一种盐酸地尔硫卓的药物组合物及其医药用图
【专利摘要】本发明公开了一种盐酸地尔硫卓的药物组合物及其医药用途，本发明提供的盐酸地尔硫卓的药物组合物中含有盐酸地尔硫卓和一种结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ)，盐酸地尔硫卓、化合物(Ⅰ)单独作用时，对急性咽炎具有治疗作用；盐酸地尔硫卓和化合物(Ⅰ)联合作用时，对急性咽炎的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗急性咽炎的药物，与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【专利说明】
-种盐酸地尔硫卓的药物组合物及其医药用途
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域，设及盐酸地尔硫卓的新用途，具体设及盐酸地尔硫卓 的药物组合物及其在急性咽炎中的应用。
【背景技术】
[0002] 盐酸地尔硫卓可W有效地扩张屯、外膜和屯、内膜下的冠状动脉，缓解自发性屯、绞痛 或由麦角新碱诱发冠状动脉疫李所致屯、绞痛;通过减慢屯、率和降低血压，减少屯、肌需氧量， 增加运动耐量并缓解劳力型屯、绞痛。本品可W使血管平滑肌松弛，周围血管阻力下降，血压 降低;其降压的幅度与高血压的程度有关，血压正常者仅使血压轻度下降。本品有负性肌力 作用，并可减慢窦房结和房室结的传导。
[0003] 迄今为止，尚未见盐酸地尔硫卓及其药物组合物与急性咽炎的相关性报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种盐酸地尔硫卓的药物组合物，该药物组合物中含有盐 酸地尔硫卓和一种天然产物，盐酸地尔硫卓和该天然产物可W协同治疗急性咽炎。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0006] -种具有下述结构式的化合物(I)，
[0007]
[000引一种盐酸地尔硫卓的药物组合物，包括盐酸地尔硫卓、如权利要求1所述的化合物 (I)和药学上可W接受的载体，制备成需要的剂型。
[0009] 进一步地，药学上可W接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0010] 进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0011] 上述化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：（a)将石恼皮粉碎，用70~80%乙 醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水饱和的正下醇萃 取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步骤(a)中正下醇萃取物 用大孔树脂除杂，先用15 %乙醇洗脱6个柱体积，再用70 %乙醇洗脱10个柱体积，收集70 % 洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（C)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶 分离，依次用体积比为80:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d) 步骤(C)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、15:1和2:1的二氯甲烧-甲 醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体 积百分浓度为72 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得 到纯的化合物(I)。
[0012] 进一步地，化合物(I)的制备方法中，所述大孔树脂为DlOl型大孔吸附树脂。
[0013] 上述化合物(I)在制备治疗急性咽炎的药物中的应用。
[0014] 上述盐酸地尔硫卓的药物组合物在制备治疗急性咽炎的药物中的应用。
[001引本发明的优点：
[0016] 本发明提供的盐酸地尔硫卓的药物组合物中含有盐酸地尔硫卓和一种结构新颖 的天然产物，盐酸地尔硫卓、化合物（I)单独作用时，对急性咽炎具有治疗作用;盐酸地尔硫 卓和化合物（I)联合作用时，对急性咽炎的治疗效果进一步提高，可W开发成治疗急性咽炎 的药物。本发明与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0018] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0019] 试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0020] 分离方法：（a)将石恼皮(化g)粉碎，用75%乙醇热回流提取(2化X3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（化），依次用石油酸(化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇 (化X3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步骤(a)中 正下醇萃取物用DlOl型大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗脱10 个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（C)步骤(b)中70%乙醇洗脱 浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1 (8个柱体积）、30:1 (8个柱体积）、15:1 (8个柱 体积)和5:1(10个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤(C)中组分3用 正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1 (8个柱体积）、15:1 (10个柱体积)和2:1 (5个柱 体积)的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为72%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到化合物(IKHPLC归一化纯度大于98% )。
