一种用于治疗胃病的藏药组合物的质量检测方法
【专利摘要】本发明属于中药领域，具体涉及一种用于治疗胃病的药物组合物的质量检测。所述质量检测方法包括对所含没食子酸、藏木香、丁香、肉豆蔻和红花的薄层定性检测，和/或对所含诃子、毛诃子、余甘子中没食子酸以及红花所含羟基红花黄色素A的含量测定步骤。所述检测方法经多人多次反复操作，结果准确、重现性好、专属性强，符合准确、简便、灵敏、快速的原则，可以有效的检测产品的质量。
【专利说明】一种用于治疗胃病的藏药组合物的质量检测方法
【技术领域】
[0001]本发明属于中药领域，具体涉及一种用于治疗胃病的药物组合物的质量检测。
【背景技术】
[0002]胃病，实际上是许多病的统称。它们有相似的症状，如上腹胃脘部不适、疼痛、饭后饱胀、嗳气、返酸，甚至恶心、呕吐等等。临床上常见的胃病有急性胃炎、慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、胃十二指肠复合溃疡、胃息肉、胃结石、胃的良恶性肿瘤，还有胃粘膜脱垂症、急性胃扩张、幽门梗阻等。
[0003]人们常说的胃病，一般是指胃炎和十二指肠溃疡病。经常发生于40-50岁之间，男性多于女性。胃病的症状可以很轻也可以很重，最常见的有上腹部不适或疼痛、恶心、呕吐、腹泻、食欲不振。胃炎及十二指肠溃疡的症状则为上腹部烧灼痛，特别是在两顿饭之间，早餐前或在饮用橙汁、咖啡之后发生，严重者可有柏油便、黑便或血便。
[0004]藏医理论认为，人体内存在着“隆”(气)、“赤巴”(火)、“培根”(土和水)三大因素；饮食精微、肉、血、脂肪、骨、骨髓、精七种物质基础；大便、小便、汗液三种排泄物。三大因素支配七种物质基础和三种排泄物的运行变化。“隆”主气血、肢体活动、五官感觉、食物的输送分解和生殖机能等；“赤巴”可生发热能、调解体温气色、管饥渴消化、胆识智慧等；“培根”输送液体、调解肥瘦、主管味觉、睡眠和性格等。认为人生病的原因在于环境、气候和饮食起居的影响及体内三大因素的失调。其将疾病分为热症与寒症两大类，并将病人分为“隆”型、“赤巴”型和“培根”型。当“隆”、“赤巴” “培根”以及“血液”和“黄水”疾病混合在一起的综合性疾病的称为“木布病”。其在胃发病时，症状犹如培根病，可引起胃脘疼痛、腹胀、呕逆、消化不良，甚至胃肠溃疡出血等症。
[0005]中国专利CN101653580A公开了一种治疗胃病的药物，其处方原料药组成为煨诃子、南寒水石、冀首草、五灵脂膏、土木香、石榴子、木瓜、沉香、丁香、石灰华、红花、肉豆蘧、草豆蘧和草果仁。该药物组合物对缓解及治疗胸腹胀满及胃脘疼痛有一定的疗效，不过对于胃溃疡甚至溃疡出血等症状却鲜有疗效，尤其是对于由“木布病”引起的综合性胃疼痛及胃溃疡症状，疗效甚微。并且，鉴于本领域中对于药品质量及稳定性的要求，该文献中也并未给出有效的可对该药物组合物进行质量检测的方法。
【发明内容】
[0006]为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种可有效治疗胃病，尤其适用于“木布病”引起的胃疼痛、胃溃疡及出血的药物组合物及其制备方法，更重要的是提供了一种上述组合物的质量检测方法。
[0007]为解决上述技术问题，本发明所述的用于治疗胃病的藏药组合物的质量检测方法，所述组合物的原料药组成包括:诃子150-250重量份、毛诃子5-20重量份、余甘子20-80重量份、翼首草20-80重量份、藏木香20-80重量份、石灰华5_20重量份、红花5_20重量份、丁香5-20重量份、豆蘧5-20重量份、肉豆蘧5-20重量份、草果5_20重量份、沉香5-20重量份、石槽子5-20重量份、印度猜牙菜1-20重量份、木瓜1-20重量份、安息香1-20重量份、莪达夏1-20重量份；
[0008]所述质量检测方法包括如下定性鉴别和/或含量测定的步骤:
[0009]a)没食子酸的定性鉴别
[0010]取所述药物组合物0.5-5重量份，加甲醇1-30体积份，超声处理10-40分钟，滤过，滤液作为诃子、毛诃子、余甘子供试品溶液；
[0011]另取没食子酸对照品，加甲醇制成每I体积份含0.0005-0.003重量份没食子酸的溶液，作为对照品溶液；
[0012]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加甲醇1-30体积份，超声处理10-40分钟，滤过，滤液作为不含诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品溶液；
[0013]照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各1_4μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2-10:1-7:0.1-2.5的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为1%_3%的三氯化铁乙醇溶液，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0014]b)藏木香的定性鉴别
[0015]取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10_40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为藏木香供试品溶液；
[0016]另取藏木香对照药材0.05-1重量份，加乙醚0.5-2体积份，密塞，超声处理10_40分钟，静置，上清液作为藏木香对照药材溶液；
[0017]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述藏木香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为不含藏木香的阴性样品溶液；
[0018]照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各1_8μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12-22:0.5-7的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化秘钾试液(见《中国药典》2010年版一部);供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0019]c ) 丁香的定性鉴别
[0020]取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10_40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为丁香供试品溶液；
[0021]另取丁香对照药材0.05-0.5重量份，加乙醚0.5-5体积份，密塞，超声处理10_40分钟，静置，上清液作为丁香对照药材溶液；
[0022]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述丁香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为不含丁香的阴性样品溶液；[0023]照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各1_4μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为0.5-7.3:0.5-2.5的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液(见《中国药典》2010年版一部)，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0024]d)肉豆蘧的定性鉴别
