另一方面可W用于促进 REPSl蛋白的活性或者功能，从而治疗骨关节炎。
[0027] 本发明所述携带基因的载体是本领域已知的各种载体，如市售的载体、包括质粒、 粘粒、隧菌体、病毒等。
[0028] 在本发明中，术语"宿主细胞"包括原核细胞和真核细胞。常用的原核宿主细胞的 例子包括大肠杆菌、枯草杆菌等。常用的真核宿主细胞包括酵母细胞、昆虫细胞和哺乳动物 细胞。较佳地，该宿主细胞是真核细胞，如C册细胞、COS细胞等。
[0029] 本发明还提供了一种用于治疗骨关节炎的药物组合物，所述药物组合物包括上面 所述的REPSl基因和/或其表达产物的促进剂。
[0030] 进一步，本发明的药物还包括药学上可接受的载体，载体，运类载体包括(但并不 限于）：稀释剂、赋形剂如水等、填充剂如淀粉、薦糖等;粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明 胶和聚乙締化咯烧酬;湿润剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸巧和碳酸氨钢;吸收促进剂季锭 化合物;表面活性剂如十六烧醇;吸附载体如高岭±和皂粘±;润滑剂如滑石粉、硬脂酸巧 和儀、聚乙二醇等。
[0031] 本发明的药物导入组织或者细胞的方式可W分为体外或者体内的方式。体外方式 包括将含有REPSl基因的药物或者含有REPSl蛋白质的药物导入细胞中，再将细胞移植或回 输到体内。体内方式包括直接将含有REPSl基因的药物或者含有REPSl蛋白质的药物注入体 内组织中。
[0032] 本发明的药物还可与其他治疗骨关节炎的药物联用，多种药物联合使用可W大大 提到治疗的成功率。
[0033] 在本发明的上下文中/'REPS1基因"包括REPSl基因W及REPSl基因的任何功能等 同物的多核巧酸。REPSl基因包括与目前国际公共核酸序列数据库GeneBank中REPSl基因 (NC_000006.12)DNA序列具有70% W上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列；
[0034] 优选地，REP^基因的编码序列包括W下任一一种DNA分子：
[0035] (1)序列表中沈Q ID NO. 1所示的DNA序列；
[0036] (2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码相同功能蛋白质的DNA序列；
[0037] (3)与（1)或(2)限定的DNA序列具有70%、优选地，90% W上同源性，且编码相同功 能蛋白质的DNA分子。
[0038] 在本发明的具体实施方案中，所述REPSl基因的编码序列是SEQ ID NO. 1所示的 DNA序列。
[0039] 在本发明的上下文中，REPSl基因表达产物包括REPSl蛋白W及REPSl蛋白的部分 肤。所述REPSl蛋白的部分肤含有与骨关节炎相关的功能域。
[0040] "REPS1蛋白"包括REPSl蛋白W及REPSl蛋白的任何功能等同物。所述功能等同物 包括REPSl蛋白保守性变异蛋白质、或其活性片段，或其活性衍生物，等位变异体、天然突变 体、诱导突变体、在高或低的严紧条件下能与REPSl的DNA杂交的DNA所编码的蛋白质。
[0041] 优选地，REPSl蛋白是具有下列氨基酸序列的蛋白质：
[0042] (1)由序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
[0043] (2)将SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺 失和/或添加且与SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列具有相同功能的由SEQ ID NO.2所示的氨 基酸序列衍生的蛋白质。取代、缺失或者添加的氨基酸的个数通常为1-50个，较佳地1-30 个，更佳地1-20个，最佳地1-10个。
[0044] (3)与SEQ ID NO. 2所示的氨基酸序列具有至少80%同源性(又称为序列同一性）， 更优选地，与SEQ ID NO. 2所示的氨基酸序列至少约90%至95%的同源性，常为96%、97%、 98 %、99 %同源性的氨基酸序列构成的多肤。
[0045] 在本发明的具体实施方案中，所述REPSl蛋白是具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序 列的蛋白质。
[0046] 通常，已知的是，一个蛋白质中一个或多个氨基酸的修饰不会影响蛋白质的功能。 本领域技术人员会认可改变单个氨基酸或小百分比的氨基酸或对氨基酸序列的个别添加、 缺失、插入、替换是保守修饰，其中蛋白质的改变产生具有相似功能的蛋白质。提供功能相 似的氨基酸的保守替换表是本领域公知的。
[0047] 通过添加一个氨基酸或多个氨基酸残基修饰的蛋白质的例子是REPSl蛋白的融合 蛋白。对于与REPSl蛋白融合的肤或者蛋白质没有限制，只要所得的融合蛋白保留REPSl蛋 白的生物学活性即可。
[004引本发明的REPSl蛋白也包括对SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的非保守修饰，只要 经过修饰的蛋白质仍然能够保留REPSl蛋白的生物学活性即可。在此类修饰蛋白质中突变 的氨基酸数目通常是10个或者更少，例如6个或者更少，例如3个或者更少。
[0049] 在本发明的上下文中，"诊断骨关节炎"既包括判断受试者是否已经患有骨关节 炎、也包括判断受试者是否存在患有骨关节炎的风险。
[0050] 在本发明的上下文中，"治疗骨关节炎"从疾病的状态变化来分，可W包括疾病的 缓解、疾病的完全治愈。
[0051 ]本发明的优点和有益效果：
[0052] 本发明首次发现了 REPSl基因表达与骨关节炎相关，通过检测受试者滑膜组织中 REPSl的表达，可W判断受试者是否患有骨关节炎、或者判断受试者是否存在患有骨关节炎 的风险，从而指导临床医师给受试者提供预防方案或者治疗方案。
[0053] 本发明发现了一种新的分子标记物-REPSl基因，相比传统的检测手段，基因诊断 更及时、更特异、更灵敏，能够实现骨关节炎的早期诊断，从而降低骨关节炎的死亡率。
【附图说明】
[0054]图1显示利用基因忍片检测REP^基因在滑膜组织中的表达情况；
[0化5] 图2显示利用Western blot检测REP^蛋白在滑膜细胞中的表达情况；
[0056]图3显示利用QPCR在转录水平上检测REP^基因的过表达情况；
[0化7] 图4显示利用Western bio检测REPSl蛋白的过表达情况。
[005引具体的实施方式
[0059] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的说明。W下实施例仅用于说明本 发明而不用于限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York = Cold Spring化rborLaboratoiy Press，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
[0060] 实施例1 OA滑膜组织和正常滑膜组织中REPSl基因的表达差异
[0061] 50例OA患者的滑膜组织来自于行膝关节置换或滑膜切除术的OA病人。所用病例符 合Altam提出的关于OA的诊断标准。30例正常滑膜组织来自于外伤手术病人关节滑膜组织。 OA患者滑膜液(SF)高速离屯、后取上清，-80°C储存待用。本研究中所用临床样本，均对患者 进行知情告知并经医院的伦理委员会通过。
[00创 1、组织RNA的提取
[0063] 1)在较少RNase干扰的清洁区，使用含适量液氮的研鉢称取离体滑膜组织样本约 20mg，用巧棒研磨至粉末状；
[0064] 2)将样本转移到一个不含RNA酶的2mL的离屯、管中；
[00化]3)加入300uL Lysis solution,置于匀浆器内，充分研磨l-5min;
[0066] 4)12000旨，4°(：，离屯、10111111，转移上清至新的1.51111的离屯、管中；
[0067] 5)加入600