生产葡聚糖的新方法、获得的葡聚糖溶液及用途

生产葡聚糖的新方法、获得的葡聚糖溶液及用途
【专利摘要】生产一种葡聚糖溶液的微生物学方法，根据该方法，用能够生产葡聚糖的一种细菌菌株的预培养物对一种包含蔗糖的培养基进行接种，然后直接回收在发酵结束时获得的葡聚糖溶液，且无需随后的浓缩步骤，其特征在于：-在接种之前，该培养基包含至少10wt.%的蔗糖，-在接种之后，在使得该培养基中的包括在接种之前存在的蔗糖的蔗糖总量是至少16wt.%的条件下，再次添加蔗糖，-获得的葡聚糖溶液包含至少10wt.%的葡聚糖。获得的葡聚糖的原溶液以及这种溶液作为絮凝剂的用途。
【专利说明】生产葡聚糖的新方法、获得的葡聚糖溶液及用途
[0001]本发明的【技术领域】
[0002]本发明涉及用微生物学方法获得的多糖、更具体地为葡聚糖的领域。更精确地，它涉及后者的生产方式及其作为固体颗粒的水性悬浮液的絮凝剂以及作为水性介质的增稠剂的用途。
[0003]葡聚糖是将蔗糖通过称为葡聚糖蔗糖酶的酶作用转化而得到的长的复杂分子，该酶是由细菌(例如像肠膜明串珠菌，Leuconostoc mesenteroides)分泌的。因此,可以在一种特定的培养基中从上述类型的细菌培养物中生产葡聚糖。
现有技术
[0004]已知可以将某些微生物以使得它们产生能够将糖转化为微生物多糖的胞外酶的这样一种方式进行培养。所述多糖包括例如，黄原胶、硬葡聚糖、裂褶菌素、迪特胶、果聚糖、胶凝糖、兰胶、普鲁兰多糖以及葡聚糖。
[0005]葡聚糖尤其是从培养在补充蔗糖的培养基中的细菌(例如像肠膜明串珠菌)产生。在实践中，葡聚糖是通过细菌的葡聚糖蔗糖酶将蔗糖的葡萄糖单体聚合为葡聚糖(多聚葡萄糖)来获得的。除了蔗糖之外，培养液通常非穷尽性地还包含:营养元素，例如氮源，像铵盐、尿素、乳和肉蛋白的水解产物(像酪蛋白)、酵母提取物；连同缓冲盐，例如磷酸钾或磷酸钠；矿物质，例如铁、镁 、钙、以及锰；维生素以及消泡剂。如已经指出的，这种液体培养基构成了发酵培养基，其中细菌将产生酶并且其中蔗糖将被转化为葡聚糖。
[0006]例如，文献Karthikeyan (卡菲基恩)等人(用于葡聚糖生产的分批发酵条件的优化)披露了一种用于从蔗糖的肠膜明串珠菌细菌培养物发酵中生产葡聚糖的工艺。最终溶液中的葡聚糖的浓度是约13.5wt%。
[0007]文献SK 286 070披露了一种类似工艺，产生了一种包含约5.3wt%的葡聚糖的溶液。
[0008]文献DD 226 015披露了一种类似工艺，其中葡聚糖的终浓度约为6.2wt%至
6.3wt%0
[0009]细菌培养物生产葡聚糖之后通常为将在发酵后获得的葡聚糖进行纯化的至少一个步骤。纯化通常通过用醇(例如乙醇或异丙醇)沉淀来进行。在这种纯化中，可以将细胞、可降解聚合物的水解酶、以及培养基从葡聚糖中去除。因此它使得获得具有更好性能(特别是用作矿中的絮凝剂的应用)的葡聚糖成为可能。
[0010]因此，文章Production of Dextran by newly isolated strains of Leuconostocmesenteroides PCSIR-4 and PCSIR-9 (通过新分离的肠膜明串珠菌的菌株PCSIR-4和PCSIR-9生产葡聚糖)(Turkish Journal of Biochemistry (《生物化学的土耳其杂志》)-2005; 31(1) ; 21-26)描述了一种利用沉淀和纯化的步骤来生产葡聚糖的方法。描述的纯化步骤包括若干子步骤:沉淀、沉淀物的离心或过滤、洗涤、干燥以及溶解，这使得生产工艺复杂、漫长且昂贵。
[0011]这篇文章还传授了最佳的总蔗糖浓度是10%，并且规定仅添加一次蔗糖。当蔗糖浓度较高时，观察到葡聚糖合成受抑制。在这篇文章中，在利用的蔗糖的量为30%时获得的葡聚糖浓度是至多约9%。通常，发酵之后，用微生物学方法获得的葡聚糖浓度是大约Iwt.%至7wt.%，最经常是 2wt.% 与 5wt.% 之间[Behravan (比和拉文)等人 2003 Biotechnol ApplBiochem (《生物技术与应用生物化学》)38:267-269]。现在，采矿业(包括氧化铝采矿业)通常利用15wt.%的葡聚糖溶液。因此，这需要对葡聚糖溶液进行浓缩的至少一个步骤。
