专利名称：藏药组合物及其在防治酒精性肝病产品制备中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物，特别是涉及一种藏药组合物，及其在防治酒精性肝病广品制备中的应用。
背景技术：
酒精性肝病是由酒精及其代谢产物对肝细胞的破坏与毒性作用所引的，以肝脏代谢紊乱为基础的急、慢性肝损伤，是我国常见的肝脏疾病之一，初期通常表现为脂肪肝，进而可发展成酒精性肝炎、肝纤维化和肝硬化。严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死，甚至肝功能衰竭。已知乙醇进入肝细胞以后，经过肝乙醇脱氢酶、过氧化氢分解酶和肝微粒体乙醇氧化酶系三条途径氧化为乙醛。乙醛对肝细胞有明显的毒性作用，使其代谢发生障碍，从而导致肝细胞的变性坏死及纤维化，严重时可致肝硬化。目前对于酒精性肝病的治疗原则是戒酒和营养支持，减轻酒精性肝病的严重程度，改善已存在的继发性营养不良和对症治疗酒精性肝硬化及其并发症。对于戒酒治疗，由于存在一定的戒断综合征，以及我国独有的酒文化现状，需要极强的自制力；药物治疗，主要包括激素类药等，均有不同程度的副作用。青藏地区的海拔高、空气干燥稀薄等不良气候环境条件一直加重当地居民的身体机能运转及调节的负担，而藏族民众素有饮酒传统，普遍爱饮酒，这更增加了对身体机能的考验。藏医学产生在我国青藏高原地区，在针对性缓解与防治由于长期性不利因素对居民生理机能造成负担与疾病方面积累了大量经验。藏医药理论在解酒、保肝护肝方面具有悠久的应用历史，使得藏药治疗酒精性肝病，特别是预防酒精性肝病方面有独特的疗效，其解酒、保肝作用肯定，且长期服用安全
发明内容
本发明的目的是提供一种藏药组合物，该药物组合物能够应用于防治酒精性肝病广品的制备。为实现上述目的，本发明的技术方案如下藏药组合物，其特征在于包括以重量计的诃子25 75份、红景天15 45份、红花20 60份、蒲公英20 60份、灵芝10 30份。上述藏药组合物中诃子，是使君子科植物诃子(Terminalia chebula Retz.)或绒毛诃子(Terminalia chebula Retz. var. tomentella Kurt.)的干燥成熟果实。其性味苦、酸、潘、平；归肺、大肠经。传统医学记载的功能与主治在于涩肠敛肺，降火利咽。用于久泻久痢，便血脱肛，肺虚喘咳，久嗽不止，咽痛音哑。现代化学成分研究显示诃子的果实主要含鞣质类成分，主要功能在于收敛与止泻，临床主要用于治疗大叶性肺炎、细菌性痢疼、白喉带菌者等症。红景天，藏语名扫罗玛尔布，记载于《藏药部颁标准》WS3-BC-0041-95。红景天是景天科植物大花红景天的根茎。红景天是藏族民众常用的药食两用植物，主要生长于西藏高原海拔4500m以上的严寒、缺氧、强日照、无污染地带。传统医药认为红景天入肺经，现代医学认为其具有强心、舒张心脑血管、补氧作用，有助于纯化血液，清除血液中废物，提高免疫力和抗疲劳能力，同时也能激活体内细胞，提高脑组织对疲劳引起缺氧的耐受力，强化心肌对缺氧的抵抗力，调节血压，使机体内部达到平衡。多用于活血，清肺，止咳解热止痛。用于腊度(高山反应)，恶心，呕吐，嘴唇和手心等发紫，全身无力，胸闷，难于透气，身体虚弱等症。红花,又名草红花,是菊科植物红花(Carthamus tinctorius L.)的干燥花。传统医药认为其入心、肝经，性味辛、温。具有活血痛经，散瘀止痛功能。现代医学分析结果显示红花黄色素(safflor yellow, SY)是红花主要水溶性成分,是红花的主要活性成分,有抗心肌缺血、抑制血小板聚集、抗脑缺血、保护神经细胞、抗氧化、抑制血管平滑肌细胞的增殖等作用。蒲公英,是菊科植物蒲公英(Taraxacum mongoIicum Hand.-Mazz.)、碱地蒲公英(Taraxa cum sinicum Kitag.)或同属数种植物的干燥全草。是传统清热解表用药，主要功效在于清热解毒、消肿散结、利尿通淋，主治疔疮肿毒、乳痈、瘰疠、目赤、咽痛、肺痈、肠痈、湿热黄疸、热淋涩痛。