一种氢溴酸右美沙芬的药物组合物及其医药用图
【专利摘要】本发明公开了一种氢溴酸右美沙芬的药物组合物及其医药用途，本发明提供的氢溴酸右美沙芬的药物组合物中含有氢溴酸右美沙芬和一种结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ)，氢溴酸右美沙芬、化合物(Ⅰ)单独作用时，可以调节血脂治疗动脉粥样硬化；氢溴酸右美沙芬和化合物(Ⅰ)联合作用时，作用效果进一步提高，可以开发成治疗动脉粥样硬化的药物，与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【专利说明】
一种氢溴酸右美沙芬的药物组合物及其医药用途
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域，涉及氢溴酸右美沙芬的新用途，具体涉及氢溴酸右美 沙芬的药物组合物及其医药用途。
【背景技术】
[0002] 氢溴酸右美沙芬为镇咳类非处方药药品，可抑制延脑咳嗽中枢而产生镇咳作用。 其镇咳作用与可待因相等或稍强。一般治疗剂量不抑制呼吸，长期服用无成瘾性和耐受性。
[0003] 迄今为止，尚未见氢溴酸右美沙芬及其药物组合物与动脉粥样硬化的相关性报 道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种氢溴酸右美沙芬的药物组合物，该药物组合物中含氢 溴酸右美沙芬和一种结构新颖的天然产物，氢溴酸右美沙芬和该天然产物可协同治疗动脉 粥样硬化。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0006] 一种具有下述结构式的化合物（I)，
[0008] -种氢溴酸右美沙芬的药物组合物，包括氢溴酸右美沙芬、如权利要求1所述的化 合物(I)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。
[0009] 进一步地，药学上可以接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0010] 进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0011] 上述化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将红豆蔻粉碎，用75~85%乙 醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃 取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中正丁醇取物用 大孔树脂除杂，先用25 %乙醇洗脱8个柱体积，再用70 %乙醇洗脱12个柱体积，收集70 %洗 脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分 离，依次用体积比为85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步 骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积 百分浓度为72%的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~16个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得 到化合物(I)。
[0012] 进一步地，化合物（I)的制备方法中，所述大孔树脂为D101型大孔吸附树脂。
[0013] 上述化合物(I)在制备治疗动脉粥样硬化的药物中的应用。
[0014] 上述氢溴酸右美沙芬的药物组合物在制备治疗动脉粥样硬化的药物中的应用。
[0015] 本发明的优点:本发明提供的氢溴酸右美沙芬的药物组合物中含有氢溴酸右美沙 芬和一种结构新颖的天然产物，氢溴酸右美沙芬、化合物（I)单独作用时，可以调节血脂治 疗动脉粥样硬化;氢溴酸右美沙芬和化合物（I)联合作用时，作用效果进一步提高，可以开 发成治疗动脉粥样硬化的药物。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0017] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0018]分离方法：（a)将红豆蔻(2kg)粉碎，用80 %乙醇热回流提取（15L X 3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔树脂除杂，先用25%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱 12个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗 脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1 (10个柱体积）、45:1 (8个柱体积）、25:1 (10 个柱体积)和15:1 (8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得至1」4个组分；（d)步骤(c)中组分 4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1 (10个柱体积）、15:1 (8个柱体积)和1:1 (6个 柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合 的反相硅胶分离，用体积百分浓度为72 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~16个柱体积洗 脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物（I) (HPLC归一化纯度大于98% )。
