具有延长的保存期的过氧化物酶化学发光底物的制作方法

文档序号:26012886发布日期:2021-07-23 21:33阅读:来源:国知局

技术特征:

1.用于进行测定样品中分析物的分析的试剂盒,其中该试剂盒包含化学发光的环状二酰肼、过氧化物氧化剂、增强剂和共增强剂,其中所述增强剂为阴离子n-烷基吩噁嗪,并且所述共增强剂选自4-二烷基氨基吡啶或n-唑。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒进一步包含过氧化物酶或其缀合物。

3.根据权利要求1至2中任一项所述的试剂盒,其中所述化学发光的环状二酰肼选自鲁米诺、异鲁米诺、5-氨基-6,8-二甲基-2,3-二氢酞嗪-1,4-二酮、5-氨基-6,8-二乙基-2,3-二氢酞嗪-1,4-二酮和8-氨基-5-氯-7-苯基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4(2h,3h)-二酮。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的试剂盒,其中所述阴离子n-烷基吩噁嗪增强剂选自3-(10h-吩噁嗪-10-基)丙烷-1-磺酸、4-(10h-吩噁嗪-10-基)丁烷-1-磺酸、3-(10h-吩噁嗪-10-基)丙酸和4-(10h-吩噁嗪-10-基)丁酸及其盐。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂盒,其中所述共增强剂选自咪唑、1-甲基咪唑、4-吗啉代吡啶(morp)、4-二甲氨基吡啶(dmap)和4-吡咯烷基吡啶(ppy)。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的试剂盒,其中所述过氧化物酶选自辣根过氧化物酶、大豆过氧化物酶和甘薯过氧化物酶。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的试剂盒,其中所述过氧化物氧化剂选自过氧化氢、脲/过氧化氢复合物、过硼酸盐、过碳酸盐。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的试剂盒,其中所述化学发光的环状二酰肼存在于第一小瓶中,和所述过氧化物氧化剂存在于第二小瓶中,并且其中所述增强剂和所述共增强剂存在于第一小瓶中或第二小瓶中或两者中。

9.根据权利要求1至7中任一项所述的试剂盒,其中所述化学发光的环状二酰肼、所述过氧化物氧化剂、所述增强剂和所述共增强剂全部存在于单一小瓶中。

10.一种用于进行检测样品中分析物的化学发光分析的方法,其中该方法包括以下步骤:

(i)通过将化学发光的环状二酰肼、增强剂、共增强剂和过氧化物氧化剂一起混合来获得化学发光底物,其中所述增强剂为阴离子n-烷基吩噁嗪,和所述共增强剂选自4-二烷基氨基吡啶和n-唑,并且其中所述化学发光底物不含过氧化物氧化剂的任何稳定剂,

(ii)使目标分析物已固定于其上的固体支持物与所述化学发光底物反应,

(iii)将用于所述目标分析物的检测试剂添加到所述固体支持物,其中所述检测试剂直接或间接地与过氧化物酶缀合,和

(iv)记录通过过氧化物酶与所述化学发光底物的化学发光反应产生的输出光信号,其中所述输出光信号与所述目标分析物的存在/量相关。

11.根据权利要求10所述的方法,其中所述化学发光底物中所述化学发光的环状二酰肼的浓度在0.01mm至10mm之间。

12.根据权利要求10或权利要求11所述的方法,其中所述化学发光底物中所述阴离子n-烷基吩噁嗪增强剂的浓度在0.01至3mm之间。

13.根据权利要求10至12中任一项所述的方法,其中所述化学发光底物中所述共增强剂的浓度在0.05至25mm之间,优选在0.1至12mm之间。

14.根据权利要求10至13中任一项所述的方法,其中所述化学发光底物中所述过氧化物的浓度在0.1至8mm之间。

15.根据权利要求10至14中任一项所述的方法,其中所述化学发光底物的ph值在6.0至9.5之间,优选在6.5至9.0之间。

16.根据权利要求10至15中任一项所述的方法,其中ph值在6.0至9.5之间的所述化学发光底物包含:

i)浓度在0.01mm至10mm之间的所述化学发光的环状二酰肼;

ii)浓度在0.01至3mm之间的所述阴离子n-烷基吩噁嗪增强剂;

iii)浓度在0.05至25mm之间的所述共增强剂;和

iv)浓度在0.1至8mm之间的所述过氧化物氧化剂。


技术总结
一种用于进行测定样品中的分析物的分析的试剂盒,该试剂盒具有延长的保存期,其中该试剂盒包含化学发光环状二酰肼、增强剂、共增强剂和过氧化物氧化剂。该试剂盒可用于检测蛋白质和核酸分子的印迹分析和免疫分析中。

技术研发人员:L·德拉·西亚纳;L·比亚吉尼;T·P·扬森;R·佩尔西亚坎特;M·瓦焦鲁;M·E·韦特拉伊诺
受保护的技术使用者:喜雅纳肯有限公司
技术研发日:2021.01.22
技术公布日:2021.07.23
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