龙脷叶酸及其提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种龙脷叶酸，其结构式如下所示：所述的龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到第一浸膏；2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用氯仿?甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物龙脷叶酸。本发明从龙脷叶中提取龙脷叶酸，提取方法简便易行，提取率较高，而该化合物具有很好的抗炎作用。
【专利说明】
龙脷叶酸及其提取方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种化合物及其提取方法。更具体地说，本发明涉及龙脷叶酸及其提 取方法。
【背景技术】
[0002] 龙脷叶Sauropus rostratus Miq.是大戟科守宫木属植物，盛产于印尼、越南以及 我国的云南、广西、福建等地。当中以两广地区民间作为食疗药材使用，在凉茶中较为常见， 具有清热润肺、化痰止咳之功效。龙脷叶具有抗过敏、抑菌、抗炎镇痛等多方面的药理活性； 目临床上许多以龙脷叶为主药的方剂常用于治疗肺炎、支气管炎等呼吸系统疾病，如千龙 合剂(木蝴蝶、龙脷叶、太子参、麦冬、白芍、石斛等)对肺炎双球菌引起的肺炎有预防与治疗 作用，千龙汤(木蝴蝶、鱼腥草、龙脷叶、生薏该仁、知母等）用于治疗间质性肺炎，天龙茶(青 天葵、龙脷叶、款冬花、巴戟等)用于治疗急性支气管炎。
[0003] 目前，国内外对龙脷叶活性成分及抗炎等作用的物质基础研究很少，并且其作用 机制和药效物质基础尚不明确，极大限制了龙脷叶的应用以及相关产品的开发。我们在对 龙脷叶提取物的药理实验中发现，其有一定的抗炎作用，因此有必要对其抗炎活性成分进 行深入研究，为深入研究其作用机制等提供更多的科学依据，为龙脷叶的开发利用奠定基 础。
【发明内容】
[0004] 本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
[0005] 本发明还有一个目的是提供龙脷叶酸，其提取于天然植物龙脷叶，具有很好的抗 炎作用。
[0006] 为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种龙脷叶酸，其结构式如 下所示：
[0007]
[0008] 还提供了龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：
[0009] 1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到 第一浸膏；
[0010] 2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃 取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；
[0011] 3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为60~ 90:1的氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为龙脷叶酸。
[0012] 优选的是，所述的龙脷叶酸的提取方法，步骤1)中，乙醇的体积分数为60~80%， 所述乙醇溶剂的使用量为龙脷叶粗粉重量的8~12倍。
[0013] 优选的是，所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤2)中，向悬浮液中的加入石油醚 萃取的萃取温度为60~90°C。
[0014]优选的是，所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤3)中，以氯仿和甲醇为洗脱剂， 进行梯度洗脱，具体分为12个梯度进行洗脱，氯仿与甲醇的体积比分别为：100:0、70~90: 1、40~60:1、20~40:1、10~30:1、5~15:1、6~10:1、4~7:1、1~5:1、1~3:1、0.5~2:1、0: 100〇
[0015] 本发明至少包括以下有益效果:本发明从龙脷叶中提取龙脷叶酸，提取方法简便 易行，提取率较高，而该化合物具有很好的抗炎作用。
[0016] 本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本 发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
【附图说明】
[0017]图1为本发明所述的龙脷叶酸的13c-nmr图谱；
[0018] 图2为本发明所述龙脷叶酸的1H-NMR图谱。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书 文字能够据以实施。
[0020] 应当理解，本文所使用的诸如"具有"、"包含"以及"包括"术语并不配出一个或多 个其它元件或其组合的存在或添加。
[0021] 一种龙脷叶酸，亦称为3β-羟基-23，25β，26α，27β，28β-四甲基-21-异丙基-13 (18)-留稀-24-酸，30-hydroxy-26a，270-arbor-13( 18)-ene-24-carboxylic acid(9)，其 结构式如下所示：
[0022]
[0023]所述化合物的分子式为:C3〇H48〇3;
[0024] 所述化合物的相对分子量为:456.36。
[0025] 该化合物的其质谱数据数据，EI-MS(m/z):456[M] +，457[M+H] +，441[M-CH3] +，439
[M-OH]+, 439 [M+H-H2O]+, 395 [M+H-H2O-CH3-CHO]+ ；
[0026] 该化合物的13C_NMR谱图如图1所示，其1H-NMR谱如图2所示；
[0027] 该化合物的13C_NMR谱和1H-NMR谱相关数据，如下表所示：
[0028]
[0029]
-
[0030]
[0031] 实施例1
[0032] 龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：
[0033] 1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到 第一浸膏；
[0034] 2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃 取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；