[0019] 结构确证:册431-]\^显示[]\?1]+为111/2 433.2087，结合核磁特征可得分子式为 C26H28N2〇4，不饱和度为 14。核磁共振氢谱数据δΗ(卯m，CDC13，500MHz): H-3 (3 · 98，t，J = 3.2Hz)，H-5(3.48，d，J = 7.3Hz)，H-6a(3.32，dd，J=16.3,7.3Hz)，H-6b(2.61，br d，J = 16.3Hz)，H-9(7.49，d，J = 8.2Hz)，H-10(7.11，td，J = 8.2，1.3Hz)，H-ll(7.22，td，J = 8.2， 1.3Hz)，H-12(7.30，d，J = 8.2Hz)，H-14a(2.74，d，J = 13.0Hz)，H-14b(1.88，d，J=13.0Hz)， H-17a(4.33，d，J=12.1Hz)，H-17b(4.16，d，J=12.1Hz)，H-18(1.57，s)，H-20(2.89，dd，J = 12.3,8.4Hz)，H-21(1.88，m)，H-21(2.41，m)，H-23(6.24，d，J=10.3Hz)，H-24(6.03，dd，J = 10.3,3.4Hz)，H-25(5.50，m)，H-26(9.38，d，J = 4.5Hz)，Ni-Me(3.64，s)，N4-Me(2.34，s);核 磁共振碳谱数据 Sc(ppm，CDCl3，125MHz):132.4(C，2-C)，53.5(CH，3-C)，61.4(CH，5-C)，23.7 (CH2,6-C)，107.3(C，7-C)，126.8(C，8-C)，118.4(CH，9-C)，119.2(CH，10-C)，121.2(CH，n-C)，109.5(CH，12-C)，136.7(C，13-C)，33.3(CH2，14-C)，126.2(C，15-C)，130.0(C，16-C)， 59.6(CH2，17-C)，24.3(CH3，18-C)，116.2(C，19-C)，40.1(CH，20-C)，32.2(CH2,21-C)，101.2 (C，22-C)，139.1(CH，23-C)，134.6(CH，24-C)，94.7(CH，25-C)，200.1(CH，26-C)，30.2(CH 3， 沁-Me)，41.3(CH3，N4_Me)。红外波谱中在1670CHT1吸收峰是由该化合物中的醛基产生;且UV 谱图表明在232nm与285nm有紫外吸收，显示该化合物含有吲哚发色基团。13C-匪R、DEPT和 邯0(：谱中显示有26个碳信号，包括三个甲基5。24.3,30.2,41.3 ;四个亚甲基5。23.7,33.3， 59.6,32.2H^一个次甲基(两个连氧次甲基，一个醛基）SC53.5,61.4,118.4,119.2,121.2， 109.5,40.1，139.1，134.6,94.7,200.1;以及八个季碳(两个二连氧季碳）3。132.4，107.3， 126.8，136.7，126.2，130.0，116.2，101.2;以上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为 七环结构。 1H-匪R谱显示一组无取代吲哚片段的质子信号δΗ-97.49(lH，d，J = 8.2Hz)JH- io7.11(lH，td，J = 8.2，1.3Hz)、SH-117.22(1!1，七(1，了 = 8.2，1.3取）与3[1-127.30(1!1，(1，了 = 8.2泡）；一个醛基质子信号6(1-269.38(1!1，(1，1 = 4.5抱）；一个甲基质子信号611-181.57(3!1，8， Me);两个N-CH3质子信号δΗ3.64 (3H，s，Ni-Me)与2.34 (3H，s，NfMe); -组移向低场的连氧亚 甲基质子信号知-1734.33(1!1，(1，1=12.1抱）与611- 1几4.16(1!1，(1，1=12.1泡）；三组亚甲基 质子信号δΗ- 6a 3.32(1!1，(1(1，了=16.3,7.3泡）与311，2.61(1!1，(1，了 = 16.3泡），311-1432.74 (1!1，(1，了=13.0!^)与3[ 1-1仙1.88(1!1，(1，了=13.0!^)以及3[1-211.88(1!1，111)与2.41(1!1，111) ;一 组烯烃质子信号 δΗ-236.24(1!1，(1(1，了=10.3抱）与5[1- 246.03(1!1，(1，了=10.3,3.4抱）。13(：-匪1? 谱、DEPT谱显示该化合物中存在吲哚结构片段δ。- 2132.4(C)、δ[-7107· 3(C)、δ[-8126· 8(C)、 Sc-9118·4(α0、δ。-10119·2((：Η)、δ。- η121·2(00、δ。-12l09.5(CH)与 δ。-13136.7(C)，一个甲基 信号 Sc-i824.3(CH3)，两个 N-甲基信号 5以0.2(013，见-]^)与41.3(013，仏-]^)。0)5￥与邯〇(：波 谱数据揭示该化合物中含有-NCHCH2-结构片段(-N4-C 5-C6-与-N4-C3-&4-)。进一步分析HMBC 谱，H2-14与C-15和C-20，H2-17与C-15和C-19，H-20与C-14和C-19存在相关信号，结合 13C-NMR谱中相关碳信号暗示结构中存在连氧六元环片段;H3-18与C-19的相关信号表明甲基连 接在C-19位。在COSY谱中，还存在一组复杂的相关信号，通过这组信号可以分析出该化 合物中可能存在的结构片段-CHCH 2-和-CHCHCHCHO-，结合HMBC谱分析，可以推断出该化合 物的结构中E/F环为双五元螺环结构。另在HMBC谱中还显示存在H-5与C-3、C-7和C-17，H 2-14与C-131-Me与C-2和C-13相关信号，可构建该化合物的相关碳氢连接方式。N0ESY谱中， H3-18与H-17a、H-20的相关信号确定了 E/F环的连接方式为H3-18与H-20顺式连接成α构型。 综合氢谱、碳谱、HMBC谱和N0ESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物 如下所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致。
[0020]该化合物化学式及碳原子编号如下：
[0022] 实施例2:药理作用
[0023]本实施例使用VD3和高脂饲料造动脉粥样硬化(AS)大鼠模型，检测动物血脂含量， 观察药物对动脉粥样硬化的治疗作用。
[0024] 1、材料与方法
[0025] 1.1动物
[0026] SD大鼠，雄性，50~55d，体质量(200 ± 20)g，由广东省医学动物实验中心提供。 [0027] 1.2试剂与样品