[0025]取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10_40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为肉
?蓮供试品溶液；
[0026]另取肉豆蘧对照药材0.05-0.5重量份，加乙醚1-10体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为肉豆蘧对照药材溶液；
[0027]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述肉豆蘧的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为不含肉豆蘧的阴性样品溶液；
[0028]照薄层色谱试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各2-8 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15-25:0.5-2.5的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为3%-8%香草醛浓硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑
占.[0029]e)红花的定性鉴别
[0030]取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10_40分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮1-10体积份，超声处理10-40分钟，静置，上清液作为红花供试品溶液；
[0031]另取红花对照药材0.05-0.5重量份，加80%丙酮1_10体积份，超声处理10_40分
钟，静置，上清液作为红花对照药材溶液；
[0032]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮1-10体积份，超声处理10-40分钟，静置，上清液作为不含红花的阴性样品溶液；
[0033]照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和阴性样品溶液5_15μ 1、对照药材溶液
2-8 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2-8:0.5-4的乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展至约3cm，取出，晾干，再以体积比为3-12:0.1-5:0.1-5:0.1-1的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
[0034]f)诃子、毛诃子、余甘子中没食子酸的含量测定
[0035] 取所述药物组合物0.05-2重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25_75体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理10-45min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为供试品溶液；[0036]取没食子酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每I体积份含没食子酸0.00001-0.0001重量份的溶液，作为对照品溶液；
[0037]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物0.05-2重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25-75体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理10-45min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品溶液；
[0038]照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比0.1-5:95-99.9的乙腈-0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液为流动相；在273±2nm检测波长、柱温为25-40°C下测定；理论塔板数按没食子酸峰计算不低于1000 ;并分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各5-20μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含诃子、毛诃子、余甘子以没食子酸计，不得少于0.017重量份；
[0039]g)红花所含羟基红花黄色素A的含量测定
[0040]取所述药物组合物0.5-3重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇20-80体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理20-60分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；
[0041]取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每I体积份含羟基红花黄色素A0.000005-0.00005重量份的溶液，作为对照品溶液；
[0042]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-3重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇20-80体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理20-60分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为不含红花的阴性样品溶液；
[0043]照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比15-30:0.5-5:65-85的甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相；在403 土 2nm检测波长、柱温为25-40°C下测定；理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ;分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各5-20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含红花以羟基红花黄色素A计，不得少于0.00025重量份；
[0044]所述重量份与体积份的关系为g/ml。
[0045]进一步的，所述的质量检测方法，包括如下定性鉴别和/或含量测定的步骤:
[0046]a)没食子酸的定性鉴别
[0047]取所述药物组合物I重量份，加甲醇5体积份，超声处理20分钟，滤过，滤液作为诃子、毛诃子、余甘子供试品溶液；