[0035] 3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为60:1的 氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物3β_羟基-23，25β，26α，27β，28β-四甲基-21-异 丙基-13( 18)-留稀-24-酸。
[0036] 实施例2
[0037] 龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：
[0038] 1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到 第一浸膏；
[0039] 2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃 取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；
[0040] 3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为80:1的 氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物3β_羟基-23，25β，26α，27β，28β-四甲基-21-异 丙基-13( 18)-留稀-24-酸。
[0041 ] 实施例3
[0042]龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：
[0043] 1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到 第一浸膏；
[0044] 2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃 取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；
[0045] 3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为90:1的 氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物3β_羟基-23，25β，26α，27β，28β-四甲基-21-异 丙基-13( 18)-留稀-24-酸。
[0046] 实施例4
[0047] 龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：
[0048] 1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到 第一浸膏；
[0049] 2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃 取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；
[0050] 3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为60:1的 氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物3β_羟基-23，25β，26α，27β，28β-四甲基-21-异 丙基-13( 18)-留稀-24-酸。
[0051] 所述的龙脷叶酸的提取方法，步骤1)中，乙醇的体积分数为60%，所述乙醇溶剂的 使用量为龙脷叶粗粉重量的8倍。
[0052] 所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤2)中，向悬浮液中的加入石油醚萃取的萃 取温度为60 °C。
[0053] 所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤3)中，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗 脱，具体分为12个梯度进行洗脱，氯仿与甲醇的体积比分别为:80:0、70:1、40 :1、20:1、10: 1、5:1、6:1、4:1、1:1、1:1、0.5:1、0:100〇
[0054] 实施例5
[0055] 龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：
[0056] 1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到 第一浸膏；
[0057] 2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃 取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；
[0058] 3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为80:1的 氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物3β_羟基-23，25β，26α，27β，28β-四甲基-21-异 丙基-13( 18)-留稀-24-酸。
[0059]所述的龙脷叶酸的提取方法，步骤1)中，乙醇的体积分数为70%，所述乙醇溶剂的 使用量为龙脷叶粗粉重量的10倍。
[0060] 所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤2)中，向悬浮液中的加入石油醚萃取的萃 取温度为80 °C。
[0061] 所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤3)中，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗 脱，具体分为12个梯度进行洗脱，氯仿与甲醇的体积比分别为:90:0、80:1、50:1、30:1、20: 1、10:1、8:1、5:1、3:1、2:1、1:1、0:100〇
[0062] 实施例6
[0063] 龙脷叶酸的提取方法，包括以下步骤：
[0064] 1)以龙脷叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到 第一浸膏；