灵芝，是多孔菌科真菌灵芝(GanodermaIucidum(Leyss. ex Fr. ) Karst.)的子实体。作为传统滋补强壮、补气安神用药，灵芝多用于健脑、消炎、利尿、益肾、眩晕不眠，心悸气短，虚劳咳喘等症。传统医学认为，酒精性肝病当属于中医病名的“胁痛”、“症积”、“头晕”。主要是因酒食酿成湿热滞留体内，阻滞肝胆气机，影响脾胃运化；另一方面酒毒邪伤正，耗损肝肾阴血精气，其病机包括湿热瘀毒阻滞，肝肾阴虚，精血不足。治则当清热利湿，活血化瘀，补益肝肾。本发明藏药组合物由诃子、红景天、红花、蒲公英与灵芝组成，具有清热化湿、活血祛瘀、补肝益肾等功效。其中诃子是清凉解毒用药，是药物组合中的针对主病或主证起主要治疗作用的药物组分。红景天发挥补肾、益气活血功效，红花起活血化瘀、行气止痛的功效，灵芝发挥滋补肝肾的功效，红景天、红花、灵芝是辅助诃子加强治疗主证或主病的药物组分，同时也针对兼证或兼病起治疗作用`。蒲公英性味甘、苦、寒，归肝、胃经，具有清热解毒，消肿散结等功效，其化热毒、解食毒可增加诃子作用，同时消肿散结以去除“症积”。本发明藏药组合物基于现代医学对酒精性肝病的治疗均是从停酒及增强营养两方面着手的基本原理，各组分是首次作为组合物应用于酒精性肝病药物的制备，不同组分从去除病灶、保肝护肝、滋补强壮多方面发挥功效以达到防治酒精性肝病的目的。动物试验显示，本发明藏药组合物能够降低病变肝组织中MDA含量，提高还原性谷胱甘肽(GSH)含量，降低甘油三酯(TG)的含量，通过抑制脂质过氧化反应对肝脏产生保护作用，减轻乙醇对肝脏组织的损伤。临床用药的治疗结果显示，本发明藏药组合物的胶囊剂对以消化不良、腹部不适、黄疸、乏力等为主要症状的酒精性肝病患者的临床用药结果显示，患者血清生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、Y-谷氨酰转肽酶(GGT)均得以改善，治疗效果总有效率为87. 3%，且未见明显的不良反应。本发明还同时提供上述藏药组合物的制备方法，具体方案如下上述藏药组合物的制备方法，其特征在于将各组分原药按照传统藏药材加工方法制成药粉，再依需要将药粉按比例配置，加水煎煮浸提制得浸提液，浸提液依照常规传统成药加工方法制不同的剂型，必要时加入药剂学上可接受的辅料制。具体藏药组合物的剂型可以是口服给药如汤剂、胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒齐U、膏剂、药酒、糖浆、酥油脂药等。以本发明藏药组合物或其提取物为效用成分，可以应用于制备防治酒精性肝病产品。产品是本发明藏药组合物或其提取液直接作为防治酒精性肝病产品，或者是以本藏药组合物或其提取液为效用成分的防治酒精性肝病产品。具体产品例如防治酒精性肝病药物，或者是防治酒精性肝病保健品。与现有技术相比，本发明的有益效果是(1)本藏药组合物采用藏医药中传统常见、常用的药材依照传统藏药炮制方法制备而成，无论是药材原药还是制备方法都安全可靠；(2)藏药组合物应用于防治酒精性肝病产品疗效显著、疗程短、长期服用无毒副作用；(3 )本藏药组合物原药组分种类少，生产成本经济、制备方法简单。
具体实施例方式下面结合具体实施方式
，对本发明的技术内容作进一步描述。试验例一
藏药组合物安全毒理学试验。本发明藏药组合物提取物作为试验样品，分别进行急性经口毒性试验、遗传毒性试验、大鼠30d喂养试验。1、本发明藏药组合物的提取物制备藏药组合物原药组分及其重量配比为以重量计的诃子25 75份、红景天15 45份、红花20 60份、蒲公英20 60份、灵芝10 30份，加入原药总重量10倍量水，浸泡lh，98°C 10(TC煎煮2h，滤过，收集滤液，药渣加入原料总重量8倍量水，98°C 100°C煎煮lh，滤过，合并两次滤液，减压干燥，粉碎，得提取物。2、安全毒理学试验2.1急性经口毒性试验采用SPF级SD大鼠，体重180g 220g，雌雄各半。根据预试结果，试验设置15g/kg · bw 一个剂量组。