[0048]另取没食子酸对照品，加甲醇制成每I体积份含0.001重量份没食子酸的溶液，作为对照品溶液；
[0049]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物I重量份，加甲醇5体积份，超声处理20分钟，滤过，滤液作为不含诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品溶液；
[0050]照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各2μ 1，分另Ij点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6:4:1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为2%的三氯化铁乙醇溶液，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0051]b)藏木香的定性鉴别
[0052]取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为藏木香供试品溶液；
[0053]另取藏木香对照药材0.2重量份，加乙醚I体积份，密塞，超声处理20分钟，静置，上清液作为藏木香对照药材溶液；
[0054]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述藏木香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为不含藏木香的阴性样品溶液；
[0055]照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为17:3的60°C -90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化秘钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0056]c ) 丁香的定性鉴别
[0057]取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为丁香供试品溶液；
[0058]另取丁香对照药材0.2重量份，加乙醚3体积份，密塞，超声处理20分钟，静置，上清液作为丁香对照药材溶液；
[0059]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述丁香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为不含丁香的阴性样品溶液；
[0060]照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各2μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3:1的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0061]d)肉豆蘧的定性鉴别
[0062]取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为肉豆蘧供试品溶液；
[0063]另取肉豆蘧对照药材0.2重量份，加乙醚5体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为肉豆蘧对照药材溶液；
[0064]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述肉豆蘧的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为不含肉豆蘧的阴性样品溶液；
[0065]照薄层色谱试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20:1的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为5%香草醛浓硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
[0066]e)红花的定性鉴别
[0067]取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮5体积份，超声处理20分钟，静置，上清液作为红花供试品溶液；
[0068]另取红花对照药材0.2重量份，加80%丙酮5体积份，超声处理20分钟，静置，上清液作为红花对照药材溶液；
[0069]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮5体积份，超声处理20分钟，静置，上清液作为不含红花的阴性样品溶液；
[0070]照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和阴性样品溶液10 μ 1、对照药材溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:2的乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展至约3cm，取出，晾干，再以体积比为7:2:3:0.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
[0071]f)诃子、毛诃子、余甘子中没食子酸的含量测定
[0072]取所述药物组合物0.1重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇50体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为供试品溶液；
[0073]取没食子酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每I体积份含没食子酸0.00004重量份的溶液，作为对照品溶液；
[0074]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物0.1重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇50体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品溶液；
[0075]照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比1:99的乙腈-0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液为流动相；在273nm检测波长、柱温为30°C下测定；理论塔板数按没食子酸峰计算不低于1000 ;并分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含诃子、毛诃子、余甘子以没食子酸计，不得少于0.017重量份；
[0076]g)红花所含羟基红花黄色素A的含量测定
[0077]取所述药物组合物1.5重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；
[0078]取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每I体积份含羟基红花黄色素A0.00002重量份的溶液，作为对照品溶液；
[0079]按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物1.5重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为不含红花的阴性样品溶液；