[0065] 2)向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油醚、乙酸乙酯萃 取，得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏；
[0066] 3)取所述第二浸膏，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为90:1的 氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物3β_羟基-23，25β，26α，27β，28β-四甲基-21-异 丙基-13( 18)-留稀-24-酸。
[0067] 所述的龙脷叶酸的提取方法，步骤1)中，乙醇的体积分数为80%，所述乙醇溶剂的 使用量为龙脷叶粗粉重量的12倍。
[0068] 所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤2)中，向悬浮液中的加入石油醚萃取的萃 取温度为90 °C。
[0069] 所述的龙脷叶酸的提取方法，所述步骤3)中，以氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗 脱，具体分为12个梯度进行洗脱，氯仿与甲醇的体积比分别为：100:0、90:1、60:1、40:1、30: 1、15:1、10:1、7:1、5:1、3:1、2:1、0:100〇
[0070] 为了说明本发明化合物的抗炎活性，将市面上的消炎药-阿莫西林作为对照说明 本发明化合物的优异抗炎效果。
[0071] 实验材料：
[0072] 选取60只体重为30~32克的雌性小鼠；
[0073] (1)将所有的小鼠随意分组
[0074]空白对照组:20只小鼠；
[0075] 阿莫西林组:20只小鼠
[0076] 受试药物组组:20只小鼠：（本受试药物采用的实施例4制备的化合物龙脷叶酸，加 以药物辅剂，制成片状药剂或者胶囊状药物）
[0077] -、小鼠耳部肿胀试验
[0078] 对不同小组的小鼠分别对应予以以下处理：
[0079] 空白对照组，按2.5mg · kg-ι生理盐水灌胃，连续5天，第5天灌胃后lh，在每只小鼠 右耳前后两面均匀涂二甲苯〇.〇2mL，制备耳廓炎症模型。2h后后颈脱臼处死小鼠，沿耳廓基 线剪下两耳，用直径8mm打孔器分别在两耳的同一部位打下圆耳片，立即用电子天平分别称 质量，以左右两耳质量差作为肿胀度，称重精确到0. 〇〇〇lg;
[0080] 阿莫西林组:按2.5mg · kg-ι给小鼠灌胃阿莫西林，连续5天，第5天灌胃后lh，在每 只小鼠右耳前后两面均匀涂二甲苯0.02mL，制备耳廓炎症模型。2h后后颈脱臼处死小鼠，沿 耳廓基线剪下两耳，用直径8mm打孔器分别在两耳的同一部位打下圆耳片，立即用电子天平 分别称质量，以左右两耳质量差作为肿胀度，称重精确到〇. 〇〇〇lg;
[0081] 受试药物组:按2.5mg · kg-1给小鼠灌胃实施例4制备的化合物，连续5天，第5天灌 胃后lh，在每只小鼠右耳前后两面均匀涂二甲苯0.02mL，制备耳廓炎症模型。2h后后颈脱臼 处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用直径8mm打孔器分别在两耳的同一部位打下圆耳片，立 即用电子天平分别称质量，以左右两耳质量差作为肿胀度，称重精确到〇. 〇〇〇lg;
[0082] 肿胀度=右耳片重一左耳片重
[0083] 抑制率=(空白组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/空白组平均肿胀度X 100%
[0084] 致炎后，各组小鼠右耳立刻出现高度红肿现象。受试药物组和受试药物组对二甲 苯所致的小鼠耳肿胀均有显著抑制作用，结果见表1。
[0085] 表1小鼠耳部肿胀试验结果
[0086]
[0087] 如表1结果可知，致炎后，各组小鼠右耳立刻出现高度红肿现象。与空白对照组相 比，阿莫西林组和受试药物组的小鼠的肿胀程度均有所下降，表明阿莫西林组和受试药物 组对二甲苯所致的小鼠耳肿胀均有显著抑制作用，证明，化合物龙脷叶酸，也就是邪-羟基_ 23,250，26〇,270，2邪-四甲基-21-异丙基-13(18)-留烯-24-酸，具有很好的抗炎性。
[0088] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列 运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地 实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限 于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
【主权项】
1. 一种龙脚叶酸，其结构式如下所示：2. 如权利要求1所述的龙脚叶酸的提取方法，其特征在于，包括W下步骤： 1. W龙脚叶粗粉为原料，乙醇为溶剂，采用渗漉法进行提取，蒸发乙醇溶剂后得到第一 浸膏； 2) 向所述第一浸膏中加水，形成悬浮液，然后向悬浮液中加入石油酸、乙酸乙醋萃取， 得萃取物，蒸发去除萃取物中的乙醇溶剂，得第二浸膏； 3) 取所述第二浸膏，W氯仿和甲醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，再用体积比为60~90:1的 氯仿-甲醇流分，得白色粉末，即为目标产物龙脚叶酸。3. 如权利要求2所述的龙脚叶酸的提取方法，其特征在于，步骤1)中，乙醇的体积分数 为60~80%，所述乙醇溶剂的使用量为龙脚叶粗粉重量的8~12倍。4. 如权利要求2所述的龙脚叶酸的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中，向悬浮液中 的加入石油酸萃取的萃取溫度为60~90°C。5. 如权利要求2所述的龙脚叶酸的提取方法，其特征在于，所述步骤3)中，W氯仿和甲 醇为洗脱剂，进行梯度洗脱，具体分为12个梯度进行洗脱，氯仿与甲醇的体积比分别为： 100:0、70~90:1、40~60:1、20~40:1、10~30:1、5~15:1、6~10:1、4~7:1、1~5:1、1~3: 1、0.5~2:1、0:100。
【文档编号】C07J63/00GK105837651SQ201610190328
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年3月30日
【发明人】卢汝梅, 莫惠雯, 韦建华, 李兵, 霍丽妮
【申请人】广西中医药大学