专利名称：一种鹤草酚薄层鉴别方法
技术领域：
本发明属于药物分析领域，涉及一种使用薄层色谱快速鉴别鹤草酚的方法。
背景技术：
仙鹤草是蔷薇科植物龙牙草的干燥地上部分，性味归经苦、涩，平。其含有的鹤草酹(agrimol)属于间苯三酹类化合物,现已发现有鹤草酹A、B、C、D、E、F等多种成分。仙鹤草具有明显的抗疟杀虫及抗癌作用。以仙鹤草为成分的中药制剂日益增加，在质量控制中对于鹤草酚的鉴别判断非常重要。目前常采用石油醚-乙酸乙酯-乙酸(2010版药典收载方法)系统作为展开剂进行薄层分析，此方法存在展开结果不能直接观察，需要喷以硫酸乙醇溶液，高温加热后才能显示斑点进行观察的弊端，操作过程繁琐，检验周期延长。本发明采用二氯甲烷-甲醇系统进行展开，展开后样品可在紫外灯下直接观察， 操作简单，检验周期缩短。
发明内容
本发明目的在于提供一种使用薄层色谱快速鉴别鹤草酚的方法。其中，鉴别样品包括含有鹤草酚的中药材及其饮片，包括仙鹤草、朝鲜龙芽草、大花龙芽草、小花龙芽草等；含有鹤草酚的中药制剂。本发明所述的鉴别法操作简单，速度快。本发明的鉴别方法，包括以下步骤I)制得鹤草酚溶液；2)在硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开。3)置紫外光灯(365nm)下检视；样品的薄层展开以二氯甲烷-甲醇系统为展开剂；使用低分子醇类调节二氯甲烷的极性利于展开，包括甲醇与乙醇，以甲醇为佳，甲醇使用比例为O. 02% -5%，以1%为佳。展开后的样品可在紫外灯下直接检查，所用波长为350nm-380nm，以365nm为佳。
具体实施例方式通过以下具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的限制。实施例I、仙鹤草药材鉴别试验取本品2g，加石油醚(60°C -90°C )40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸于。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1_2，三氯甲烷 IOml提取，水洗涤，浓缩至Iml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例2、鹤仙灵颗粒鉴别试验取本品5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷 Iml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60°C -90°C ) 40ml，超声处理 30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节PH值1-2，三氯甲烷IOml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例3、朝鲜龙芽草鉴别试验取本品2g，加石油醚(60°C -90°C ) 40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1_2，三氯甲烷 IOml提取，水洗涤，浓缩至Iml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10μ 1，对照药材溶液10μ 1，对照品溶液10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例4、大花龙芽草鉴别试验取本品2g，加石油醚(60°C -90°C ) 40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1_2，三氯甲烷 IOml提取，水洗涤，浓缩至Iml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例5、小花龙芽草鉴别试验取本品2g，加石油醚(60°C -90°C ) 40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1_2，三氯甲烷 IOml提取，水洗涤，浓缩至Iml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制得对照药材溶液。再取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例6、含有仙鹤草成分的某中药片剂鉴别试验取本品2g，研碎，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷Iml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60°C -90°C )40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节PH值1-2，三氯甲烷IOml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例7、含有仙鹤草成分的某中药口服液鉴别试验取本品10ml，用稀盐酸调节pH值1-2，加三氯甲烷40ml振摇提取，水洗涤，浓缩至 Iml作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60°C -90°C ) 40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节pH值1-2，三氯甲烷IOml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B 对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例8、以二氯甲烷-甲醇(10 O. 02)为展开剂试验取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷Iml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60°C -90°C )40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节PH值1-2，三氯甲烷IOml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. 02)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例9、以二氯甲烷-甲醇(10 O. 5)为展开剂试验 取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷Iml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60°C -90°C )40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节PH值1-2，三氯甲烷IOml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例10、紫外灯下350nm处检查样品薄层色谱分析结果取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷Iml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60°C -90°C )40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节PH值1-2，三氯甲烷IOml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10μ 1，对照药材溶液10μ 1，对照品溶液10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(350nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。实施例11、紫外灯下380nm处检查样品薄层色谱分析结果取参仙灵颗粒5g，加三氯甲烷40ml回流提取90分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷Iml溶解，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，加石油醚(60°C -90°C )40ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干。残渣加三氯甲烷IOml溶解，5%氢氧化钠溶液IOml振摇提取，用稀盐酸调节PH值1-2，三氯甲烷IOml提取，水洗涤，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。取仙鹤草酚B对照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)操作，吸取供试品溶液 10 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(380nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品相应位置上，现相同颜色荧光斑点。
权利要求
1.一种鉴别鹤草酚的方法，其特征在于，包括以下步骤1)制得鹤草酚溶液；2)在硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10 0.1)为展开剂，展开；3)置紫外光灯(365nm)下检视。
2.根据权利要求I所述方法，其特征在于快速鉴别含有鹤草酚的中药材及其饮片，包括仙鹤草、朝鲜龙芽草、大花龙芽草、小花龙芽草等；含有鹤草酚的中药制剂。
3.根据权利要求I所述方法，其特征在于，以二氯甲烷-甲醇系统为展开剂。
4.根据权利要求I所述方法，其特征在于，使用低分子醇类调节二氯甲烷的极性利于展开，包括甲醇与乙醇，以甲醇为佳。
5.根据权利要求I所述方法，其特征在于，作为极性调节剂的甲醇使用比例为O.02% -5%，以 1%为佳。
6.根据权利要求I所述方法，其特征在于，使用紫外灯检查在硅胶板上经展开的鹤草酚。
7.根据权利要求I所述方法，其特征在于，使用紫外灯检查在硅胶板上经展开的鹤草酌■所用波长为350nm-380nm,以365nm为佳。
全文摘要
本发明属于药物分析领域，本发明目的在于提供一种使用薄层色谱快速鉴别鹤草酚的方法。本发明所述的鉴别法操作简单，速度快。本发明的鉴别方法，包括以下步骤1)制得鹤草酚溶液；2)在硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(10∶0.1)为展开剂，展开；3)置紫外光灯(365nm)下检视。
文档编号G01N30/94GK102608255SQ20121006558
公开日2012年7月25日 申请日期2012年3月14日 优先权日2012年3月14日
发明者周永刚, 蓝晓红, 魏玮 申请人:周永刚, 蓝晓红, 魏玮