[0080]照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比22:2:76的甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相；在40311111检测波长、柱温为30°C下测定；理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ;分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含红花以羟基红花黄色素A计，不得少于0.00025重量份。
[0081]所述组合物的原料药组成为:
[0082]诃子180-220重量份、毛诃子8_15重量份、余甘子30_70重量份、翼首草30_70重量份、藏木香30-70重量份、石灰华8-15重量份、红花8-15重量份、丁香8_15重量份、豆蘧8-15重量份、肉豆蘧8-15重量份、草果8-15重量份、沉香8_15重量份、石槽子8_15重量份、印度猜牙菜5-15重量份、木瓜5-15重量份、安息香5-15重量份、莪达夏5_15重量份。
[0083]所述组合物的原料药组成为:
[0084]诃子201.7重量份、毛诃子12.6重量份、余甘子50.4重量份、翼首草50.4重量份、藏木香50.4重量份、石灰华11.8重量份、红花11.8重量份、丁香11.8重量份、豆蘧11.8重量份、肉豆蘧11.8重量份、草果11.8重量份、沉香11.8重量份、石槽子11.8重量份、印度獐牙菜10.1重量份、木瓜10.1重量份、安息香10.1重量份、莪达夏10.1重量份。
[0085]所述组合物制成临床或药学上可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、缓释剂或口服液体制剂。
[0086]所述药物组合物由如下方法制备得到:
[0087]上述十七味药材，其中，藏木香、丁香、豆蘧、肉豆蘧、草果、沉香、安息香、红花和石灰华粉碎，过筛；诃子、毛诃子、余甘子、莪达夏加水煎煮两次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏，备用；翼首草、石榴子、印度樟芽菜和木瓜，加乙醇回流提取二次，合并滤液，滤液回收乙醇至适量，加入上述清膏，浓缩成清膏，干燥，加入药材细粉，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料制成临床上接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、缓释剂或口服液体制剂。
[0088]进一步的，所述药物组合物由如下方法制备得到:按照选定的重量份取藏木香、石灰华、红花、丁香、豆蘧、肉豆蘧、草果、沉香、安息香粉碎至0.01-200微米的粉末；另取选定重量份的诃子、毛诃子、余甘子和莪达夏加入占药物重量5-20重量倍的水，提取1-5次，得水提液；取剩余原料翼首草、石榴子、印度獐牙菜和木瓜加入占药物重量5-20重量倍的浓度大于20%的乙醇，提取1-5次，得醇提液；分别将所述水提液、醇提液浓缩至相对密度为0.5-1.35的浸膏，干燥后与前述粉碎的粉末混合，加入常规辅料按照常规工艺制成临床可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、缓释剂或口服液体制剂。
[0089]本发明所述的质量检测方法建立了对所述用于治疗胃病的药物组合物中所含没食子酸、藏木香、丁香、肉豆蘧、红花的薄层鉴别方法，专属性强，重现性较好；并建立了对处方制剂中诃子、毛诃子、余甘子所含没食子酸、红花所含羟基红花黄色素A的含量进行测定的方法，该检测方法不仅专属性强，且阴性无干扰。所述检测方法经多人多次反复操作，结果准确、重现性好、专属性强，符合准确、简便、灵敏、快速的原则，可以有效的检测产品的质量。
【专利附图】
【附图说明】[0090]为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中
[0091]图1为本发明所述的没食子酸鉴定薄层色谱图；其中，标号1-3为供试品，标号4-5为没食子酸对照品，标号6为不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品；
[0092]图2为本发明所述的藏木香鉴定薄层色谱图；其中，标号1-3为供试品，标号4-5为藏木香对照药材，标号6为不含藏木香的阴性样品；
[0093]图3为本发明所述的丁香鉴定薄层色谱图；其中，标号1-3为供试品，标号4-5为丁香对照药材，标号6为不含丁香的阴性样品；
[0094]图4为本发明所述的肉豆蘧鉴定薄层色谱图；其中，标号1-3为供试品，标号4-5为肉豆蘧对照药材，标号6为不含肉豆蘧的阴性样品；
[0095]图5为本发明所述的红花鉴定薄层色谱图；其中，标号1-3为供试品，标号4-5为红花对照药材，标号6为不含红花的阴性样品；
[0096]图6为本发明所述的诃子、毛诃子、余甘子所含没食子酸色谱图；其中，标号A-C分别为羟基红花黄色素A对照品、供试品、不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品；
[0097]图7为没食子酸的峰面积与对照品浓度的线性关系图；
[0098]图8为本发明所述的红花所含羟基红花黄色素A色谱图；其中，标号A-C分别为羟基红花黄色素A对照品、红花供试品、不含红花的阴性样品；
[0099]图9为羟基红花黄色素A的峰面积与对照品浓度的线性关系图。
【具体实施方式】
[0100]实施例1硬胶囊剂的质量检测
[0101]【处方】诃子201.7g、毛诃子12.6g、余甘子50.4g、翼首草50.4g、藏木香50.4g、石灰华11.8g、红花11.8g、丁香11.8g、豆蘧11.8g、肉豆蘧11.8g、草果11.8g、沉香11.8g、石槽子11.8g、印度猜牙菜10.lg、木瓜10.lg、安息香10.lg、莪达夏10.1g0
[0102]【方法】取藏木香、丁香、豆蘧、肉豆蘧、草果、沉香、安息香、红花和石灰华粉碎成40-50微米细粉；取诃子、毛诃子、余甘子、莪达夏加水煎煮两次，第一次加占药物重量12重量倍的水，第二次加占药物重量10重量倍的水，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.05-1.10 (70°C)的清膏，备用；翼首草、石榴子、印度獐芽菜和木瓜，加70%乙醇回流提取二次，第一次加占药物重量10重量倍的70%乙醇，第二次加占药物重量9重量倍的70%，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇至适量，加入上述清膏，浓缩至相对密度为1.10-1.15 (70°C)的清膏，真空或者喷雾干燥，加入药材细粉，混匀，加入常规辅料，制成临床可接受的硬胶囊。
[0103]【质量检测方法】
[0104]A、没食子酸的薄层鉴别
[0105]取上述硬胶囊lg，加甲醇5ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为诃子、毛诃子、余
甘子供试品溶液 。
[0106]另取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含Img的溶液，作为对照品溶液。
