专利名称：从血液中除去β－2微球蛋白的方法
技术领域：
本发明涉及从血液中除去β-2微球蛋白的方法。
已经做过除去β-2微球蛋白的尝试，如在透析淀粉状蛋白病的新治疗途径中公开的《用吸附剂柱集中除去β2-2微球蛋白》，Fumitake Geijyo，Noriyuki Homma，Shin Hasegawa，和MassaakiArakawa，于日本，Niigata，Niigata大学药学院，内服药系(II)发表。在1997年7月30日递交的美国专利申请系列号08/902,727中也公开了从血液中除去β-2微球蛋白的方法。这一方法可以进一步扩大和改进。
本发明的公开因此，本发明的目的是提供一种除去β-2微球蛋白的方法，它是对现有方法的进一步改进。
与在下文中逐渐明了的这些目的和其它目的一致，简要地说，本发明的一个特征在于除去β-2微球蛋白的方法，按照该方法将血液通过孔大小和结构选定的吸附剂以便从血液中除去β-2微球蛋白，和将除去了β-2微球蛋白的血液再输入患者中。
根据本发明优选的实施方案，血液通过吸附剂可与常规的血液透析过程同时或先后进行，在血液透析过程中，迫使血液通过血液透析膜柱体。
根据本发明的另一个特征，吸附剂是中孔比例增大的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物。
根据本发明的另一个特征，通过过程包括通过吸附剂，该吸附剂是具有比例增大的中孔和具有修饰的小珠和大孔表面的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物，从而防止吸附大的蛋白质和血小板和在不影响β-2微球蛋白和中等大小的毒物分子很容易进入小珠的内部吸附空间的情况下使血液补体系统的活化减到最小。
被视为本发明所特有的新特征特别地在附带的权利要求书中阐述了。但是，对于本发明的构成和它的操作方法来说，根据下面对具体实施方案的说明并在阅读时结合附图
将最好地理解发明本身以及本发明的其它目的和优点。
实施本发明的最佳方式根据本发明，推荐了一种从血液中除去β-2微球蛋白的方法。即，从患者的动脉血液循环通路点吸取血液，然后使血液通过吸附剂-聚合物。
根据本发明，血液通过吸附剂可以与常规的血液透析过程同时(先后)进行，在这个过程中，迫使血液通过血液透析膜柱体。
血液通过的吸附剂可以是中孔的比例增大的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物。
同时，吸附剂可以是具有增大比例的中孔和具有修饰的小珠和大孔表面的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物以便防止吸附大的蛋白质和血小板并使血液补体系统的活化减到最小而不影响β-2微球蛋白和中等大小毒物分子很容易进入小珠的内部吸附空间。
修饰可通过化学修饰表面来进行。
根据本发明，将根据本发明制备的吸附剂装载在柱或柱体中使用。优选地，应该将柱设计成具有进口和出口，允许容易地与血液流路连接，并且在进口和吸附剂层之间，和在吸附剂层和出口之间具有两个多孔过滤器。柱可以是由生物相容材料，玻璃，聚乙烯，聚丙烯，聚碳酸酯，聚苯乙烯制成的。在这些中间，聚丙烯和聚碳酸酯是优选的材料，因为可以在使用之前将填充了该吸附剂的柱灭菌(例如高压和γ-射线灭菌)。
然后，将1％的人血清白蛋白的普通盐水溶液填充于柱或柱体中，储藏在4℃下。当准备使用时，用0.9％的已经加入适当的抗凝剂如含有有效量的肝素ACD-A的NaCl溶液洗涤柱。对于250毫升的柱体来说，这是已经加入150毫升含有6，000单位肝素的ACD-A的大约1升氯化钠溶液。
通常，可以利用下面两个典型的体外血液循环系统
(I)迫使从患者的血管取的血液通过用本发明的吸附剂填充的柱，将澄清的血液回输入患者的血管。
(ii)首先通过离心或诸如此类，将从患者取的血液通过分离膜分离成血细胞和血浆，然后，迫使这样分离的血浆通过用本发明的吸附剂填充的柱，从血浆中移去毒物；然后，将来自柱的澄清的血浆与上面分离的血细胞混合，将混合物回入患者的血管。
在这两种方法中，后一种方法更实用，因为例如通过与血小板和红血细胞粘连可以使白细胞的损失较小。
