量减轻停止以后的反弹效应，所述重量减轻通过饮食、锻炼、行为矫正或经批准的疗法实 现。为了避免疑义，本文中使用的重量增加或重量恢复表示由食物摄入或饮食习惯诱导的 重量增加或重量恢复，且不表示非食品相关的重量增加诸如流体的积累，由水潴留、肌肉质 量或炎症引起的重量。
[0012] 本发明的化合物可以反应以形成药学上可接受的盐。药学上可接受的盐和用于制 备它们的常见方法是本领域众所周知的。参见，例如，P. Stahl,等人.Handbook of Pharmaceutical Salts :Properties, Selection and Use,第2次修订版（Wiley-VCH, 2011); S.M. Berge,等人，"Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences,第66卷，第 1 期，1977年 1 月。
[0013] 技术人员会明白，本发明的化合物或其药学上可接受的盐包含含有至少一个手性 中心的核心：
尽管本发明预见到所有单一对映异构体、以及所述化合物的对映异构体的混合物(包 括外消旋体），本发明的优选化合物由下式表示： 或其药学上可接受的盐。
[0014] 本发明的化合物优选地配制为通过多种途径施用的药物组合物。这样的药物组合 物和制备它们的方法是本领域众所周知的。参见，例如，Remington : The Science and Practice of Pharmacy(A. Gennaro等人编，第21版，Mack Publishing Co·, 2005)。更特 别优选的是这样的药物组合物:其包含由下式表示的本发明的化合物
或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体或稀释剂。
[0015] 从手性试剂开始或通过立体选择性的或立体特异性的合成技术，可以制备单一对 映异构体或非对映异构体。可替换地，在本发明的化合物的合成中的任何方便点，通过标准 手性色谱或结晶技术可以从混合物中分离单一对映异构体或非对映异构体。本发明的化合 物的单一对映异构体和非对映异构体是本发明的优选实施方案。
[0016] 本领域众所周知，用于治疗糖尿病和/或肥胖的药剂可以与用于治疗糖尿病和/或 肥胖的其它药剂组合。本发明的化合物或其药学上可接受的盐可以与糖尿病或肥胖的其它 有效治疗(一种或多种）同时地或依次地共同施用。在经批准的医疗程序(诸如治疗肥胖症 的外科手术，例如，胃分流术或可调节的胃囊带术程序）以后，可以同时地或依次地施用单 独的或与其它有效治疗(一种或多种)组合的本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
[0017] 本发明还包括可用于合成本发明的化合物的中间体和方法。
[0018] 另外，在以下方案中描述的中间体可以含有许多氮保护基。所述可变保护基在每 次出现时可以相同或不同，这取决于特定反应条件和要进行的特定转化。保护和去保护条 件是技术人员众所周知的。参见，例如，Greene和Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, (T. Greene和P. Wuts编，第2版· 1991)〇
[0019] 制备和实施例 下述制备和实施例进一步例证本发明，且代表本发明的化合物的典型合成。试剂和起 始原料是容易得到的，或可以由本领域普通技术人员容易地合成。应当理解，所述制备和实 施例作为举例说明而不是限制来阐述，并且本领域普通技术人员可以做出多种修改。
[0020] 本发明的化合物的R或S构型可以通过标准技术诸如X-射线分析和与手性-HPLC保 留时间的关联来确定。通常使用MDL Accelrys ? Draw 4.0.呢1'版中的1即4(：命名性能执行 下述制备和实施例的命名。