[0107]按上述胶囊剂的处方比例及制备工艺，配置不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品，并按上述供试品溶液的配制方法制成不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品溶液。[0108]照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，分别吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(6:4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。薄层色谱图见图1。
[0109]B、藏木香的薄层鉴别
[0110]取上述硬胶囊2g，加乙醚20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加乙醚-乙酸乙酯(1:1)溶液Iml使溶解，作为藏木香供试品溶液。
[0111]另取藏木香对照药材0.2g，加乙醚1ml，密塞，超声处理20分钟，静置，上清液作为藏木香对照药材溶液。
[0112]按上述胶囊剂处方比例及制备工艺，配置不含藏木香的阴性样品，并按上述供试品溶液的配制方法制成不含藏木香的阴性样品溶液。
[0113]照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60°C -90°C )-乙酸乙酯(17:3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化秘钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。薄层检测谱图见图2。
[0114]C、丁香的薄层鉴别
[0115]取上述硬胶囊2g，加乙醚20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加乙醚-乙酸乙酯(1:1)溶液Iml使溶解，作为丁香供试品溶液。
[0116]另取丁香对照药材0.2g，加乙醚3ml，密塞，超声处理20分钟，静置，上清液作为丁香对照药材溶液。
[0117]按上述胶囊剂处方比例及制备工艺，配置不含丁香的阴性样品，并按上述供试品溶液的配制方法制成不含丁香的阴性样品溶液。
[0118]照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60°C -900C)-乙酸乙酯(3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。薄层检测谱图见图3圆圈所示处。
[0119]D、肉豆蘧的薄层鉴别
[0120]取上述硬胶囊2g，加乙醚20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加乙醚-乙酸乙酯(1:1)溶液Iml使溶解，作为肉豆蘧供试品溶液。
[0121]另取肉豆蘧对照药材0.2g，加乙醚5ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚-乙酸乙酯(1:1)溶液Iml使溶解，作为肉豆蘧对照药材溶液。
[0122]按上述胶囊的处方比例及制备工艺，配置不含肉豆蘧的阴性样品，并按上述供试品溶液的配制方法制成不含肉豆蘧的阴性样品溶液。
[0123]照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60°C -90°C )-乙酸乙酯(20:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛浓硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。薄层检测谱图见图4。[0124]E、红花的薄层鉴别
[0125]取上述硬胶囊2g，加乙醚20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮5ml，超声处理20分钟，静置，上清液作为红花供试品溶液。
[0126]另取红花对照药材0.2g，加80%丙酮5ml，超声处理20分钟，静置，上清液作为红花对照药材溶液。
[0127]按上述胶囊剂处方比例及制备工艺，配置不含红花的阴性样品，并按上述供试品溶液的配制方法制成不含红花的阴性样品溶液。
[0128]照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液和阴性样品溶液10 μ 1、对照药材溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇(5:2)为展开剂，展至约3cm，取出，晾干，再以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7:2:3:0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。薄层检测谱图见图5。
[0129]F、诃子、毛诃子、余甘子所含没食子酸含量测定
[0130](I)仪器与试药
[0131]AglientllOO高效液相色谱仪(美国Agilent公司):G1314A紫外可见检测器，G1314A 二元泵，AgilentllOO色谱工作站。
[0132]SK8200HP超声波清洗器(功率250W，频率40kHz)(上海科导超声仪器有限公司)。
[0133]乙腈(色谱纯)；甲醇(分析纯、色谱纯)。
[0134]没食子酸对照品(批号:110831-200803)，购自中国药品生物制品鉴定所。
[0135](2)色谱条件
[0136]十八烷基键合硅胶为填充剂；色谱柱:Z0RBAX Eclipse plusl C18 (4.6X250mm,5.0 μ m，大连依利特公司)；
[0137]流动相:乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液(1:99)为流动相；
[0138]流速:1.0ml / min ；
[0139]检测波长:273nm;
[0140]柱温:30°C。
[0141](3)色谱系统适用性试验
[0142]在以上色谱条件下，没食子酸与其余杂质峰分离效果较好，理论塔板数按没食子酸计算应不低于1000。
[0143](4)对照品溶液与供试品溶液的配制
[0144]对照品溶液的制备:取没食子酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含没食子酸44.72 μ g的溶液，摇匀，即得。
[0145]供试品溶液的制备:取所述胶囊制剂，研细，取约0.lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率100W，频率40kHz) 30min,放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0146]阴性样品溶液的制备:取不含诃子、毛诃子、余甘子药材的阴性样品0.1g,同法制成阴性样品溶液，即得。
[0147](5)阴性干扰试验
[0148]精密吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各10 μ I注入液相色谱仪中，由色谱图可知，在与对照品溶液色谱峰保留时间相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰出现，而阴性样品溶液在此波长无吸收，对本品中没食子酸的含量测定无干扰。见图6所示的色谱图A、B、C。
[0149](6)线性关系的考察
[0150]分别精密吸取对照品溶液(44.72μ g/ml) 2、4、6、8、10μ 1，注入液相色谱仪，测定没食子酸峰面积，没食子酸在0.08944μ g~0.4472 μ g之间内峰面积与对照品的浓度呈良好的线性关系，其回归方程为Y=3007157.871X-1221.2 (r=0.9998)。结果如表1和图7所