[0012]产生的葡聚糖的分子量也是重要的。葡聚糖作为血液中的转运介质被广泛用于医学领域。在这种情况下，它具有一个低分子量，在1000g/mol与70000g/mol之间。它还用于增强的油回收、化妆品以及食品领域，其中它充当增稠剂。它还用于造纸、钻井和采矿中，例如应用于氧化铝矿中，其中它充当絮凝剂(例如，参见文献US 3，085，853)。为了达到作为絮凝剂的良好效率，通常需要高的分子量，通常高于100 OOOg/moL.[0013]有待解决的技术问题 [0014]因此，显现出葡聚糖的微生物生产是受限的，这是因为在发酵之后，在没有浓缩步骤的情况下，它不能生产出具有高于10%的葡聚糖浓度的溶液。而且，已经发现有必要对作为发酵结果而产生的葡聚糖进行纯化，从而获得在絮凝或稠化中的良好性能。当然，纯化步骤趋向于增加成品的成本。
[0015]换言之，本发明要解决的问题是开发一种使得无需随后的浓缩步骤来增加生产浓度成为可能的葡聚糖微生物生产方法。另一个目的是开发这样一种生产葡聚糖的方法:该方法不需要随后的纯化步骤，获得的葡聚糖刚好与纯化的葡聚糖一样有效，尤其是当它用作絮凝剂或增稠剂时。
[0016]本发明的说明
[0017]本发明目的在于克服前面提及的问题。
[0018]因此，本 申请人:已经开发了用微生物学方法获得的高浓度的新的葡聚糖溶液，SP，在发酵之后无需浓缩步骤的情况下，该葡聚糖溶液的葡聚糖浓度高于IOwt.%，也就是说，通过优化发酵过程中的聚合参数实现。
[0019]具体地讲，本 申请人:发现可以通过在细菌的接种之前，在培养基中掺入某个量的蔗糖，并且在接种之后添加蔗糖来实现这个目的。
[0020]更精确地讲，本发明涉及生产葡聚糖溶液的微生物学方法，根据该方法，用能够生产葡聚糖的细菌菌株的预培养物对一种包含蔗糖的培养基进行接种，然后直接回收在发酵结束时获得的葡聚糖溶液，且无需随后的浓缩步骤。
[0021]该方法的特征在于:
[0022]-接种之前，该培养基包含至少IOwt.%的蔗糖，
[0023]-接种之后，在使得向该培养基中添加的蔗糖(包括在接种之前存在的蔗糖)的总量是至少16wt.%的条件下,再次添加鹿糖，
[0024]-该葡聚糖溶液包含至少IOwt.%的葡聚糖。
[0025]因此，本 申请人:发现至少添加两次蔗糖使得有可能避免细菌生长的抑制以及酶葡聚糖蔗糖酶的活性的抑制的现象。
[0026]而且，在接种之后，在使得蔗糖(包括在接种之前存在的蔗糖)的总量是至少16wt.%的条件下,再次添加鹿糖。
[0027]根据本发明，接种之后，蔗糖的添加可以是连续的或不连续的。[0028]当接种之后，进行若干次蔗糖的添加时，有利地为至少两次。
[0029]至少两次的添加有必要是分开的添加。然而，每次添加可以瞬时地或连续地进行，直到已经引入了所希望的量。将这两种可能性结合也是可能的。
[0030]换言之，每次添加是瞬时地或连续地进行，或第一次添加是连续地进行而第二次添加是瞬时地进行，或反之亦然，直到已经引入了所希望的量。
[0031]为了进一步改进该葡聚糖溶液的终浓度，添加的蔗糖(包括存在于补加培养基中的鹿糖)的总量是至少20wt.%,优选25wt.%。
[0032]该葡聚糖溶液优选包含至少14wt.%的葡聚糖，并且更优选地至少18wt.%的葡聚糖。
[0033]根据本发明，能够产生葡聚糖的菌株是明串珠菌属(Leuconostoc)、链球菌属(Streptococcus)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)或醋酸杆菌属(Acetobacter)的菌株。在一个优选实施例中，它是肠膜明串珠菌的菌株，具体是菌株NRRL B 1299,NRRL B 742,NRRLB-512 F、NRRL B 523、V_2317 D、KCTC 3505、ZDRAVLJE SR.P0
