银柴颗粒的检测方法
【专利摘要】本发明涉及一种银柴颗粒的检测方法，包括性状、鉴别、检查项目，其中，鉴别包括薄荷脑的薄层鉴别、忍冬藤的薄层鉴别、柴胡的薄层鉴别、大叶柴胡的薄层鉴别，针对目前还没有一套完善的检测方法对其有效成份进行相应的检测，导致无法监测不法厂商少投或不投相应原料和监测伪品大叶柴胡的混入，本发明制定了科学合理、切实可行的成分鉴别方法，保证了银柴颗粒的临床疗效，让几种药材有了明确的质量指标，确保了银柴颗粒中忍冬藤、薄荷、柴胡的使用，从而保证了药品的疗效；另一方面，柴胡的伪品大叶柴胡也能有效的检测，避免了大叶柴胡中含有的柴胡毒素和乙酰柴胡毒素这两种有毒成份危害患者的健康。
【专利说明】银柴颗粒的检测方法
【技术领域】:
[0001]本发明涉及一种银柴颗粒的检测方法。
【背景技术】:
[0002]银柴颗粒是《卫生部药品标准》中药成方制剂第十三册收载的品种，标准编号为WS3-B-2612-97，处方为忍冬藤、芦根、薄荷、柴胡、枇杷叶，是纯中药的颗粒剂，它具有清热、解表、止咳的作用，临床上用于治疗风热感冒、发热咳嗽等疾病，是目前市场上用于治疗风热感冒、发热咳嗽等疾病的常用药品。但是到目前为止，还没有一套完善的检测方法对其有效成份进行相应的检测，那么可能导致不法厂商在生产药品时不严格按照处方的剂量配料，肆意减少价格高的原料，致使药品的疗效明显下降，影响药品的安全有效，严重损害患者的利益。另一方面，本药品的处方来源于《伤寒杂病论》中的名方银柴芦根汤，处方中柴胡用量较大，占整个处方量的三四之一，其功效主要是和解少阳，扶正祛邪。由于近年来柴胡的使用量较大，但其产量有限，其伪品大叶柴胡也被有意或者无意混入使用，大叶柴胡中含有柴胡毒素和乙酰柴胡毒素，这两种成份都是有毒物质，已经多次发生因服用混有大叶柴胡的药品而中毒的药害事件，所以控制大叶柴胡很有必要。《山东医药工业》于2003年第二十二卷第5期发表了《对中国药典2000年版柴胡检验方法的补充》一文，探讨过药典上大叶柴胡药材的鉴别控制问题，但是其方法有明显的不足，文中披露放置24小时，其检测时间太长，不利于药品生产过程控制和药品质量监督检查；柴胡毒素和乙酰柴胡毒素含量相对较低，点样仅2 μ 1，点样量过少，影响检验的准确性；柴胡毒素和乙酰柴胡毒素含量相对较低，在紫外灯下检视，不用显色剂显色来观察，观察效果不好，更主要的是银柴颗粒处方药味多、所含成份复杂，其它成份会产生混淆和干扰，所以，寻找一种更好的办法来控制大叶柴胡的混入已是当务之急。
【发明内容】
:
[0003]本发明的目的，是提供一种银柴颗粒的检测方法，可有效地监测不法厂商少投或不投相应原料，同时监测伪品大叶柴胡的混入，防止服用后中毒的药害事件的发生，使该药品安全有效，并保证了银柴颗粒的临床疗效。
[0004]本发明的技术方案是这样的:
[0005]本银柴颗粒的处方是:忍冬藤300g、芦根300g、薄荷100g、柴胡300g、枇杷叶200go
[0006]本银柴颗粒的检测方法，包括性状、鉴别、检查项目；其中，鉴别包括对薄荷药材中的薄荷脑的鉴别、忍冬藤的鉴别、柴胡的鉴别、大叶柴胡中柴胡毒素和乙酰柴胡毒素的鉴别。
[0007]薄荷药材的薄荷脑的鉴别:以薄荷脑为对照品，以苯一醋酸乙酯为展开剂，用薄层色谱法鉴别；
[0008]忍冬藤的鉴别:以忍冬藤对照药材为对照，以乙酸丁酯-甲酸-水为展开剂，用薄层色谱法鉴别；
[0009]柴胡的鉴别:以柴胡对照药材为对照，以乙酸乙酯-乙醇-水为展开剂，用薄层色谱法鉴别；
[0010]柴胡毒素和乙酰柴胡毒素的鉴别:以柴胡毒素、乙酰柴胡毒素为对照品，以正已烷-乙酸乙酯为展开剂，用薄层色谱法鉴别；
[0011]检测方法如下:
[0012](I)薄荷脑的鉴别
[0013]取本品12g，加60?90°C石油醚30ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取薄荷脑对照品，加60?90°C石油醚制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10?20 μ 1、对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:醋酸乙酯=17?21:0.8?1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5?10分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0014](2)忍冬藤的鉴别
[0015]取本品3g，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取忍冬藤对照药材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5?10 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=8?12:4?6:3.5?4.5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0016](3)柴胡的鉴别
[0017]取本品6g，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加入聚酰胺柱a，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各IOOml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取柴胡对照药材lg，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加入聚酰胺柱b，分别用水IOOml和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2?IOul和对照药材溶液2ul,分别点于同一娃胶G薄层板上，以乙酸乙酯:乙醇冰=10?14:1.8?2.2:0.9?1.1为展开剂,展开,取出，晾干,喷以5%对二甲氨基苯甲醒的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0018](4)大叶柴胡的鉴别:
[0019]取本品10g，加60?90°C石油醚30ml，浸泡10分钟，超声处理15分钟，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液，另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品，加甲醇制成每Iml含柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品各Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷:乙酸乙酯=7?9:0.8?
1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
[0020]更具体的检测方法如下:[0021](I)薄荷脑的鉴别
[0022]取本品12g，加60?90°C石油醚30ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取薄荷脑对照品，加60?90°C石油醚制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10?20 μ 1、对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:醋酸乙酯=19:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5?10分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0023](2)忍冬藤的鉴别