[0021] 结构确证:皿-ESI-MS显示[M+化r为m/z 457.2214,结合核磁特征可得分子式为 C2姐3407，不饱和度为8。核磁共振氨谱数据SH(ppm，CDCb，500MHz): H-Ia(1.41，m)，H-Ib (1.64，m)，H-2a(1.98，m)，H-2b(2.01，m)，H-3(5.48，d，J = 6.7Hz)，H-6a(2.54，d，J = 14.6Hz)，H-m3(3.26，dJ=14.6Hz)，H-9a(2.75，dJ=13.3Hz)，H-9b(2.91，dJ=13.3Hz)， H-12(1.83，s)，H-13(2.07，s)，H-14(1.22，s)，H-15(1.88，s)，H-3'（5.23，q，J=6.3Hz)，H- 4'（1.26，d，J = 6.3Hz)，H-5'（1.63，s)，2'-Ac0(2.07，s)，3'-Ac0(2.09，s);核磁共振碳谱数 据Sc(ppm，CDCl3,125MHz) :31.4(CH2，1-C)，25.4(CH2,2-C)，77.9(CH，3-C)，138.4(C，4-C)， 137.2(C，5-C)，22.4(CH2,6-C)，140.2(C，7-C)，198.4(C，8-C)，50.8(Ol2,9-C)，38.2(C，10- C)，136.4(C，ll-C)，23.0(CH3，12-C)，23.6(CH3，13-C)，22.9(Ol3，14-C)，15.9(CH3，15-C)， 168.6(C，1'-C)，82.6(C，2'-C)，72.4(CH，3'-C)，14.9(CH3,4'-C)，20.7(C出，5'-C) ,170.3 (C，2'-AcO)，21.3(C出，2'-Ac0)，169.3(C，3'-Ac0)，21.0(CH3,3'-Ac0)。红外波谱中的 1715cm-i与1680cm-i吸收带表明结构中存在幾基与双键片段。UC-NMR、DEPT和HSQC谱中显示 有24个碳信号，包括八个甲基，四个亚甲基，两个连氧次甲基，W及十个季碳（四个幾基碳， 四个締控碳和一个含氧季碳）。W上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为双环结构。 Ih-匪R谱结合HSQC谱显示六个甲基质子信号SHl.22(3H，s)、1.26(3H，d，J = 6.3Hz)、1.63 (3山3)、1.83(3山3)、1.88(3山3)、2.07(3山3)，两个乙酷基甲基质子信号如2.07(3山3)与 2.09(3山3)，两个连氧次甲基质子信号如5.23(1山9^ = 6.3化）与5.48(1山(1，1 = 6.7化）， 四组亚甲基质子信号 Sh 1.41(1山111)与1.64(1山111)、1.98(1山111)与2.01(1山111)、2.54(1山(1， J= 14.6Hz)与 3.26( lH，d，J= 14.6Hz)、2.75( lH，d，J= 13.3Hz)与 2.91( lH，d，J= 13.3Hz)。 W上NMR数据可W确认该化合物为阔巷菊酬衍生物，HMBC谱中的出-12与C-Il、出-13与C-Il、 出-14与C-10、出-15与C-4相关信号可W归属为阔巷菊酬上的片段，C-3位质子信号移向低场 说明0-3径基被醋化，而通过HMB幻普中H-3与C-r的相关信号得到进一步确认。此外，HMB幻普 中H-3'与C-3'的相关信号W及移向低场的H-3'与C-2'信号表明该化合物中存在2'，3'-二 乙酷基-2'-甲基下酷氧基边链结构，而质子信号Sh 1.63与1.26(J = 6.3Hz)可W归属为出- 5'与曲-4'的甲基信号。NOESY谱中He-I/出-14，He-l/H-3的相关信号表明H-3和出-14在阔巷 菊酬骨架的同侧。该化合物的相对构型进一步通过X-单晶衍射确认，C-3位的绝对构型通过 酸解反应与Mosher法可W确认为R构型。综合氨谱、碳谱、歷BC谱和NOESY谱，W及文献关于 相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理 论值与实验值基本一致。该化合物化学式及碳原子编号如下：
[0022] G
[0023] 实施例2:药理作用
[0024] 本实施例采用氨水连续3d对大鼠咽部喷雾法建立急性咽炎动物模型，测定大鼠中 性粒细胞数量、血清中白细胞介素-ie(IL-ie)、白细胞介素-6(化-6)和肿瘤坏死因子-a (TNF-a)的表达，观察药物对急性咽炎的治疗作用。
[002引1、材料与方法
[0026] 1.1 动物
[0027] Wistar大鼠，体重(250±20)g，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提 供。
[002引1.2试剂与样品
[0029]盐酸地尔硫卓购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实施例 1。醋酸地塞米松片（上海信谊药厂有限公司）。白细胞介素-ie( IL-10)、白细胞介素-6(化- 6)和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)酶联免疫试剂盒(均购于上海酶联生物科技有限公司）。
[0030] 1.3 仪器
[0031] 7080型全自动生化分析仪（日本日立），BX53型双目生物显微镜（日本Olympus)，中 佳邸C-1042型低速离屯、机（中国中科）。
[0032] 1.4大鼠分组及模型制备