[0028] 氢溴酸右美沙芬购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实施 例1。复方丹参片：将药片进行研磨，加水溶解，制成混悬液。VD 3、胆酸钠、胆固醇、丙基硫氧 嘧啶:上海蓝季科技发展有限公司。
[0029] 1.3仪器
[0030] 酶标仪（iMARK，BI〇-RAD)、显微镜（0LYMPUS，DSX500)、烘干箱（南京莱布科技实业 有限公司，DZF-6020)
[0031] 1.4大鼠分组及模型制备
[0032]将60只雄性SD大鼠常规饲养1周后，观察实验动物状态稳定，将其随机分为6组，每 组10只，分别为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(复方丹参片溶液，25.92mg/mL)和氢 溴酸右美沙芬组(80mg · kg^1)、化合物（I)组(80mg · kg<)、氢溴酸右美沙芬与化合物（I)组 合物组【40mg · kg<氢溴酸右美沙芬+40mg · kg<化合物（I)】。各组按照体质量进行腹腔注 射造模，其中空白对照组注射生理盐水，其余各组注射VD3。并于造模当天除空白对照组外 各组均给予高脂饲料喂养。高脂饲料制作:将普通饲料粉碎成粉末状，按照配方添加药物： 配方为:3%胆固醇，0.5%胆酸钠，0.2%丙基硫氧嘧啶，5%白糖，10%猪油。加水调匀，制作 成条形，放入烘干箱中烘干。各组按体质量灌胃给药，空白对照组每天给予普通饲料喂养， 灌胃给生理盐水;模型对照组给生理盐水灌胃；其余药物组给相应药物灌胃，给药时间为8 周。
[0033] 1.5试验材料获取
[0034] 8周后禁食24h，进水8h，称量动物体质量，麻醉实验动物，心脏取血，取动脉及心脏 组织。离心血清，5min，5000r/min，取上清，放于-20°C备用。动脉及心脏组织置于甲醛固定 液中备用。
[0035] 1.6血脂含量检测
[0036] ELISA法检测血脂含量，按照说明书中步骤进行操作，在酶标仪上观测结果。
[0037] 1.7统计学方法
[0038]应用SPSS软件进行数据分析，组间比较采用t检验，结果以均数土标准差(X土s)表 不。
[0039] 2、实验结果
[0040] 2.1对AS模型大鼠血脂的影响
[0041 ]血清总胆固醇（TC)、高密度与低密度脂蛋白胆固醇(HDL-C与LDL-C)及三酰甘油 (TG)是动脉粥样硬化性疾病4项基本指标。
[0042] 与空白对照组比，模型对照组大鼠 TG、TC、LDL-C水平显著升高(P<0.01)，HDL-C水 平显著降低(p<0.01)，说明造模成功。与模型对照组比，阳性对照组大鼠 TG、TC、LDL-C水平 显著降低(P<〇.〇l)，HDL_C水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比，氢溴酸右美沙芬组、 化合物（I)组大鼠 TG、TC、LDL-C水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05);与模型对照 组相比，氢溴酸右美沙芬与化合物（I)组合物组大鼠 TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.01)， HDL-C水平显著升高(P<0.01)。结果见表1。
[0043] 表1对AS模型大鼠血脂的影响（无±s,n = 10，mmol/L)
[0045] 上述结果表明，氢溴酸右美沙芬、化合物（I)单独作用时，可以调节血脂治疗动脉 粥样硬化;氢溴酸右美沙芬和化合物（I)联合作用时，作用效果进一步提高，可以开发成治 疗动脉粥样硬化的药物。
[0046] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物（I)，2. -种氢溴酸右美沙芬的药物组合物，其特征在于:包括氢溴酸右美沙芬、如权利要求 1所述的化合物(I)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。3. 根据权利要求2所述的氢溴酸右美沙芬的药物组合物，其特征在于:药学上可以接受 的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸 附载体或润滑剂。4. 根据权利要求2所述的氢溴酸右美沙芬的药物组合物，其特征在于:所述剂型包括片 剂、胶囊剂、□服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注 射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。5. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于，包含以下操作步骤：（a)将红 豆蔻粉碎，用75~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中正丁醇取物用大孔树脂除杂，先用25%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱 12个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗 脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1 和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为72 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集10~16个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到化合物(I)。6. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为D101型 大孔吸附树脂。7. 权利要求1所述的化合物（I)在制备治疗动脉粥样硬化的药物中的应用。8. 权利要求2~4任一所述的氢溴酸右美沙芬的药物组合物在制备治疗动脉粥样硬化 的药物中的应用。
【文档编号】A61K31/485GK106046013SQ201610379965
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年5月31日
【发明人】王昌荣
【申请人】王昌荣