[0034]因此，本发明的方法使得有可能在无需浓缩步骤的情况下，即，在发酵结束时直接地获得具有高于IOwt.%、非常优选是高于14wt.%并且甚至更优选是高于18wt.%的浓度的葡聚糖溶液。
[0035]获得的葡聚糖溶液基本上不需进行纯化，包括直到使用的时候。换一种表达方式，在这种情况下，细胞材料和/或发酵培养基未与该葡聚糖溶液分离。换言之，它可以包含一些或所有的细胞材料和发酵培养基。具体地讲，该溶液可以包含细菌、酶、连同培养液的盐和元素。
[0036]为了促进微生物的生长，增加培养基的充氧量的水平。在实践中，在发酵开始时的充氧量(oxygenation)大约为0.25vvm,发酵开始时是希望微生物在其期间进行增殖的一个步骤。其次，减少充氧量以促进酶的形成及其活性，并且因此促进蔗糖到葡聚糖的生物聚合反应。在实践中，例如将充氧量降低至大约0.1vvm的值。
[0037]单位vvm对应于:相对于在其中进行葡聚糖生产的反应器的填充体积而言向培养基中引入的空气的体积。
[0038]如稍后将看到的，生产的葡聚糖具有高的分子量。因此，发酵培养基是相当粘稠的。发酵培养基的搅拌必须是充分的，以确保酶葡聚糖蔗糖酶与蔗糖之间的质量传递，并且因此促进整个发酵罐的发酵的同质性。在实践中，将发酵培养基在100rev/min与1000rev/min之间进行搅拌,优选在200rev/min与500rev/min之间。本领域的普通技术人员能够结合微生物的生长、由搅拌产生的氧浓度以及蔗糖消耗来完美地调节这个参数。
[0039]从现有技术已知，发酵将一定比例的蔗糖转化为酸，这导致pH的下降，通常从7.2下降至4.3。观察到三个阶段:
[0040]-第一阶段，在此期间将pH调节至7.2，微生物生长的最佳条件；
[0041]-第二阶段，在此期间将pH调节至6.6，酶形成的最佳条件；
[0042]-第三阶段，在此期间将pH调节至5.2，葡聚糖形成的最佳条件。
[0043]为了优化这3个阶段，常规地通过氢氧化钠或氨的受控连续添加来调节pH，从而将PH控制至7.2、或6.6或5.2的恒定值。这个操作需要昂贵的专用设备。
[0044]本 申请人:出人意料地发现，可以通过添加比通常所用量大得多的一定量的缓冲液来控制pH，不受限制并且无需额外的设备。
[0045]更精确地，将初始pH升高至高于7.5的值，优选高于8。然后，根据本发明，借助大量的一种或多种缓冲盐来控制PH的下降。具体而言，在发酵过程中，通常利用0.1wt.%的量的缓冲盐(例如磷酸氢二钠或磷酸氢二钾)，然而根据本发明，添加的至少一种缓冲盐的量为至少0.5wt.%，有利地为至少Iwt.%，优选至少2wt.%。这使得有可能控制pH的下降并且优化微生物的生长(最佳pH为7.2)和酶的形成(最佳pH为6.6)、以及葡聚糖的形成(最佳pH为5.2)的阶段的持续时间，同时不受通过添加氢氧化钠或氨型的碱的溶液来对三种不同PH值进行设计并调节的限制。
[0046]也可以使用其他缓冲盐，例如磷酸铵、硼酸钠或柠檬酸钠。
[0047]尽管最佳生长在pH7.2处，但是如已经提及的，发现以pH8.0的起始pH获得了令人满意的生长率。在这个优选实施例中，在PH8.0处开始发酵。它允许从发酵一开始就积累葡聚糖，因此获得高于IOwt.%、优选高于14wt.%、并且更优选高于18wt.%的最终的葡聚糖浓度。
[0048]有利的是，在pH高于5、优选5.4、任选5.3处停止发酵，这高于常规的4.5-4.8的值。本 申请人:出人意料地发现，在pH5.4、任选5.3处停止发酵使得改进由此生产的葡聚糖溶液的絮凝和稠化性能成为可能。而且，以在PH5.4、任选5.3处停止发酵形成并获得的葡聚糖对应于最大粘度的葡聚糖。