进行血液灌流或血浆灌流的任何其它方法对本发明的修饰的吸附剂是适当的。特别有前途的看来是上面提到的Bodden的建议(美国专利5,069,662，1991年11月)，据此，将高浓度的抗癌剂灌流通过有肿瘤的肝或其它身体器官，然后在将血液回输入患者的血液循环系统之前，将流出的血液进行体外血液灌流以除去过量的药物。另一个有前景的系统是Shettigar等人(美国专利5,221,850，1993年)提出的，在这个专利中，提出了将血浆通过中空纤维膜朝着具有吸附剂的闭室对流性和扩散性传输并返回到纤维通道中。闭室可以用本发明的吸附剂填充。
可以如下进行吸附剂的制备
在实施例1中获得的聚合物具有的表观内表面积是1200m2/g，具有的总孔体积是0.8ml/g。不需要对聚合物小珠的表面进行任何化学修饰或额外的处理，它在乙醇中的体积增加了1.3倍，以每克聚合物32-34毫克的量从磷酸盐缓冲液中吸附了细胞色素C，从接受永久透析治疗的患者的血液中有效地除去了β2微球蛋白，确实成功地通过了血液相容性测试(在允许的126-144秒的限制时间内血浆的再钙化)。直径0.4-0.63毫米的各个球状小珠以450±50克的填充量被机械地破坏，这比典型的大孔小珠(约120-150克)要好得多，但没有类似直径和总孔体积的典型的超交联小珠(高达600克)好。
正如实施例1中所述，取有机相，由320毫升二乙烯苯，80毫升乙基乙烯苯，600毫升甲苯，600毫升正辛烷和2.94克双偶氮丁腈组成。获得的产物的内表面积达到1150m2/g，用乙醇膨胀的体积达到1.5倍。
根据本发明，正如本文上面所述，聚合物小珠的表面可以被修饰。
按照下面三个主要方向，可以进行共聚物的修饰。通过2-羟乙基异丁烯酸酯，N-乙烯吡咯烷酮，N-乙烯己内酰胺，或其它水溶性单体的径向聚合接枝亲水聚合物链，将乙烯基团氧化成环氧基团且随后环氧基团与水，乙二醇，胺或2-氨基乙醇分子反应，使高分子量的血液相容性聚合物，特别是聚(三氟乙氧基)磷腈沉积到聚合物小珠的表面。
在引入本文作为参考的美国专利申请系列号09/019,583中对此做出详细公开。
下面给出改进方法的几个实施例。
在40℃摇动混合物2.5小时后，发现80％最初的乙烯吡咯烷酮接枝到聚合物表面。
用于修饰聚合物的介质可以是纯有机的，但是，它可以是例如水-有机的，至少含有20％(体积)的有机物质。
已经发现，当在非有机的，例如纯水介质中进行修饰过程时，聚合物被内毒素污染，其血液通过这样产生的物料纯化的动物出现发烧，这可以认为是聚合物中存在内毒素的间接症状。与之相反，利用以本发明的介质修饰的物料进行纯化生物体的生理液体的许多实验表明了聚合物没有被内毒素污染。沉积磷腈
权利要求
1.从血液中除去β-2微球蛋白的方法，包括从患者中移取血液，将血液通过选定大小和结构的吸附剂，从血液中除去β-2微球蛋白，将β-2微球蛋白被除去的血液再输入患者中。
2.如权利要求1定义的从血液中除去β-2微球蛋白的方法，其中所述的血液通过所述的吸附剂的过程与迫使血液也通过血液透析膜柱体的常规血液透析过程同时进行。
3.如权利要求1定义的从血液中除去β-2微球蛋白的方法，其中所述的血液通过吸附剂的过程与迫使血液也通过血液透析膜柱体的常规血液透析过程先后进行。
4.如权利要求1定义的方法，其中所述的通过包括通过多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物的吸附剂。
5.如权利要求4定义的方法，其中所述的聚合物的中孔的比例增大。
6.如权利要求1定义的方法，其中所述的通过包括通过多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物的吸附剂，其中小珠或孔的表面被修饰以便防止吸附大的蛋白质和血小板并使血液补体系统的活化减到最小而不影响β-2微球蛋白和中等大小的毒物分子容易地进入小珠的内部吸附空间。
7.如权利要求4定义的方法，其中所述的通过包括通过聚合物，其中表面暴露的乙烯基团被化学修饰以便形成表面暴露的不同的功能基团，与乙烯基团相比其具有更大的亲水性和更大的生物相容性。
全文摘要
从血液中除去β－2微球蛋白的方法的步骤有:从患者中移取血液,将血液通过选定大小和结构的吸附剂,从血液中除去β－2微球蛋白,然后将除去了β－2微球蛋白的血液再输入患者中。
文档编号B01J20/32GK1344172SQ00800620
公开日2002年4月10日 申请日期2000年4月17日 优先权日1999年4月19日
发明者A·布莱福曼, V·戴万科夫 申请人:肾技术国际有限责任公司