准确称取本发明藏药组合物的提取物30g,加蒸懼水至80ml,按2ml/100g · bw于动物空腹状态下分2次经口灌胃给药，间隔6h，灌胃后观察2周内死亡动物数及一般健康情况，根据最大耐受量判断提取物的急性毒性。试验结果，在观察期内动物未见皮毛、行为特征、精神状态等异常情况发生，无动物死亡，观察期结束后大体解剖，未见主要脏器组织颜色、质地、大小等异常改变。结论SD大鼠急性经口 MTD大于15g/kg · bw,判属无毒类。2. 2遗传毒性试验2. 2.1Ames 试验采用经鉴定符合要求的TA97、TA98、TA100和TA102菌株，进行加与不加大鼠肝S9的标准平板掺入法试验(S9mix用量为O. 5ml/板)。设本发明藏药组合物的提取物五个剂量8μ g/板、40 μ g/板、200 μ g/板、1000 μ g/板、5000 μ g/板(准确称取本发明藏药组合物的提取物1. Og于玻璃瓶中，加蒸馏水20ml，充分混匀后即为最高工作浓度50mg/ml，其余浓度用蒸馏水5倍往下稀释获得，配置的最高工作浓度100 μ I加入平板即为最高终浓度5000 μ g/板，其余浓度加样量均为100 μ I。所有配制后的溶液采用8磅15min高压方式进行灭菌)，同时设自发对照、溶剂对照(灭菌蒸馏水100 μ I/板)和阳性对照。不加S9试验的阳性对照为O. 2 μ g/板的2，4，7-三硝基-9-芴酮(TA97、TA98)，1. 5 μ g/板的叠氮化钠(ΤΑ100)，0. 5μ g/板的丝裂霉素C (TA102);加S9试验的阳性对照为10 μ g/板的2-氨基芴(TA97、TA98、TA100)和50μ g/板的1，8-二羟基蒽醌(TA102)。每个试验剂量作三个平
行板，重复试验一次。结果无论加与不加S9的试验，自发对照组的每板平均回变菌落数均在正常值范围内，而阳性对照组诱发的每板平均回变菌落数均为自发对照组二倍以上，呈明显阳性反应。本发明藏药组合物的提取物各剂量组的平均回变菌落数均未超过自发对照组的一倍，呈阴性反应，即本发明藏药组合物的提取物无诱导试验菌株回复突变的作用。2. 2. 2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验昆明种小鼠(体重25g 30g)随机分为5组，每组10只，雌雄各半，设2. 5,5. O和10. Og/kg. bw本发明藏药组合物的提取物试验组，另设阴性对照组(蒸馏水)、阳性对照(环磷酰胺40mg/kg. bw)组。动物分别于第Oh和第24h按O. 2ml/10g *bw经口灌胃，末次染毒后6h处死动物，按程序制片。每只动物计数1000个嗜多染红细胞(PCE)，观察含有微核的嗜多染红细胞数，计算微核率(％。)，同时观察200个红细胞中PCE和正染红细胞(NCE)所占数目，并计算PCE/NCE比值。结果阳性对照组雌、雄动物的微核率均显著高于对照组(P〈0. 05)，本发明藏药组合物的提取物各组的微核率与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0. 05)，提示，本发明藏药组合物的提取物在小鼠骨髓细胞微核试验中为阴性结果。2. 2. 3小鼠精子畸形试验昆明种雄性小鼠(体重25g 35g)随机分为5组，每组5只。试验分组设计同2. 2. 2，每日经口灌胃给药 一次，连续5d。与首次灌胃后第35d处死动物，取双侧附睾，按规定制片，每只动物观察1000个完整精子，记录各类畸形精子数。结果阳性对照组精子畸形率均显著高于对照组(P〈0. 05)，本发明藏药组合物的提取物各组的精子畸形率与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0. 05)，提示，本发明藏药组合物的提取物在小鼠精子畸形试验中为阴性结果。Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验等三项遗传毒性试验结果均为阴性，表明本发明藏药组合物的提取物无致突变作用。