/Jn ο
[0151]表1没食子酸的标准曲线
【权利要求】
1.一种用于治疗胃病的藏药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述组合物的原料药组成包括:诃子150-250重量份、毛诃子5-20重量份、余甘子20-80重量份、翼首草20-80重量份、藏木香20-80重量份、石灰华5-20重量份、红花5-20重量份、丁香5_20重量份、?蘧5-20重量份、肉豆蘧5-20重量份、草果5-20重量份、沉香5_20重量份、石槽子5_20重量份、印度獐牙菜1-20重量份、木瓜1-20重量份、安息香1-20重量份、莪达夏1-20重量份； 所述质量检测方法包括如下定性鉴别和/或含量测定的步骤: a)没食子酸的定性鉴别 取所述药物组合物0.5-5重量份，加甲醇1-30体积份，超声处理10-40分钟，滤过，滤液作为诃子、毛诃子、余甘子供试品溶液； 另取没食子酸对照品，加甲醇制成每I体积份含0.0005-0.003重量份没食子酸的溶液，作为对照品溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加甲醇1-30体积份，超声处理10-40分钟，滤过，滤液作为不含诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各1_4μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2-10:1-7:0.1-2.5的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为1%_3%的三氯化铁乙醇溶液，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； b)藏木香的定性鉴别 取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为藏木香供试品溶液； 另取藏木香对照药材0.05-1重量份，加乙醚0.5-2体积份，密塞，超声处理10-40分钟，静置，上清液作为藏木香对照药材溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述藏木香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为不含藏木香的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各1-8μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12-22:0.5-7的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化秘钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； c)丁香的定性鉴别 取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为丁香供试品溶液； 另取丁香对照药材0.05-0.5重量份，加乙醚0.5-5体积份，密塞，超声处理10-40分钟，静置，上清液作为丁香对照药材溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述丁香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为不含丁香的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各1_4μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为0.5-7.3:0.5-2.5的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； d)肉豆蘧的定性鉴别 取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为肉豆蘧供试品溶液； 另取肉豆蘧对照药材0.05-0.5重量份，加乙醚1-10体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为肉豆蘧对照药材溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述肉豆蘧的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液0.5-2体积份使其溶解，作为不含肉豆蘧的阴性样品溶液； 照薄层色谱试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各2-8μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15-25:0.5-2.5的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为3%-8%香草醛浓硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点； e)红花的定性鉴别 取所述药物组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮1-10体积份，超声处理10-40分钟，静置，上清液作为红花供试品溶液； 另取红花对照药材0.05-0.5重量份，加80%丙酮1-10体积份，超声处理10-40分钟，静置，上清液作为红花对照药材溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-5重量份，加乙醚10-50体积份，密塞，超声处理10-40分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮1-10体积份，超声处理10-40分钟，静置，上清液作为不含红花的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和阴性样品溶液5-15 μ 1、对照药材溶液2-8 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2-8:0.5-4的乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展至约3cm,取出，晾干,再以体积比为3-12:0.1-5:0.1-5:0.1-1的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点； f)诃子、毛诃子、余甘子中没食子酸的含量测定 取所述药物组合物0.05-2重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25-75体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理10-45min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为供试品溶液； 取没食子酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每I体积份含没食子酸0.00001-0.0001重量份的溶液，作为对照品溶液； 按 