[0049]在实践中，进行培养和生物转化的温度在15°C与35°C之间。在一个优选实施例中，初始温度是在25°C 与35°C之间，持续4h与8h之间的时期，这使得优化微生物的生长成为可能。然后，降低温度并且在18°C与24°C之间，持续发酵的剩余时间，即，持续10小时与30小时之间的时期，以用于优化酶和葡聚糖的形成。
[0050]在一个优选实施例中，并且与通常的技术相反，包括细菌菌株的生产、酶的生产以及葡聚糖的生产的步骤在内的发酵是在同一反应器中进行，这简化了生产。
[0051]相当出人意料地，并且与常规实践相反，该方法可以在基本上未灭菌的反应器中进行。
[0052]有利的是:
[0053]-在使用之前，用具有低于Iμ m、优选小于或等于0.3μπι的直径的过滤器将水预过滤；
[0054]-在使用之前，用具有低于0.5 μ m、优选小于或等于0.3 μ m的直径的过滤器将空气预过滤；
[0055]-接种物比例是在0.5与30之间，优选在I与20之间，非常优选在5与10之间。接种物比例对应于向发酵罐中添加的预培养溶液占发酵罐中总体积的体积百分比。
[0056]根据本发明，本发明的葡聚糖的分子量在100 000g/mol与5亿g/mol之间变化。优选地，它高于500 000g/mol并且非常优选在I百万g/mol与5千万g/mol之间。
[0057]因此，本发明还涉及可以通过以上所述的方法获得的以下基本上未纯化的葡聚糖原溶液，该原溶液包含至少IOwt.%、有利地为至少14wt.%、优选至少18wt.%的具有在100000g/mol与5亿g/mol之间的分子量的葡聚糖。
[0058]表述“葡聚糖原溶液”指代在补加有蔗糖的情况下对以上所说明的种类的细菌培养物进行发酵时在结束时获得的葡聚糖溶液，该溶液在发酵结束时既没有基本上被纯化，也没有被浓缩。所以，该葡聚糖溶液像现在这样在该溶液中有杂质的存在下来使用。这些杂质具体是细菌细胞、溶解的细胞的组分(包括脂类、蛋白以及核酸)、酶、培养基的盐、未转化的蔗糖、其他糖(例如单糖，像果糖、二糖以及寡糖)、缓冲盐、寡肽、有机酸(例如乳酸或氨基酸)、连同培养基的其他成分。
[0059]根据本发明，该葡聚糖原溶液包含至少2wt.%、优选至少5wt.%、有利地为至少8wt.%的杂质，尤其是以上说明的一些或全部的杂质。杂质的浓度通过从该原溶液的干物质的总浓度中减去葡聚糖浓度来测量。
[0060]在用3体积的甲醇对该原溶液进行沉淀并且将沉淀物在105°C下过夜干燥之后，通过重量分析法测量葡聚糖浓度。将葡聚糖原溶液在105 °C下过夜干燥之后，通过重量分析法测量总的干物质。
[0061]本发明还涉及以上所定义的葡聚糖原溶液作为固体颗粒的水性悬浮液的絮凝剂、凝结剂、沉淀剂、沉降剂或倾析剂，亦或作为水性介质的增稠剂的用途。
[0062]更精确地讲，根据本发明的葡聚糖溶液可以在需要将水与固体颗粒分离的许多工艺中使用，这些固体颗粒可以是生物源、有机源或矿物源的。例如，我们可以提及，用于处理城市废水和工业废水的工艺，用于颗粒的絮凝、凝结和沉淀的工艺，以及用于矿业流出物的流变学修饰和抗尘操作的工艺。这里的例子尤其是用于从通过拜尔法(Bayer process)提取氧化铝而得到的水合氧化铝的絮凝，或用于从浙青砂的开采而得到的流出物的絮凝。该葡聚糖溶液还可以用作矿物晶体的生长修饰剂。
[0063]拜尔法用于通过将铝矾土溶解于极端碱性的水性溶液中而从铝矾土中提取氧化铝。在溶解结束时，获得由水和矿物颗粒(包括水合氧化铝)组成的泥、或消解物。
[0064]如已经提及的，根据本发明的葡聚糖原溶液还可以用作水性介质的增稠剂并且尤其用于增强的油回收和化妆品领域中。
[0065]取决于悬浮液的性质和葡聚糖的分子量，用于这些应用的葡聚糖的浓度可以不同。通常，所述量在Ig/吨的总固体至1000g/吨之间变化。优选地，使用的量在5g/吨与500g/吨的总固体之间变化。
[0066]对于这些应用，葡聚糖的分子量是相对高的。根据本发明的具有高于100 OOOg/mol的分子量的葡聚糖给出了良好的结果。然而,具有至少500 000g/mol、优选I百万g/mol与5千万g/mol之间的分子量的那些是优选的。在实践中，分子量将不超过5亿g/mol。
