专利名称：一种hplc法分析分离酒石酸福莫特罗中间体的方法
技术领域：
本发明属涉及一种高效液相色谱法，尤其是一种分析分离酒石酸福莫特罗中 间体及其对映异构体的高效液相色谱法。
背景技术：
酒石酸福莫特罗为一种平喘药，主要用于缓解支气管哮喘、慢性支气管炎、 喘息性支气管炎及肺气肿所致呼吸困难，中间体的分子式为C17H21NO，化学名 为(R)-4-甲氧基-a-甲基-N-(苄萄苯乙胺，结构式为
该分子中含1个手性碳原子，在通过定向合成目标化合物酒石酸福莫特罗的过程 中需要控制其对映异构体的含量。
对于酒石酸福莫特罗中间体的对映异构体杂质，在药物合成过程当中是需要 进行质量控制的。含手性碳原子的对映异构体的分离一直是手性药物合成和制剂 过程中质量控制的难点，实现酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体的分离在酒 石酸福莫特罗药物的合成和制剂过程的质量控制方面具有现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种分析分离酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构 体杂质的高效液相色谱方法，从而实现酒石酸福莫特罗中间体与其对映异构体杂 质的分离测定。
申请人发现，以纤维素类手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶剂为流动 相低温条件下，可以将酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体进行有效分离，从 而可以准确控制酒石酸福莫特罗中间体的质量。本发明的方法能简单、快速、准确地分析分离酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体杂质。
进一步地，选用纤维素类手性柱OJ-H (DACEL250mmx4.6mm， 5pm)，可 以获得更好的分析分离效果。OJ-H (DACEL250mmx4.6mm， 5pm)纤维素类手
性柱是以对甲苯基甲酸酯键合纤维素为填料。
进一步地，本发明的正相溶剂选用正己烷和无水乙醇的混合溶剂。
本发明的方法中的流动相选用体积比为90 : 10 95 : 5正己烷和无水乙醇的
混合溶剂。
本发明的方法中的流动相中的胺选用二乙胺。
本发明的方法中的低温是指9-15X:。
本发明所述的分析分离方法，可按照以下方法实现
(1) 取酒石酸福莫特罗样品适量，用无水乙醇溶解样品，配制成每lmL含 酒石酸福莫特罗0.1mg 0.5mg的样品溶液。
(2) 设置流动相流速为0.4 1.2mL/min，检测波长为270-278 nm，最佳检测 波长为275nm，色谱柱柱温箱为9-12°C ，色谱柱柱温的最佳温度为10°C。
(3) 取(l)的样品溶液2-50pL注入液相色谱仪，完成酒石酸福莫特罗中间体 及其对映异构体的分析与分离。
其中
高效液相色谱仪岛津LC-10ATv; ， SPD-M10Av; ， SCL-10Av/ ， DGU-12A; 色谱柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm)纤维素手性色谱柱； 流动相正己烷-无水乙醇-二乙胺==95 : 5 : 0.1; 检测波长275nm; 流速1.0mL/min;
柱温10°C; 进样体积10|iL。
本发明采用纤维素类OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5|am)手性色谱柱，能 够有效的分析分离酒石酸福莫特罗及其对映异构体(杂质)；选择流动相溶解样 品，确保了溶液的稳定性；选择进样体积10pL，柱温为室温，提高了色谱峰的 对称性。本发明解决了含酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体的原料及制剂的 分析与分离问题，从而确保了酒石酸福莫特罗中间体及其制剂的质量可控。
图1实施例1，正己烷-无水乙醇-二乙胺=95 : 5 : 0.1，柱温l(TC的HPLC图； 图2实施例2，正己烷-无水乙醇-二乙胺=90 : 10 : 0.1，柱温l(TC的HPLC图； 图3实施例3，正己烷-无水乙醇-二乙胺二95 : 5 : 0.4，柱温9。C的HPLC图； 图4实施例4，正己烷-无水乙醇-二乙胺=95 : 5 : 0.1，柱温12。C的HPLC图。
具体实施例方式
实施例l仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC-10ATv; ， SPD-M10Av; ， SCL-10A甲，DGU-12A; 色谱柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm);流动相正己垸-无水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.1;流速1.0mL/min;柱温10°C; 进样体积10pL。检测波长275nm;实验步骤分别称取酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，置于25mL容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取酒石 酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，分别置于2个25mL容量瓶中，加无 水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。分别取各对照溶液和混合样品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记 录色谱图。结果见附图l，图中1号峰为酒石酸福莫特罗中间体，2号峰为异构 体，可以看出在该条件下酒石酸福莫特罗中间体主峰可以和异构体完全分离开 来，且酒石酸福莫特罗中间体主峰在15.65min左右。实施例2仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC-10AT甲，SPD-M10Av; ， SCL-10Av; ， DGU-12A; 色谱柱OJ-H (DACEL4.6腿x250匪，5nm);流动相正己烷-无水乙醇-二乙胺=90 : io : o.i;流速1.0mL/min;检测波长275nm;柱温10°C; 进样体积10pL。