血液灌流用的细胞因子吸附剂及其制备方法
【专利摘要】血液灌流用的细胞因子吸附剂及其制备方法，其中血液灌流用的细胞因子吸附剂包括作为吸附剂基质的亲水性载体和利用化学交联固定在载体表面的疏水性配基，其中疏水性配基为含有4－18个碳原子的长链对烷基苯胺及其衍生物。具有对细胞因子吸附效果好，安全性高，成本低等优点。
【专利说明】血液灌流用的细胞因子吸附剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种用于细胞因子吸附剂及其制备方法，特别是血液灌流用的细胞因子吸附剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]脓毒症(S印sis)和脓毒症性休克(S印tic Shock)患者的死亡率在25%-80%之间，有研究报道声称，即使在拥有最先进医疗技术的美国，其每年新增脓毒症患者亦超过75万，其中有超过 21 万患者死亡(Crit Care Med 2001;29:1303 - 1310)。
[0003]脓毒症是由一系列炎性、免疫细胞及其衍生的多种炎性介质、细胞因子、凝血物质、氧自由基等参与的，错综复杂且具有网络特征的生理-病理反应过程。在病情进展中，这种生理-病理反应过程放大被称为“炎症反应瀑布(Cascade) ”，它使患者多个器官系统发生功能障碍或衰竭。TNF-a、IL-1a、IL_6和IL_8是内源性细胞调节因子，为激活细胞因子级联反应的主要初级细胞因子，是细胞因子爆发的中心。因此，有效地抑制TNF-a、IL-1 a、IL-6和IL_8的水平有利于降低SIRS的病死率。在重症监护室(I⑶)中，快速清除大量的细胞因子往往成为救治的关键。细胞因子的分子量在12~17KDa之间，因此常规的血液透析和腹膜透析对清除细胞因子基本无效。
[0004]血液吸附疗法主要依靠吸附剂直接吸附清除血液中的有毒成分和致病物质，达到净化血液，缓解或治疗疾病的目的。对一些重大疑难疾病，血液吸附疗法有很好的疗效，是临床上不可缺少的一种治疗手段。采用血液吸附治疗的方法可以快速去除细胞因子等炎性介质，如，美国CytoSorbents公司的Cytosorb頂口及附剂[Young, et al.Pat.U.S.N0.7875182; 2011】利用交联苯乙烯骨架的疏水性和吸附剂特殊的孔结构有效吸附细胞因子。国内有将连续性血液净化用于临床的报道，但效果不明显【余晨等，肾脏病与透析肾移植杂志，2004，13(5):401】。
[0005]综上，有必要开发更多新的血液灌流用的细胞因子吸附剂。
【发明内容】
[0006]本发明要解决的技术问题之一是提供一种新的可血液灌流用的细胞因子吸附剂。
[0007]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为:血液灌流用的细胞因子吸附剂，包括作为吸附剂基质的亲水性载体和利用化学交联固定在所述载体表面的疏水性配基，其中疏水性配基为含有4 一 18个碳原子的长链对烷基苯胺及其衍生物。
[0008]较好的方案为含有4 一 18个碳原子的对烷基苯胺为对丁基苯胺、对辛基苯胺、对十二烷基苯胺、对十四烷基苯胺、对十六烷基苯胺、对十八烷基苯胺中的一种或几种。
[0009]更好的方案为亲水性载体是粒度为50-1500 μ m的纤维素微球、琼脂糖微球、聚乙烯醇微球中的一种或多种。
[0010]再好的方案为微球的粒度为50-150 μ m。
[0011]本发明血液灌流用的细胞因子吸附剂采用具有4 - 18个碳原子的长链对烷基苯胺及其衍生物作为疏水性配基，利用长链对烷基苯胺化合物与载体上的环氧基团通过共价键链接到载体上，长链烷基可以利用其疏水性和动态伸展性增加对细胞因子类致病物质的吸附能力。本发明中，配基可以是含有4 一 18个碳原子的对烷基苯胺化合物及它们的衍生物中的一种或多种的混合物，优选对丁基苯胺、对辛基苯胺、对十二烷基苯胺、对十四烷基苯胺、对十六烷基苯胺、对十八烷基苯胺及它们的衍生物中的一种或几种，更优选的是对十二烷基苯胺及其衍生物。
[0012]本发明血液灌流用的细胞因子吸附剂由具有良好生物相容性的亲水性载体和能捕获细胞因子的疏水性配基组成，血液相容性更好，安全性高，且能够相对特异性的吸附细胞因子。亲水性载体材料能提供更好的血液相容性，更适宜于作临床治疗的吸附剂载体；而吸附剂利用配基的疏水性捕获细胞因子，再通过载体上经过优化设计的适宜的孔径结构，能够相对特异性的吸附细胞因子，达到高效清除细胞因子的目的。使用本发明血液灌流用的细胞因子吸附剂进行血液灌流，细胞因子的清除率高，特别是可高效清除患者体内的IL-1a、IL-6、IL-8、TNF_a等细胞因子，其中对IL_6的清除率可达90%以上。
[0013]本发明要解决的另一技术问题是提供一种用于血液灌流的细胞因子吸附剂的制备方法。
[0014]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为:制备血液灌流用的细胞因子吸附剂的方法，所述血液灌流用的细胞因子吸附剂包括作为吸附剂基质的亲水性载体和利用化学交联固定在所述载体表面的疏水性配基，其中所述疏水性配基为含有4 - 18个碳原子的对烷基苯胺及其衍生物，方法包括以下步骤:
步骤一:2_氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺的合成
向40?100质量份甲苯中加入I?18质量份含有4?18个碳原子的对烷基苯胺、30?70质量份10wt%碳酸钠溶液，于20?30°C下滴加I?8质量份氯乙酰氯，在20?30°C下保温搅拌反应3-6h ;反应完成后，搅拌冷却、过滤、干燥，得产品2-氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺；