[0033] 将60只大鼠随机分为6组，每组10只，分别为空白对照组，模型对照组、阳性对照组 (地塞米松，5mg ? kg^)和盐酸地尔硫卓组(80mg ? kg"^)、化合物（I)组(80mg ? kg^)、盐酸地 尔硫卓与化合物（I)组合物组【40mg ? kg-i盐酸地尔硫卓+40mg ? kg-i化合物（I)】。除空白组 夕h其余5组于第1~3天上、下午各用15%氨水喷大鼠咽部1次，每次用喷雾器喷3下，相当于 化L 15%氨水留在大鼠咽部。空白组咽部喷蒸馈水。分别对动物造模后出现的一般症状、体 征W及咽部病理形态学等方面进行考察，W评价动物造模是否成功。造模成功后，进行药物 治疗。给药方式为阳性对照组ig Smg ? kg-i的地塞米松，每天1次，连续5d;空白组及模型组 每天ig蒸馈水IOmL ? kg-i。药物组灌胃上述剂量的药物，每日1次，连续给药5d。
[0034] 1.5大鼠中性粒细胞计数
[0035] 各组大鼠于末次给药后2地，从大鼠腹主动脉取血处死动物，血液样本分别保存在 真空取血管及一次性EP管中，分别用于中性粒细胞计数及炎性因子检测。
[0036] 1.6大鼠血清制备及测定
[0037] 取大鼠腹主动脉血2mL，注入EP管待凝固后，4°C3000r ? min-i离屯、lOmin，分离血 清。至-70°C冰箱保存。测定前使样本于室溫复融(避免反复冻融），再次于4°C3000r ? mirTi 离屯、5min，取血清，用酶联免疫吸附法巧LISA)测定血清中IL-ie，IL-6和TNF-a水平，操作依 据试剂盒说明进行。
[003引1.7统计学方法
[0039] 本实验采用SPSS18.0统计软件分析数据，实验结果W J甘表示，两组数据间用t检 验进行比较，P<〇.05为差异具有统计学意义。
[0040] 2、实验结果
[0041 ] 2.1对急性咽炎模型大鼠中性粒细胞数的影响
[0042] 与空白对照组比，模型对照组大鼠中性粒细胞数量明显减少(P<0.01)，说明造模 成功；与模型对照组相比，阳性对照组大鼠中性粒细胞明显增加(P<〇. Ol);与模型对照组 比，盐酸地尔硫卓组、化合物（I)组大鼠中性粒细胞数量明显增加(P<〇.01);与模型对照组 相比，盐酸地尔硫卓与化合物(I)组合物组大鼠中性粒细胞明显增加(P<〇. Ol)。
[0043] 结果见表1。
[0044] 2.2对急性咽炎模型大鼠血清中IL-10，IL-6，TNF-a含量的影响
[0045] 与空白对照组比，模型对照组大鼠血清中IL-10，IL-6，TNF-a含量均明显增加(P< 0.Ol)，说明造模成功；与模型对照组相比，阳性对照组大鼠血清中IL-ie，IL-6，TNF-a含量 均明显降低(P<〇.01);与模型对照组比，盐酸地尔硫卓组、化合物（I)组大鼠血清中iL-ie， IL-6，TNF-a含量均有所降低(P<〇. 05);与模型对照组相比，盐酸地尔硫卓与化合物（I)组 合物组大鼠血清中IL-10，IL-6，TNF-a含量均明显降低(P<0.01)。
[0046] 结果见表1。
[0047] 表1对急性咽炎模型大鼠中性粒细胞数量及血清中IL-10，IL-6，TNF-a含量的影响
[004引 [0
[0050] 急性咽炎是一种临床常见病、多发病，在现代医学大多数采用抗生素类和抗病毒 药物治疗急性咽炎，但效果欠佳，病情易反复。由于氨水刺激造成模型组大鼠免疫系统损害 而使得模型组中性粒细胞减少，而地塞米松使中性粒细胞升高，但却降低其游走、吞隧、消 化等功能，因而减弱对炎症区的浸润与吞隧作用。在炎症反应中，淋己细胞，嗜酸粒细胞比 例增加，而地塞米松可W降低全血中淋己细胞及其他细胞比值，使炎症减轻。
[0051] 上述结果表明，盐酸地尔硫卓、化合物（I)单独作用时，对急性咽炎具有治疗作用； 盐酸地尔硫卓和化合物(I)联合作用时，对急性咽炎的治疗效果进一步提高，可W开发成治 疗急性咽炎的药物。
[0052] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可W对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物α)，2. -种盐酸地尔硫卓的药物组合物，其特征在于:包括盐酸地尔硫卓、如权利要求1所 述的化合物(I)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。3. 根据权利要求2所述的盐酸地尔硫卓的药物组合物，其特征在于:药学上可以接受的 载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附 载体或润滑剂。4. 根据权利要求2所述的盐酸地尔硫卓的药物组合物，其特征在于：所述剂型包括片 剂、胶囊剂、□服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注 射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。5. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于，包含以下操作步骤：（a)将石 榴皮粉碎，用70~80%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中正丁醇萃取物用大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗 脱10个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇 洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、15:1 和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为72%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。6. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为D101型 大孔吸附树脂。7. 权利要求1所述的化合物（I)在制备治疗急性咽炎的药物中的应用。8. 权利要求2~4任一所述的盐酸地尔硫卓的药物组合物在制备治疗急性咽炎的药物 中的应用。
【文档编号】A61K31/22GK105924352SQ201610489253
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年6月24日
【发明人】周飞燕
【申请人】周飞燕