水杨醛吖嗪及其衍生物在蛋白质荧光检测中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及蛋白质荧光检测技术，具体地说是水杨醛吖嗪(Salicylaldehyde azine)及其衍生物在蛋白质荧光检测中的应用。本发明还提供了应用水杨醛吖嗪进行蛋白质荧光检测的方法，包括步骤：将蛋白质样品电泳后的凝胶在固定液中固定，去离子水冲洗；染色；酸洗；碱液脱色；酸洗；检测。本发明具有灵敏度高、操作简单迅速、重现性好、染色背景好、线性关系好、可逆性好、兼容性好、使用安全、成本低等优点。
【专利说明】水杨醇p 丫睫及其衍生物在蛋白质巧光检测中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及蛋白质英光检测技术，具体地说涉及蛋白质的一种新的英光染料。
【背景技术】
[0002] 在生命科学研究领域，离不开对生命的基本物质蛋白质和DNA的研究，也就离不 开对蛋白质的检测技术。尤其是最近几年，随着基因组学和蛋白质组学的飞速发展，使我们 对蛋白质的分离检测技术有了更高的要求。
[0003] 蛋白质的检测方法有很多，包括浊度法、凯氏定氮法、吸光光度法、英光光度法，W 及新发展起来的共振瑞利散射法、高效液相色谱法、毛细管电泳分析法。英光光度法是目前 研究最多、应用最广、操作较为简便、灵敏度较高的检测方法。
[0004] 本发明首次将水杨酸吓嗦及其衍生物应用于蛋白质英光检测，相比于其他英光检 测技术，具有众多优点，在蛋白质组学研究中将具有广泛的应用前景。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于建立一种水杨酵吓嗦及其衍生物在蛋白质英光检测中的应用。
[0006] 本发明所述的水杨酵吓嗦相关化合物是指W水杨酵吓嗦为母核的轴盐、钟盐、盐 酸盐、硫酸盐、硫酸氨盐、硝酸盐、稼酸盐、氨楓酸盐等。
[0007] 水杨酵吓嗦母核为：
[0008]
【权利要求】
1. 水杨醛吖嗪及其衍生物在蛋白质荧光检测中的应用。
2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的水杨醛吖嗪衍生物包括水杨醛吖嗪的 钠盐、钾盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、鞣酸盐、氢碘酸盐等。
3. -种蛋白质荧光检测方法，其包括步骤： 1) 将经SDS-PAGE电泳后的蛋白质样品凝胶置于固定液中固定10?60min，弃固定液， 然后用去离子水冲洗1?20min (-共2次）； 2) 加入荧光染色液染色1?30min，其中所述染色液为含按摩尔浓度比25?50 y M的 水杨醛吖嗪或其衍生物及按摩尔浓度比5?15mM氢氧化钠的水溶液； 3) 加入酸洗液洗涤5?30min，其中所述酸洗液为含按重量体积比0. 01?1 %的乙酸； 4) 加入碱洗液洗涤20?40min，其中所述碱液为含按重量体积比0. 1?1%的硼砂， 0. 1?2%的碳酸钠； 5) 加入终止液洗涤5?30min，其中所述终止液为含按重量体积比0. 01?1%的乙酸； 6) 检测。
4. 如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤1)中蛋白固定时间为20min，然后用去 离子水冲洗5min，共2次。
5. 如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)中染色的时间为5min。
6. 如权利要求2?6任一项所述的方法，其特征在于，步骤2)染色液中水杨醛吖嗪的 浓度按摩尔浓度比为25 iiM，染色液中氢氧化钠浓度为10mM。
7. 如权利要求2?6任一项所述的方法，其特征在于，步骤3)酸洗液中乙酸的浓度为 0? 1%。
8. 如权利要求2?6任一项所述的方法，其特征在于，步骤4)碱洗液中硼砂的浓度为 0. 2 %，碳酸钠的浓度为0. 5 %。
9. 如权利要求2?6任一项所述的方法，其特征在于，步骤4)碱洗时间为20min。
10. 如权利要求2?6任一项所述的方法，其特征在于，步骤5)终止液中乙酸的浓度为 0? 1%。
【文档编号】G01N21/25GK104422659SQ201310268922
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2013年8月29日 优先权日:2013年8月29日
【发明者】丛维涛, 金利泰, 朱忠欣, 洪国赢 申请人:温州安得森生物科技有限公司