[0067]还相当出人意料的是，用基本上未纯化的葡聚糖在固体颗粒的水性悬浮液的絮凝中获得了极好的结果。实际上，通常认为培养基的杂质和有机材料(例如细菌、酶、盐以及发酵培养基的有机组分)对于此类型的应用是不希望的，因为它们降低絮凝性能。但是出人意料地，即使它基本上是未纯化的，但是本发明的葡聚糖溶液是有效的。
[0068]在此类型的应用中，可以将葡聚糖溶液与任何其他常规使用的添加剂进行组合，这些添加剂例如水溶性聚合物，并且尤其是基于丙烯酰胺、丙烯酸酯、异羟肟酸、多胺、或二烯丙基二甲基氯化铵的那些。
[0069]本发明以及来源于它的优点将从以下实例中变得清楚。
[0070]在这些实例和在本说明书中，使用的术语具有以下定义。
[0071]术语接种意指将一定量的微生物水性悬浮液转移至大量的水性介质中以允许这些微生物更大量地发育并且增殖。[0072]术语琼脂指代通常用于皮氏培养皿(Petri dish)中的液体培养基的胶凝并且充当用于微生物发育的基质的化合物。
[0073]术语MRS培养基对应于一种常规使用的培养基，其构成如下(/升水性制品):
[0074]-蛋白胨10.0g
[0075]-肉膏8.0g
[0076]-酵母提取物4.0g
[0077]-葡萄糖20.0g
[0078]-三水合乙酸钠5.0g
[0079]-柠檬酸铵2.0g
[0080]-吐温80 lml
[0081]-磷酸氢钾2.0g
[0082]-七水合硫酸镁0.2g
[0083]-四水合硫酸锰0.05g
[0084]实例1:无需浓缩步骤并且无需纯化的高浓度的葡聚糖溶液的生产
[0085]将短于一周的肠膜明串珠菌B512的新鲜培养物接种于MRS培养基中，其中20g的葡萄糖已经被20g的蔗糖替换，补加有20g/L的琼脂、100ml的没有琼脂的相同的培养基，预先在121°C下灭菌20min。在伴随150rpm的搅拌下，将此培养物在30°C下培育24h。然后，将此预培养物转移至5L的没有琼脂的相同的已灭菌培养基中。将它以同样的方式进行培育，并且然后将其转移至100L的没有琼脂的相同的已灭菌培养基中。在2000L的已灭菌培养基中进行同样的操作。将这个最后的预培养物接种于14000L的水中，该水包含没有琼脂、补加有16wt.%蔗糖、2.25%磷酸氢二钾以及0.05%Rhodorsil481消泡剂的相同的培养基。培养基未灭菌但是将水事先在0.22 μ m下进行过滤。在30°C下发酵5h并且连续添加0.25vvm的在0.22 μ m下进行过滤的空气之后，将温度降至22°C。发酵1Oh之后，将它降至
0.1vvm的空气并且添加6%的蔗糖，并且在14h之后，再次添加6%的蔗糖。发酵15h之后，停止通气。18h之后，在发酵液中获得18.6%的葡聚糖干物质，该发酵液包含生物质以及其他杂质。
[0086]实例2:葡聚糖的纯化
[0087]将50kg的从根据实例1的发酵获得的葡聚糖原溶液进行稀释，并且与200kg的去离子水混合。将此混合物在具有500kD的截止值的中空聚砜纤维类型的超滤膜上通过透析进行切线过滤，从而去除来自该培养基的所有盐类以及其他杂质。穿过膜的发酵培养基的盐被包含在滤液(穿过过滤器的那些)中。经由渗余物(没有穿过过滤器的那些)的再循环将葡聚糖浓缩直至葡聚糖的初始体积。
[0088]再次将50kg的渗余物用200kg的去离子水进行稀释，并且再次通过透析过滤和再循环进行浓缩，直到以69.2%的产率获得44kg的被纯化至14.7%浓度的葡聚糖。
[0089]实例3:未纯化的葡聚糖相对于纯化的葡聚糖的效力
[0090]将参照品纯化的葡聚糖以及来自实例1和2的那些在500ml的去离子水中稀释至
0.1%的活性物质的浓度。使用磁棒将它们在搅拌板上剧烈搅拌30min。
[0091]平行地，为了去除由拜尔法获得的消解物中的水合氧化铝的浓缩物中的变化，进行以下操作。将80g的从氧化铝矿或消解物(直接取自氧化铝采矿工厂)中获得的干燥的水合氧化铝混合于I升的拜尔液(Bayer liquor)中，然后过滤以去除水合氧化铝。
