专利名称：一种治疗肾功能衰竭中药的制备方法及质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的制备方法及质量检测方法，具体是一种治疗肾功能衰竭的中药的制备方法及质量检测方法。
背景技术：
中药大黄和太子参是中成药肾衰宁的主要成份。中药大黄为寥科植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的根和根茎。分布于陕西、甘肃东南部、青海、四川西部、云南西北部及西藏东部。太子参，为石竹科多年生草本植物异叶假繁缕的块根，分布于华东、华中、华北、东北和西北等地，药材主产于江苏、山东，安徽等地亦产。这两味中药是中成药肾衰宁的主要成份，由于品种、产地和采收季节的不同，药品中的有效成分含量也就不同，导致直接采用原料药生产的肾衰宁药物产品中的有效成分不稳定，有效成分不可控。由于大黄和太子参这两味药性味苦寒，有的体弱患者服用现有技术生产的肾衰宁后出现腹泻，严重的甚至出现脱水。
发明内容
本发明的目的在于改善现有肾衰宁药物性寒的特点，也为改善药物中大黄和太子参的有效成分提取不完全，有效成分不稳定，有效成分不可控的问题，提供一种治疗肾功能衰竭的中药制剂的制备方法及质量检测方法的技术方案。本发明的技术方案为:一种治疗肾功能衰竭的中药的制备方法，具体步骤如下:
(1)按重量份备中药原料
太子参 200-300，大黄 500-700，黄连 80-120，茯苓 150-250，法半夏 200-300，
丹参 600-800，陈皮 80-120，红花 80-120，牛膝 150-250,甘草 80-120 ；
(2)制备大黄粉
取三分之一的大黄粉碎至140— 200目，灭菌，为大黄生粉备用，
另三分之二大黄粉碎至80—100目，用浓度20 %的乙醇浸没，加温至55-65 V，保温40-48小时，用浓度70-85%的乙醇8_10倍量(w/v)提取3次，每次I小时，提取温度80—850C，过滤合并提取液，浓缩为大黄浸膏，加入大黄生粉，搅拌均匀干燥，粉碎至120 —140目为大黄粉；
(3)制备太子参粉
太子参粉碎至80—100目，用浓度20%的乙醇浸没，加温至55-65°C，保温48-72小时，用浓度70%的乙醇8-10倍量(w/v)提取3次，每次I小时，提取温度80— 85°C，过滤合并提取液，浓缩为太子参浸膏，干燥，粉碎至120—140目为太子参粉；
(4)制备稠膏
将丹参、黄连、茯苓、法半夏、陈皮、红花、牛膝及甘草8味中药加水煎煮三次，第一次药材量:水=l:4(w/v)，煮3 小时；第二次药材量:水=l:3(w/v)，煮2小时；第三次药材量冰=l:2(w/v)，煮I小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至1:1，加乙醇使含醇量达60% — 65%，充分搅拌，静置48— 72小时，滤过，滤液减压浓缩成相对密度1.30 1.35/80°C的稠膏；
(5)制剂
将步骤(4)制备的稠膏、步骤(2)制备的大黄粉与步骤(3)制备的太子参粉混合均匀，为制剂原料，将制剂原料按常规方法加入辅料制为颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。如步骤(5)所述制备颗粒剂的赋形剂为糊精，糊精为制剂原料重量的8-10%，校味剂为甜菊素15-25g。一种治疗肾功能衰竭的中药的质量检测方法，具体步骤如下:
(1)取按权利要求1和2制备的颗粒剂，置显微镜下观察:草酸钙簇晶大，直径60 140 μ m (大黄)；
(2)取按权利要求1和2制备的颗粒剂2g，加甲醇30ml，浸溃I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加盐酸2ml，回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品.加甲醇制成每Iml含0.2 mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以30 60°C石油醚:甲酸乙酯:甲酸=15: 5: I的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上.显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨蒸汽中熏后，日光下检视，斑点变为红色；
(3)取按权利要求1和2制备的颗粒剂20g，加水25ml，浸溃30分钟，再加乙醇80ml，加热回流2小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约5ml，加水30ml，置水浴锅上加热10分钟使溶解，放冷，滤过， 滤液加盐酸调节PH值至2，用乙醚振摇提取2次，每次25ml，合并乙醚液，用水25ml洗涤I次，分取乙醚液加活性炭脱色，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇I ml使溶解，作为供试品溶液；另取原儿茶醒对照品，加无水乙醇制成每Iml含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各IOy 1，分别点于羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:丙酮:甲酸=8: I: I为展开剂，预饱和30min，展开，取出，晾干，喷以三氯化铁试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取按权利要求1和2制备的颗粒剂3g，加甲醇50ml，盐酸5ml，加热水解2小时，趁热滤过，将药渣用20ml水洗涤，弃滤液及水洗液，滤渣70°C干燥，加甲醇50ml加热回流I小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约5ml，作为供试品溶液；另取齐墩果酸对照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品溶液5 μ 1，供试品溶液IOy 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯:乙醚:甲醇=10:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)取按权利要求1和2制备的颗粒剂6g，加乙醚30ml，加热回流20min，弃乙醚液，药洛滤干，加甲醇30ml,回流30min,过滤,滤液挥干,残洛加水30ml溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取陈皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品溶液5 μ I,供试品溶液10 μ I,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的娃胶G薄层板上，以醋酸乙酯:甲醇:水=100:17:13为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%三氯化铝溶液，热风吹干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(6)取按权利要求1和2制备的颗粒剂5g,加甲醇IOml,置水浴上加热回流15min,滤过，滤液补加甲醇使成IOml作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.05g,同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各I μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:乙酸乙酯:甲醇:异丙醇:水=6:3:1.5:1.5:0.3为展开剂，置氨蒸汽饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光主斑点，颜色的斑点。在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光主斑点；
(7)检查:符合 药典颗粒剂项下的各项规定，
含量测定:照高效液相色谱法测定，
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.4%磷酸溶液=32: 68为流动相；检测波长为345 nm ;柱温为40°C ;理论板数按盐酸小檗碱峰计算不低于4000 ；
对照品溶液的制备:取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含30 μ g的溶液；
供试品溶液的制备:取装量差异项下的权利要求1和2制备的颗粒剂约0.3g，精密称定，精密加入盐酸:甲醇=1:100的溶液50ml，称定重量，超声处理40分钟，超声波功率400W，频率50kHz，放冷，用盐酸:甲醇=1:100的溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注人液相色谱仪，测定；
本品每粒含黄连以盐酸小檗碱C2tlH17NO4.HCl计，不得少于15.0mgo所述的步骤(2)和步骤(3)中照薄层色谱法试验，是按照2010版药典附录VI B试验；步骤(7)所述的检查符合颗粒剂项下有关的各项规定是指，按照2010版药典附录I C ；步骤(7)所述的含量测定:照高效液相色谱法测定是指2010版药典附录VI D。由于大黄和太子参是肾衰宁的君药和臣药，对于肾衰宁的药效有着重大的影响，本发明重点改进了大黄和太子参的制备方法。首先减少了大黄生粉在药中的比例，将大黄生粉的比例由1/2降至1/3，使大黄生粉的苦寒性对肾衰宁药物的影响减少。本发明对大黄粉的制备加强了改性步骤，主要是在醇提大黄前增加了用低浓度乙醇浸泡，中温保温40-48小时，该步骤可改善大黄性寒的性质，还可使大黄中的大黄蒽醌类有效成分溶出量增大，使得提取率提高，产品有效成分保存完全。大黄的主要有效成分大黄蒽醌类是醇溶性物质，目前大黄的提取普遍采用醇提，但大黄中还含有多糖类、黄酮等水溶性成分，采用传统的醇提法，将使多糖类、黄酮等水溶性成分流失，而多糖类物质对提高免疫能力有非常好的效果。本发明在醇提前采用低浓度乙醇浸泡，可使大黄中的水溶性物质溶出，使大黄中的有效物质提取更完全，也更加完全保留大黄的有效成分。本发明对原料药用低浓度乙醇浸泡，中温保温，使原料中的有效成分活化，这也是提高提取率的重要措施。太子参性味苦寒，本发明在太子参的制备中加强了改性步骤，主要是由过去的水提改为醇提，在太子参醇提前增加了用低浓度乙醇浸泡，中温保温24-48小时，该步骤可改善太子参性寒的性质，还可加强太子参中的有效果成分溶出量增大，使得提取率提高，产品有效成分保存完全。