实验步骤分别称取酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，置于25mL容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取酒石 酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，分别置于2个25mL容量瓶中，加无 水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。分别取各对照溶液和混合样品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记 录色谱图。结果见附图l，图中1号峰为酒石酸福莫特罗中间体，2号峰为异构 体，可以看出在该条件下酒石酸福莫特罗主峰可以和异构体完全分离开来，且酒 石酸福莫特罗中间体主峰在12.25min左右。实施例3仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC-10ATv/ ， SPD-M10Avp， SCL-10Av/ ， DGU-12A; 色谱柱OJ陽H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm);流动相正己烷-无水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.4;流速1.0mL/min; 检测波长275nm; 柱温9°C; 进样体积l(HlL。实验步骤分别称取酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，置于25mL容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取酒石 酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，分别置于2个25mL容量瓶中，加无 水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。分别取各对照溶液和混合样品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记 录色谱图。结果见附图l，图中1号峰为酒石酸福莫特罗中间体，2号峰为异构 体，可以看出在该条件下酒石酸福莫特罗主峰可以和异构体完全分离开来，且酒 石酸福莫特罗中间体主峰在17.10min左右。实施例4仪器与条件高效液相色谱仪岛津LC-10AT甲，SPD-M10Ayp， SCL-10Avp， DGU-12A; 色谱柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5nm);流动相正己垸-无水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.1;流速1.0mL/min; 检测波长275nm;柱温12°C; 进样体积10pL。实验步骤分别称取酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，置于25mL容量瓶 中，加无水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为混合样品溶液。并分别称取酒石 酸福莫特罗中间体及其对映异构体各5mg，分别置于2个25mL容量瓶中，加无 水乙醇溶解并稀释置刻度，摇匀，作为定性对照溶液。分别取各对照溶液和混合样品溶液，按上述条件进行高效液相色谱分析，记 录色谱图。结果见附图l，图中1号峰为酒石酸福莫特罗中间体，2号峰为异构 体，可以看出在该条件下酒石酸福莫特罗主峰可以和异构体完全分离开来，且酒 石酸福莫特罗中间体主峰在16.58min左右。
权利要求
1. 一种分离酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体的HPLC方法，其特征在于采用以纤维素类手性柱，以含有胺的正相混合溶剂为流动相，在低温条件下进行分离。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述纤维素类手性柱为OJ-H(DACEL250mmx4.6mm， 5pm)。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于采用正相色谱法。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的正相混合溶剂为正己烷和无 水乙醇的混合溶剂。
5. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的正己烷和无水乙醇的体积比 为95 : 5~90 : 10。
6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的胺为二乙胺。
7. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的二乙胺的加入量为 O.lo/o~0.5%。
8. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的低温为9'C-15'C。
9. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于包括以下步骤(1) 取酒石酸福莫特罗中间体样品适量，用无水乙醇溶解样品，得到lmL含 酒石酸福莫特罗中间体0.1mg 0.5mg的样品溶液。(2) 设置流动相流速为0.4 1.2mL/min，检测波长为275nm，色谱柱柱温箱 为9 15°C。(3) 取步骤(l)的样品溶液2-50pL注入液相色谱仪，记录色谱图。
全文摘要
本发明公开了一种HPLC法分析分离酒石酸福莫特罗中间体及其对映异构体的测定方法，采用纤维素类手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶剂为流动相的正相色谱法低温条件下进行分离，用该方法可以快速的分离分析酒石酸福莫特罗中间体以及含酒石酸福莫特罗中间体制剂的对映异构体杂质。
文档编号B01J20/281GK101531602SQ200810101628
公开日2009年9月16日 申请日期2008年3月10日 优先权日2008年3月10日
发明者牟淑慧 申请人:北京德众万全医药科技有限公司