[0021] 本文中使用的以下术语具有指定的含义："ACN"表示乙腈；"BSA"表示牛血清白蛋 白；"DCM"表示二氯甲烷；"DIPEA"表示N，N-二异丙基乙胺；"DMF"表示二甲基甲酰胺；"DMS0" 表示二甲基亚砜；"EDTA"表示乙二胺四乙酸；"EtOAc"表示乙酸乙酯；"EtOH"表示乙醇； "FBS"表示胎牛血清；"HRP"表示辣根过氧化物酶；"IC50"表示产生最大应答的50%的药剂的 浓度；"IPA"表示异丙醇；"MeOH"表示甲醇；"MTBE"表示甲基叔丁基醚；"PBS"表示磷酸盐缓 冲盐水；"RT"表示室温；"TEA"表示三乙胺；"TFA"表示三氟乙酸；"T R"表示保留时间；"THF" 表示四氢呋喃;且"TMB"表示3,3'，5,5'_四甲基联苯胺。
[0022] LC-MS条件（低pH):柱：Phenomenex Gemini NX C18 2.1 X50 mm 3.0 m;梯度：5-100%B保持3 min，然后 100%B保持0.75 min;柱温度：50°C±10°C;流速：1 mL/min;溶剂A: 含有0.1 %甲酸的去离子水;溶剂B:含有0.1 %甲酸的ACN。
[0023] 制备 1 6-氯-2-甲基嘧啶-4-胺
在室温给5 L钢压力容器(高压釜)装入4,6_二氯-2-甲基嘧啶(400 g，2.45 mol)和氢 氧化铵(2.8 L)。将反应物加热至90°C保持5 h。将反应混合物冷却至室温，然后穿过布氏漏 斗过滤固体。将滤饼用水(200 mL)和己烷(200 mL)洗涤，然后在真空下干燥以得到作为白 色固体的标题化合物(290 g, 82%) IC-ES/MS m/z 144.0 (M+1)。
[0024] 制备 2 6-氯-5-碘-2-甲基嘧啶-4-胺
在配备机械搅拌器的20 L圆底烧瓶中组合6-氯-2-甲基嘧啶-4-胺(708 g，4.93 mol) 和MeOH (7.08 L)。冷却至0-5°C。使用加料漏斗历时1 h加入溶解在MeOH (6 L)中的一氯化 碘(4.806 kg，29.6 mol)。将反应混合物温热至室温并在室温搅拌16 h。将反应混合物冷 却至0-5°C并加入亚硫酸钠(46 L，20%水溶液）。将得到的固体过滤并用水(2 L)洗涤，随后 用己烷（3 L)洗涤。在真空下干燥固体，得到作为白色固体的标题化合物（1061 g，80%)。 LC-ES/MS m/z 269.9 (M+1)。
[0025] 制备 3 4- [ 2- (4-氨基-6-氯-2-甲基-嘧啶-5-基）乙炔基]哌啶-1 -甲酸叔丁酯
将6-氯-5-碘-2-甲基-嘧啶-4-胺(20 g，74.22 mmol)、4-乙炔基-哌啶-1-甲酸叔丁酯 (18.64 g, 89.06 mmol)和二异丙胺（10.44 mL, 74.22 mmol)溶解在3-颈烧瓶内的THF (200 mL)中。交替地，将烧瓶抽真空并充入氮气3次。将双(三苯基膦)氯化钯(II) (2.63 g， 3.71 mmol)和碘化亚铜（I) (0.713 g，3.71 mmol)加入溶液中。将混合物加热至50-55°C 之间保持16 h。将混合物冷却至室温并加入更多的双（三苯基膦）氯化钯（II) (1.31 g， 1.86 mmol)、鹏化亚铜（I) (0.356 g, 1.86 mmol)和4-乙炔基-哌啶-1-甲酸叔丁酯（1.55 g，7.42 mmol)。将混合物加热至60°C保持3.5 h。将混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将 所述物质用DCM (300 mL)稀释并用饱和氯化铵水溶液(100 mL)、水（100 mL)和饱和氯化钠 水溶液（1 〇〇 mL)洗涤。将溶液经MgS(k干燥，过滤，并在减压下浓缩。使用硅胶色谱法(800 g 硅胶柱），用20%至100%的EtOAc在己烷类中的溶液洗脱，纯化残余物。将纯化的级分浓缩，得 到作为淡橙色粉末的标题化合物(22.6 g，Sea/ohLC-ES/MS m/z(35Cl/37Cl) 351.2/353.1 (M+l)〇
[0026] 制备 4 4- [ 2- (4-氨基-6-氯-2-甲基-嘧啶-5-基）乙基]哌啶-1 -甲酸叔丁酯
在EtOH (81 mL)和EtOAc (40 mL)中组合4-[2-(4_氨基-6-氯-2-甲基-嘧啶-5-基）乙 炔基]哌啶-1