2. 3大鼠30天喂养试验SPF级SD大鼠，80只，体重80g 100g，适应性饲养I周后，按体重随机分为4组，分别为正常对照组、本发明藏药组合物提取物的低、中、高剂量组，每组20只，雌雄各半。正常对照组经口灌胃给予蒸馏水，低、中、高剂量组分别经口灌胃给予提取物O. 9g/kg · bw,2. lg/kg · bw和3. Og/kg · bw (分别相当于人体推荐摄入量的30倍、70倍、100倍),给药体积均为10ml/kg · bw，连续给药30d，其中每周称体重一次，调整给药量。给药结束后24h，处死动物，进行血液学、血液生化学及组织病理学检查和脏器系数测定。试验结果，在给药期内，各组大鼠外观体征、行为活动及精神状态均未见异常，其体重增重和摄食量正常，无动物死亡；其血液学、血液生化学和组织病理学和脏器系数等各项重要指标亦无异常变化。结论本发明藏药组合物的提取物最大无毒剂量大于3. Og/kg -bw (相当于人体推荐摄入量的100倍)。
试验例二藏药组合物对酒精性肝病模型大鼠的影响，本发明藏药组合物提取物同试验例
一原理机体大量摄入乙醇后，在乙醇脱氢酶的催化下大量脱氢氧化，使三羧酸循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，致使脂肪在肝细胞内沉积；同时，乙醇能激活氧分子，产生氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化及体内还原性谷胱甘肽的耗竭。实验动物KM种小鼠鼠，SPF级，雄性，体重18g 22g，50只，由成都达硕生物科技有限公司提供，合格证号SCXK (川)2008-24。饲养环境屏障系统(实验动物使用许可证号=SYXK (川)2008-011)，温度 20。。 26°C，湿度 40% 70%。试验方法50只雄性KM种小鼠，禁食不禁水12h后，称量体重，按体重随机分为5组，分别为正常对照组、模型组、本发明藏药组合物提取物低、中、高剂量组，每组10只。正常对照组及模型组给药蒸馏水经口灌胃给药，提取物低、中、高剂量组分别按O. 15g/kg · bw、0. 3g/kg · bw、0. 6g/kg · bw (相对于人体推荐用量的5倍、10倍、20倍)经口灌胃给药，给药体积lml/lOOg · bw·，每日一次，连续30d，其中每周四和周日各称体重一次，调整给药量。末次给药后2h，除正常对照组外，其余各组一次灌胃给予50%乙醇12ml/kg. bw,禁食16h后处死大鼠，取肝组织，进行肝组织中丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)及甘油三酯(TG)的含量，并对肝组织进行病理组织学检查。其中MDA、GSH、TG测定方法参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)进行。试验结果以SPSS13. O统计软件进行处理，采用方差分析及非参数统计方法。试验结果对小鼠肝匀浆中MDA、还原型GSH、TC的影响与正常对照组比较，模型组肝匀浆中MDA、TG升高，还原型GSH降低，并有显著性统计学差异(P〈0. 01),说明本次试验模型成功；与模型对照组比较，高剂量组肝匀浆中MDA明显降低，高、中剂量组肝匀浆中还原型GSH明显升高，TG明显下降，上述指标均有统计学差异(P〈0. 01)。结果见表I。表I对小鼠肝匀浆中MDA、还原型GSH和TG的影响
权利要求
1.一种藏药组合物，其特征在于包括以重量计的诃子25 75份、红景天15 45份、 红花20 60份、蒲公英20 60份、灵芝10 30份。
2.根据权利要求1所述的藏药组合物，其特征在于所述诃子40 60份、红景天20 40份、红花30 50份、蒲公英30 50份、灵芝15 25份。
3.根据权利要求1所述的藏药组合物，其特征在于所述诃子50份、红景天30份、红花40份、蒲公英40份、灵芝20份。