[0092]使用放置于加热至65°C的浴中的1000-ml刻度量筒进行测试。相对于水合氧化铝的量，以从2g/t至20g/t活性物质的比率添加葡聚糖。因为一个矿井与另一个矿井、并且在同一个矿井中某天与第二天的水合氧化铝的浓度会变化，因此这个装置被广泛地用于工业中。所以，相对于水合氧化铝的量来调节葡聚糖的量是必要的。
[0093]在从1000ml至700ml的范围内，以m/s来测量沉降速率。这是澄清的上清液与浓缩的悬浮液之间的分离的水平面从1000ml刻度到700ml所用的时间。
[0094]在沉降15min之后，通过确定获得的上清液的干物质的量来评估上清液的澄清度:从刻度量筒中取出100ml的上清液，然后过滤、干燥(在105°C下2小时)，并且对上清液称重。
[0095]通过观察量筒底部的沉积物对压实度进行评估，并且10分钟之后借助刻度量筒进行测量。所有的测试进行三次并且得到平均值。
[0096]结果:
[0097]A.中国庐山的氧化铝矿
【权利要求】
1.生产一种葡聚糖溶液的微生物学方法，根据该方法，用能够生产葡聚糖的一种细菌菌株的预培养物对一种包含蔗糖的培养基进行接种，然后直接回收在发酵结束时获得的葡聚糖溶液，无需随后的浓缩步骤，其特征在于: -在接种之前，该培养基包含至少IOwt.%的鹿糖， -在接种之后，在使得该培养基中的包括在接种之前存在的蔗糖的蔗糖总量是至少16wt.%的条件下,再次添加鹿糖。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于接种之后，向该培养基中连续地或不连续地添加蔗糖。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于接种之后，至少添加两次蔗糖。
4.根据以上权利要求之一所述的方法，其特征在于添加的包括存在于补加培养基中的鹿糖的鹿糖总量是至少20wt.%,优选至少25wt.%。
5.根据以上权利要求之一所述的方法，其特征在于在发酵开始时将pH固定在值8处，然后在高于5的值处停止反应。
6.根据以上权利要求之一所述的方法，其特征在于在发酵过程中，添加至少0.5wt.%的至少一种缓冲盐，有利地为至少Iwt.%、优选至少2wt.%的盐。
7.根据以上权利要求之一所述的方法，其特征在于该细菌菌株是肠膜明串珠菌B512的菌株。
8.根据以上权利要求之一所述的方法，其特征在于在同一个反应器中进行包括该细菌菌株的生产、酶的生产以及葡聚糖的生产的步骤在内的发酵。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于该反应器基本上是未灭菌的。
10.通过根据权利要求1至9之一所述的过程可获得的包含至少14wt.%、有利地为至少18wt.%的葡聚糖的基本上未纯化的葡聚糖原溶液。
11.根据权利要求10所述的葡聚糖原溶液，其特征在于它包含至少2wt.%、优选至少5wt.%、有利地为至少8wt.%的杂质。
12.根据权利要求10或11之一所述的葡聚糖原溶液，其特征在于，该葡聚糖的分子量在100000g/mol与5亿g/mol之间，有利地为500000g/mol并且优选是在I百万g/mol与5千万g/mol之间。
13.根据权利要求11至12之一所述的葡聚糖原溶液作为固体颗粒的水性悬浮液的絮凝剂、凝结剂、沉淀剂、沉降剂或倾析剂，亦或作为水性介质的增稠剂的用途。
14.根据权利要求11至12之一所述的葡聚糖原溶液作为从氧化铝提取得到的水合氧化铝的一种絮凝剂的用途。
【文档编号】B01D21/01GK103620048SQ201280031033
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2012年6月18日 优先权日:2011年8月1日
【发明者】马尔科·威泽 申请人:S.P.C.M.股份公司