[0024]取本品3g，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取忍冬藤对照药材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5?10 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=10:5:4的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0025](3)柴胡的鉴别
[0026]取本品6g，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加入聚酰胺柱a，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各IOOml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取柴胡对照药材lg，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加入聚酰胺柱b，分别用水IOOml和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2?IOul和对照药材溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0027](4)大叶柴胡的鉴别:
[0028]取本品10g，加60?90°C石油醚30ml，浸泡10分钟，超声处理15分钟，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液，另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品，加甲醇制成每Iml含柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品各Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷:乙酸乙酯=8:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
[0029]所述聚酰胺柱a为聚酰胺过100?200目筛，称取过筛后的聚酰胺Sg，选择内径为2.5?3cm的层析柱,湿法装柱。
[0030]所述聚酰胺柱b为聚酰胺过100?200目，称取过筛后的聚酰胺4g，选择内径为2cm的层析柱,湿法装柱。
[0031]性状:本品为掠揭色的颗粒；气香，味微甜、略苦。
[0032]检查:应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2010年版一部附录I C)。
[0033]本发明所述的展开剂之比以体积比计。
[0034]本发明的技术效果:[0035]本发明通过对银柴颗粒中薄荷脑的鉴别、忍冬藤的鉴别、柴胡的鉴别、大叶柴胡的鉴别，让几种药材有了明确的质量指标，确保了银柴颗粒中忍冬藤、薄荷、柴胡的使用，从而保证了药品的疗效；另一方面，柴胡的伪品大叶柴胡也能有效的检测，避免了大叶柴胡中含有的柴胡毒素和乙酰柴胡毒素这两种有毒成份危害患者的健康。本发明能更好更全面地监测银柴颗粒的质量，而且能有效地控制不法厂商生产伪劣银柴颗粒，从而保证了药品的疗效和安全，保证了患者的利益，本发明科学合理、切实可行。
【具体实施方式】:
[0036]实施例1:
[0037]【处方】忍冬藤300g芦根300g薄荷100g柴胡300g枇杷叶200g [0038]【制法】以上五味，薄荷提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器保存，药渣与其余忍冬藤等四味加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液与蒸馏后的水溶液合并，在50~55°C温度下，浓缩成相对密度为1.33~1.36的清膏，加入适量的蔗糖粉和糊精，用乙醇制颗粒，干燥，加入薄荷油，混匀，制成650g，即得。
[0039]【性状】本品为棕褐色的颗粒；气香，味微甜、略苦。
[0040]【鉴别】⑴薄荷脑的鉴别
[0041]取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取薄荷脑对照品，加60~90°C石油醚制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10~20 μ 1、对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:醋酸乙酯=17:0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0042](2)忍冬藤的鉴别
[0043]取本品3g，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取忍冬藤对照药材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5~10 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=8:4:3.5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0044](3)柴胡的鉴别
[0045]取本品6g，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加入聚酰胺柱a(聚酰胺过100~200目筛，称取过筛后的聚酰胺Sg，选择内径为2.5~3cm的层析柱，湿法装柱)，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取柴胡对照药材lg，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加入聚酰胺柱b (聚酰胺过100~200目，称取过筛后的聚酰胺4g，选择内径为2cm的层析柱，湿法装柱)，分别用水100mL和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2~IOul和对照药材溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=10:1.8:0.9为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0046](4)大叶柴胡的鉴别:
[0047]取本品10g，加60~90°C石油醚30ml，浸泡10分钟，超声处理15分钟，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液，另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品，加甲醇制成每1ml含柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品各Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷:乙酸乙酯=7:0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
[0048]【检查】应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2010年版一部附录IC)。