4.根据权利要求1或2或3所述的藏药组合物在制备防治酒精性肝病产品中的应用。
5.根据权利要求1或2或3所述的藏药组合物的制备方法，其特征在于将各组分原药按照传统藏药材加工方法制成药粉，再依需要将药粉按比例配置，加水煎煮浸提制得浸提液，浸提液依照常规传统成药加工方法制不同的剂型，必要时加入药剂学上可接受的辅料制。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于依照如下制备方法之一实施丸剂制备依比例净制后各组分药材原料按照传统藏药材加工方法加工成细粉，过筛， 混匀，用水泛丸，干燥制得丸剂；汤剂制备依比例净制后各组分药材原料加工成粗粉，加入药粉总重量10倍量水，浸泡lh，98°C 10(TC煎煮2h，滤过，收集滤液，药渣加入药粉总重量8倍量水，98°C 100°C 煎煮lh，滤过，合并两次滤液得浸提液，浸提液即为汤剂；胶囊剂制备依比例净制后各组分药材原料加工成粗粉，加入药粉总重量10倍量水， 浸泡lh，98°C 100°C煎煮2h，滤过，收集滤液，药渣加入药粉总重量8倍量水，98°C 100°C煎煮lh，滤过，合并两次滤液得浸提液，浸提液减压浓缩至55°C 60°C热测值为1.20g/ml 1. 30g/ml,加入适量淀粉,干燥,制粒、整粒,填充制得胶囊剂；口服液剂制备依比例净制后各组分药材原料加工成粗粉，加入药粉总重量10倍量水，浸泡lh，98°C 10(TC煎煮2h，滤过，收集滤液，药渣加入药粉总重量8倍量水，98°C 100°C煎煮lh，滤过，合并两次滤液得浸提液，浸提液浓缩至浓缩液体积原药总重量= 10:1得浓缩液，浓缩液加入工艺量沉淀剂，过滤，滤液加入工艺量调味剂与防腐剂，滤过，灌装、灭菌制得口服液剂；口服普通片剂制备依比例净制后各组分药材原料加工成粗粉，加入药粉总重量10倍量水，浸泡Ih，98°C 100°C煎煮2h，滤过，收集滤液，药渣加入药粉总重量8倍量水，98°C 100°C煎煮lh，滤过，合并两次滤液得浸提液，浸提液喷雾干燥，加入工艺量淀粉，湿法制粒， 干燥、整粒，再加入工艺量的硬脂酸镁，混合，压片，包衣，制得口服普通片剂；咀嚼片剂制备依比例净制后各组分药材原料加工成粗粉，加入药粉总重量10倍量水，浸泡lh，98°C 10(TC煎煮2h，滤过，收集滤液，药渣加入药粉总重量8倍量水，98°C 100°C煎煮lh，滤过，合并两次滤液得浸提液，浸提液喷雾干燥，加入工艺量木糖醇、乳糖、糊精、阿斯巴甜、硬脂酸镁，湿法制粒，干燥、整粒，压片，包衣制得咀嚼片剂。
7.以权利要求1或2或3所述的藏药组合物或其提取液为有效成分的防治酒精性肝病口广BH ο
8.根据权利要求7所述的产品，其特征在于所述酒精性肝病是以肝脾肿大或/与肝区叩痛或/与食欲不振或/与胸胁胀痛或/与乏力或/与黄疸为表现症状与体征的酒精性肝病。
9.根据权利要求7所述的产品，其特征在于是药品或保健品。
10.根据权利要求7所述的产品，其特征在于是口服剂型。
全文摘要
本发明公开了一种藏药组合物。针对现有技术中防治酒精性肝病产品大多有较明显副作用的缺陷，本发明公开了一种藏药组合物及其在防治酒精性肝病产品制备中的应用。本藏药组合物包括以重量计的诃子25～75份、红景天15～45份、红花20～60份、蒲公英20～60份、灵芝10～30份。本藏药组合物各组分首次作为组合物应用于酒精性肝病药物的制备，不同组分从去除病灶、保肝护肝、滋补强壮多方面发挥功效以达到防治酒精性肝病的目的。以本发明藏药组合物为效用成分，可以应用于制备防治酒精性肝病产品，包括防治酒精性肝病药物，或者是防治酒精性肝病保健品。本发明本藏药组合物原药组分种类少，生产成本经济、制备方法简单无论是药材原药还是制备方法都安全可靠。
文档编号A61K9/48GK103040909SQ201310029920
公开日2013年4月17日 申请日期2013年1月25日 优先权日2013年1月25日
发明者多吉, 耿向东, 扎西东智, 邓国兵 申请人:西藏福田藏医药研究开发有限公司