所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物0.05-2重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25-75体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理10-45min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品溶液； 照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比0.1-5:95-99.9的乙腈-0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液为流动相；在273±2nm检测波长、柱温为25-40°C下测定；理论塔板数按没食子酸峰计算不低于1000 ;并分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各5-20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含诃子、毛诃子、余甘子以没食子酸计，不得少于0.017重量份；g)红花所含羟基红花黄色素A的含量测定 取所述药物组合物0.5-3重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇20-80体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理20-60分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液； 取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每I体积份含羟基红花黄色素A0.000005-0.00005重量份的溶液，作为对照品溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物0.5-3重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇20-80体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理20-60分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为不含红花的阴性样品溶液； 照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比15-30:0.5-5:65-85的甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相；在403±211111检测波长、柱温为25_40°C下测定；理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ;分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各5-20μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含红花以羟基红花黄色素A计，不得少于0.00025重量份； 所述重量份与体积份的关系为g/ml。
2.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，包括如下定性鉴别和/或含量测定的步骤: a)没食子酸的定性鉴别 取所述药物组合物I重量份，加甲醇5体积份，超声处理20分钟，滤过，滤液作为诃子、毛诃子、余甘子供试品溶液； 另取没食子酸对照品，加甲醇制成每I体积份含0.001重量份没食子酸的溶液，作为对照品溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物I重量份，加甲醇5体积份，超声处理20分钟，滤过，滤液作为不含诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6:4:1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为2%的三氯化铁乙醇溶液，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； b)藏木香的定性鉴别 取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为藏木香供试品溶液；另取藏木香对照药材0.2重量份，加乙醚I体积份，密塞，超声处理20分钟，静置，上清液作为藏木香对照药材溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述藏木香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为不含藏木香的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为17:3的60°C _90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化秘钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； c)丁香的定性鉴别 取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为丁香供试品溶液； 另取丁香对照药材0.2重量份，加乙醚3体积份，密塞，超声处理20分钟，静置，上清液作为丁香对照药材溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述丁香的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为I:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为不含丁香的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3:1的60°C -90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； d)肉豆蘧的定性鉴别 取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为肉豆蘧供试品溶液；另取肉豆蘧对照药材0.2重量份，加乙醚5体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为肉豆蘧对照药材溶液；按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述肉豆蘧的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加体积比为1:1的乙醚-乙酸乙酯溶液I体积份使其溶解，作为不含肉豆蘧的阴性样品溶液； 照薄层色谱试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20:1的60°C-90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以重量体积比为5%香草醛浓硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点； e)红花的定性鉴别 取所述药物组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮5体积份，超声处理20分钟，静置，上清液作为红花供试品溶液； 