步骤二:配基的接枝反应
向0.5?2.5质量份的无水碳酸钾中加入5?9质量份N，N- 二甲基甲酰胺和I?5质量份丙酮的混合溶液，再加入0.05?0.5质量份载体和0.005-0.015质量份四丁基溴化铵，然后加入由步骤一合成的2-氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺0.02?0.5质量份，室温下反应10?16h，反应完成后将丙酮蒸出，分别用水、饱和食盐水洗涤，用乙醇洗涤除去N, N- 二甲基甲酰胺，即得到接枝后的吸附剂；其中，所述载体为多孔纤维素微球、琼脂糖微球或聚乙烯醇微球中的一种。
[0015]较好的方案为含有4?18个碳原子的对烷基苯胺为对辛基苯胺、对十二烷基苯胺、对十四烷基苯胺、对十六烷基苯胺、对十八烷基苯胺中的一种或几种。
[0016]更好的方案为亲水性载体是粒度为50-1500 μ m的纤维素微球、琼脂糖微球、聚乙烯醇微球中的一种或多种。
[0017]再好的方案为微球的粒度为50-150 μ m。
[0018]本发明制备血液灌流用的细胞因子吸附剂的方法的步骤一的反应过程可以用式I来表达，其中R表示含有4 一 18个碳原子的烷基。
[0019]式1:
【权利要求】
1.血液灌流用的细胞因子吸附剂，包括作为吸附剂基质的亲水性载体和利用化学交联固定在所述载体表面的疏水性配基，其特征在于: 所述疏水性配基为含有4 - 18个碳原子的对烷基苯胺及其衍生物。
2.根据权利要求1所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于:所述含有4-18个碳原子的对烷基苯胺为对丁基苯胺、对辛基苯胺、对十二烷基苯胺、对十四烷基苯胺、对十六烷基苯胺、对十八烷基苯胺中的一种或几种。
3.根据权利要求1至2任一项所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于:所述亲水性载体是粒度为50-1500 μ m的纤维素微球、琼脂糖微球、聚乙烯醇微球中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于:所述微球的粒度为 50-150 μ m。
5.制备血液灌流用的细胞因子吸附剂的方法，所述血液灌流用的细胞因子吸附剂包括作为吸附剂基质的亲水性载体和利用化学交联固定在所述载体表面的疏水性配基，其中所述疏水性配基为含有4 一 18个碳原子的对烷基苯胺及其衍生物，其特征在于: 所述方法包括以下步骤: 步骤一:2_氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺的合成 向40?100质量份甲苯中加入I?18质量份含有4?18个碳原子的对烷基苯胺、30?70质量份10wt%碳酸钠溶液，于20?30°C下滴加I?8质量份氯乙酰氯，在20?30°C下保温搅拌反应3-6h ;反应完成后，搅拌冷却、过滤、干燥，得产品2-氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺； 步骤二:配基的接枝反应 向0.5?2.5质量份的无水碳酸钾中加入5?9质量份N，N- 二甲基甲酰胺和I?5质量份丙酮的混合溶液，再加入0.05?0.5质量份载体和0.005-0.015质量份四丁基溴化铵，然后加入由步骤一合成的2-氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺0.02?0.5质量份，室温下反应10?16h，反应完成后将丙酮蒸出，分别用水、饱和食盐水洗涤，用乙醇洗涤除去N, N-二甲基甲酰胺，即得到接枝后的吸附剂；其中，所述载体为多孔纤维素微球、琼脂糖微球或聚乙烯醇微球中的一种。
6.根据权利要求5所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于:所述含有4?18个碳原子的对烷基苯胺为对丁基苯胺、对辛基苯胺、对十二烷基苯胺、对十四烷基苯胺、对十六烷基苯胺、对十八烷基苯胺中的一种或几种。
7.根据权利要求6所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于:所述亲水性载体是粒度为50-1500 μ m的纤维素微球、琼脂糖微球、聚乙烯醇微球中的一种或多种。
8.根据权利要求8所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于: 所述微球的粒度为50-150 μ m。
9.根据权利要求5至8任一项所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于: 所述步骤二中所述2-氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺的用量为0.1-0.5质量份。
10.根据权利要求5至8任一项所述的血液灌流用的细胞因子吸附剂，其特征在于: 所述步骤二中所述2-氯-N-(4-烷基苯胺)乙酰胺的用量为0.1-0.3质量份。
【文档编号】B01J20/26GK103585977SQ201310593832
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年11月22日 优先权日:2013年11月22日
【发明者】董凡 申请人:珠海健帆生物科技股份有限公司