太子参的主要有效成分有水溶性物质也有醇溶性物质，目前太子参的提取普遍采用水提，但太子参中还含有大量醇溶性成分，采用传统的水提法，将使醇溶性成分流失。本发明在醇提前采用低浓度乙醇浸泡，使太子参中的水溶性物质溶出，使太子参中的有效物质提取更完全，可更加完全保留太子参的有效成分。为改善中药颗粒剂较苦的口感，本发明在肾衰宁制剂中选择了不参与胰岛素代谢的甜菊素作为肾衰宁颗粒的甜味剂，使糖尿病患者也可放心使用。为保证肾衰宁药物产品中的有效成分稳定可控，本发明提出了科学的质量检测方法。本发明的制备工艺设计合理，工艺先进，可有效改善现有肾衰宁药物性寒的特点，提高大黄和太子参有效果成分溶出量，使得提取率提高，产品有效成分保存完全。也有效改善了药物中大黄和太子参的有效成分不稳定，有效成分不可控的问题。本发明的质量检测方法可保证肾衰宁药物质量稳定可控。表I两种方法提取大黄和太子参的提取物及得率
权利要求
1.一种治疗肾功能衰竭的中药的制备方法，其特征在于，具体步骤如下: (1)按重量份备中药原料 太子参 200-300，大黄 500-700，黄连 80-120，茯苓 150-250，法半夏 200-300， 丹参 600-800，陈皮 80-120，红花 80-120，牛膝 150-250,甘草 80-120 ； (2)制备大黄粉 取三分之一的大黄粉碎至140— 200目，灭菌，为大黄生粉备用， 另三分之二大黄粉碎至80—100目，用浓度20 %的乙醇浸没，加温至55-65 V，保温40-48小时，用浓度70-85%的乙醇8_10倍量(w/v)提取3次，每次I小时，提取温度80—850C，过滤合并提取液，浓缩为大黄浸膏，加入大黄生粉，搅拌均匀干燥，粉碎至120 —140目为大黄粉； (3)制备太子参粉 太子参粉碎至80—100目，用浓度20%的乙醇浸没，加温至55-65°C，保温48-72小时，用浓度70%的乙醇8-10倍量(w/v)提取3次，每次I小时，提取温度80— 85°C，过滤合并提取液，浓缩为太子参浸膏，干燥，粉碎至120—140目为太子参粉； (4)制备稠膏 将丹参、黄连、茯苓、法半夏、陈皮、红花、牛膝及甘草8味中药加水煎煮三次，第一次药材量:水=l:4(w/v)，煮3小时；第二次药材量:水=l:3(w/v)，煮2小时；第三次药材量冰=l:2(w/v)，煮I小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至1:1，加乙醇使含醇量达60% — 65%，充分搅拌，静置48— 72小时，滤过，滤液减压浓缩成相对密度1.30 1.35/80°C的稠膏； (5)制剂 将步骤(4)制备的稠膏、步骤(2)制备的大黄粉与步骤(3)制备的太子参粉混合均匀，为制剂原料，将制剂原料按常规方法加入辅料制为颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。
2.如权利要求1所述的一种治疗肾功能衰竭的中药的制备方法，其特征在于，如步骤(5 )所述制备颗粒剂的赋形剂为糊精，糊精为制剂原料重量的8-10%，校味剂为甜菊素15-25g。
3.如权利要求1所述的一种治疗肾功能衰竭的中药的质量检测方法，其特征在于，具体步骤如下: (1)取按权利要求1和2制备的颗粒剂，置显微镜下观察:草酸钙簇晶大，直径60 ,140 μ m (大黄)； (2)取按权利要求1和2制备的颗粒剂2g，加甲醇30ml，浸溃I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加盐酸2ml，回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品.加甲醇制成每Iml含0.2 mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以30 60°C石油醚:甲酸乙酯:甲酸=15: 5: I的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上.显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨蒸汽中熏后，日光下检视，斑点变为红色； (3)取按权利要求1和2制 备的颗粒剂20g，加水25ml，浸溃30分钟，再加乙醇80ml，加热回流2小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约5ml，加水30ml，置水浴锅上加热10分钟使溶解，放冷，滤过，滤液加盐酸调节PH值至2，用乙醚振摇提取2次，每次25ml，合并乙醚液，用水25ml洗涤I次，分取乙醚液加活性炭脱色，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇I ml使溶解，作为供试品溶液；另取原儿茶醒对照品，加无水乙醇制成每Iml含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各IOy 1，分别点于羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:丙酮:甲酸=8: I: I为展开剂，预饱和30min，展开，取出，晾干，喷以三氯化铁试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)取按权利要求1和2制备的颗粒剂3g，加甲醇50ml，盐酸5ml，加热水解2小时，趁热滤过，将药渣用20ml水洗涤，弃滤液及水洗液，滤渣70°C干燥，加甲醇50ml加热回流I小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约5ml，作为供试品溶液；另取齐墩果酸对照品，加甲醇制成Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品溶液5 μ 1，供试品溶液10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯:乙醚:甲醇=10:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (5)取按权利要求1和2制备的颗粒剂6g，加乙醚30ml，加热回流20min，弃乙醚液，药洛滤干，加甲醇30ml,回流30min,过滤,滤液挥干,残洛加水30ml溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取陈皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述对照品溶液5 μ I,供试品溶液10 μ I,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的娃胶G薄层板上，以醋酸乙酯:甲醇:水=100:17:13为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%三氯化铝溶液，热风吹干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (6)取按权利要求1和2制备的 颗粒剂5g,加甲醇IOml,置水浴上加热回流15min,滤过，滤液补加甲醇使成IOml作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.05g,同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每Iml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各I μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:乙酸乙酯:甲醇:异丙醇:水=6:3:1.5:1.5:0.3为展开剂，置氨蒸汽饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光主斑点，颜色的斑点； 在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光主斑点； (7)检查:符合药典颗粒剂项下的各项规定， 含量测定:照高效液相色谱法测定， 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.4%磷酸溶液=32: 68为流动相；检测波长为345 nm ;柱温为40°C ;理论板数按盐酸小檗碱峰计算不低于4000 ； 对照品溶液的制备:取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含30 μ g的溶液； 供试品溶液的制备:取装量差异项下的权利要求1和2制备的颗粒剂约0.3g，精密称定，精密加入盐酸:甲醇=1:100的溶液50ml，称定重量，超声处理40分钟，超声波功率400W，频率50kHz，放冷，用盐酸:甲醇=1:100的溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液； 测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注人液相色谱仪，测定； 本品每粒含黄连以盐酸小檗碱C2tlH17NO4.HCl计，不得少于15.0mgo
4.如权利要求3所述的一种治疗肾功能衰竭的中药的质量检测方法，其特征在于，所述的步骤(2)和步骤(3)中照薄层色谱法试验，是按照2010版药典附录VI B试验；步骤(7)所述的检查符合颗粒剂项下有关的各项规定是指，按照2010版药典附录I C ;步骤(7)所述的含量测定:照高效液 相色谱法测定是指2010版药典附录VI D。
全文摘要
一种治疗肾功能衰竭的中药的制备方法:备中药原料.太子参、大黄、黄连、茯苓、法半夏、丹参、陈皮80-120、红花、牛膝、甘草；制备大黄粉，制备太子参粉，制备稠膏，制剂。其质量检测方法检查符合药典颗粒剂项下的各项规定，含量测定照高效液相色谱法测定，本品每粒含黄连以盐酸小檗碱C20H17NO4·HCl计，不得少于15.0mg。本发明的制备工艺设计合理，工艺先进，可有效改善现有肾衰宁药物性寒的特点，提高大黄和太子参有效果成分溶出量，使得提取率提高，产品有效成分保存完全。也有效改善了药物中大黄和太子参的有效成分不稳定，有效成分不可控的问题。本发明的质量检测方法可保证肾衰宁药物质量稳定可控。
文档编号G01N30/02GK103071006SQ20131004957
公开日2013年5月1日 申请日期2013年2月7日 优先权日2013年2月7日
发明者赵红, 罗实, 李家伟 申请人:云南理想药业有限公司