另取红花对照药材0.2重量份，加80%丙酮5体积份，超声处理20分钟，静置，上清液作为红花对照药材溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物2重量份，加乙醚20体积份，密塞，超声处理20分钟，滤过，残渣挥干后加80%丙酮5体积份，超声处理20分钟，静置，上清液作为不含红花的阴性样品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和阴性样品溶液10 μ 1、对照药材溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:2的乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展至约3cm，取出，晾干，再以体积比为7:2:3:0.4的乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视；供试品色谱中，在与供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点； f)诃子、毛诃子、余甘子中没食子酸的含量测定 取所述药物组合物0.1重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇50体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为供试品溶液； 取没食子酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每I体积份含没食子酸0.00004重量份的溶液，作为对照品溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述诃子、毛诃子和余甘子的阴性样品组合物，并取所述阴性样品组合物0.1重量份，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇50体积份，称定重量，于功率100W、频率40kHz条件下超声处理30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为不含诃子、毛诃子、余甘子的阴性样品溶液； 照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比1:99的乙腈-0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液为流动相；在273nm检测波长、柱温为30°C下测定；理论塔板数按没食子酸峰计算不低于1000 ;并分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含诃子、毛诃子、余甘子以没食子酸计，不得少于0.017重量份； g)红花所含羟基红花黄色素A的含量测定 取所述药物组合物1.5重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液； 取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每I体积份含羟基红花黄色素A0.00002重量份的溶液,作为对照品溶液； 按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述红花的阴性样品组合物，取所述阴性样品组合物1.5重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50体积份，称定重量，于功率250W，频率40kHz条件下超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为不含红花的阴性样品溶液； 照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比22:2:76的甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相；在40311111检测波长、柱温为30°C下测定；理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ;分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，制剂每I重量份含红花以羟基红花黄色素A计，不得少于0.00025重量份。
3.根据权利要求1或2所述的质量检测方法，其特征在于，所述组合物的原料药组成为: 诃子180-220重量份、毛诃子8_15重量份、余甘子30-70重量份、翼首草30-70重量份、藏木香30-70重量份、石灰华8-15重量份、红花8-15重量份、丁香8_15重量份、豆蘧8-15重量份、肉豆蘧8-15重量份、草果8-15重量份、沉香8-15重量份、石槽子8_15重量份、印度猜牙菜5-15重量份、木瓜5-15重量份、安息香5-15重量份、莪达夏5_15重量份。
4.根据权利要求3所述的质量检测方法，其特征在于，所述组合物的原料药组成为: 诃子201.7重量份 、毛诃子12.6重量份、余甘子50.4重量份、翼首草50.4重量份、藏木香50.4重量份、石灰华11.8重量份、红花11.8重量份、丁香11.8重量份、豆蘧11.8重量份、肉豆蘧11.8重量份、草果11.8重量份、沉香11.8重量份、石榴子11.8重量份、印度獐牙菜10.1重量份、木瓜10.1重量份、安息香10.1重量份、莪达夏10.1重量份。
5.根据权利要求1-4任一所述的质量检测方法，其特征在于，所述组合物制成临床或药学上可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、缓释剂或口服液体制剂。
6.根据权利要求1-4任一所述的质量检测方法，其特征在于，所述药物组合物由如下方法制备得到: 上述十七味药材，其中，藏木香、丁香、豆蘧、肉豆蘧、草果、沉香、安息香、红花和石灰华粉碎至0.01-200微米的粉末，过筛；诃子、毛诃子、余甘子、莪达夏加水煎煮两次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏，备用；翼首草、石榴子、印度樟芽菜和木瓜，加乙醇回流提取二次，合并滤液，滤液回收乙醇至适量，加入上述清膏，浓缩成浸膏，干燥，加入药材细粉，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料制成临床上接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、缓释剂或口服液体制剂。
7.根据权利要求1-4任一所述的质量检测方法，其特征在于，所述药物组合物由如下方法制备得到: 按照选定的重量份取藏木香、石灰华、红花、丁香、豆蘧、肉豆蘧、草果、沉香、安息香粉碎至0.01-200微米的粉末；另取选定重量份的诃子、毛诃子、余甘子和莪达夏加入占药物重量5-20重量倍的水，提取1-5次，得水提液；取剩余原料翼首草、石榴子、印度獐牙菜和木瓜加入占药物重量5-20重量倍的浓度大于20%的乙醇，提取1-5次，得醇提液；分别将所述水提液、醇提液浓缩至相对密度为0.5-1.35的浸膏，干燥后与前述粉碎的粉末混合，加入常规辅料按照常规工艺制成临床可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、缓释剂或口服液体制剂。
【文档编号】G01N30/02GK103983702SQ201310630096
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2013年11月29日 优先权日:2013年11月29日
【发明者】张国霞, 姬良亮, 王维波, 魏学明 申请人:甘肃奇正藏药有限公司