[0049]实施例2:
[0050]【处方】忍冬藤300g芦根300g薄荷100g柴胡300g枇杷叶200g
[0051]【制法】以上五味，薄荷提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器保存，药渣与其余忍冬藤等四味加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液与蒸馏后的水溶液合并，在50~55°C温度下，浓缩成相对密度为1.33~1.36的清膏，加入适量的蔗糖粉和糊精，用乙醇制颗粒，干燥，加入薄荷油，混匀，制成650g，即得。
[0052]【性状】本品为棕褐色的颗粒；气香，味微甜、略苦。
[0053]【鉴别】⑴薄荷脑的鉴别
[0054]取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取薄荷脑对照品，加60~90°C石油醚制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10~20 μ 1、对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:醋酸乙酯=19:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0055](2)忍冬藤的鉴别
[0056]取本品3g，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取忍冬藤对照药材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5~10 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=10:5:4的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0057](3)柴胡的鉴别
[0058]取本品6g，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加入聚酰胺柱a(聚酰胺过100~200目筛，称取过筛后的聚酰胺Sg，选择内径为2.5~3cm的层析柱，湿法装柱)，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脱，收集50 %乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取柴胡对照药材lg，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加入聚酰胺柱b (聚酰胺过100~200目，称取过筛后的聚酰胺4g，选择内径为2cm的层析柱，湿法装柱)，分别用水100mL和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2~IOul和对照药材溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0059](4)大叶柴胡的鉴别:
[0060]取本品10g，加60~90°C石油醚30ml，浸泡10分钟，超声处理15分钟，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液，另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品，加甲醇制成每1ml含柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品各Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷:乙酸乙酯=8:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
[0061]【检查】应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2010年版一部附录IC)。
[0062]实施例3:
[0063]【处方】忍冬藤300g芦根300g薄荷100g柴胡300g枇杷叶200g
[0064]【制法】以上五味，薄荷提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器保存，药渣与其余忍冬藤等四味加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液与蒸馏后的水溶液合并，在50~55°C温度下，浓缩成相对密度为1.33~1.36的清膏，加入适量的蔗糖粉和糊精，用乙醇制颗粒，干燥，加入薄荷油，混匀，制成650g，即得。
[0065]【性状】本品为棕褐色的颗粒；气香，味微甜、略苦。
[0066]【鉴别】⑴薄荷脑的鉴别
[0067]取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取薄荷脑对照品，加60~90°C石油醚制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10~20 μ 1、对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:醋酸乙酯=21:1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0068](2)忍冬藤的鉴别
[0069]取本品3g，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取忍冬藤对照药材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5~10 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=12:6:4.5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0070](3)柴胡的鉴别
[0071]取本品6g，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加入聚酰胺柱a(聚酰胺过100~200目筛，称取过筛后的聚酰胺Sg，选择内径为2.5~3cm的层析柱，湿法装柱)，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取柴胡对照药材lg，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加入聚酰胺柱b (聚酰胺过100~200目，称取过筛后的聚酰胺4g，选择内径为2cm的层析柱，湿法装柱)，分别用水100mL和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2~IOul和对照药材溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=14:2.2:1.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0072](4)大叶柴胡的鉴别:
[0073]取本品10g，加60~90°C石油醚30ml，浸泡10分钟，超声处理15分钟，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液，另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品，加甲醇制成每1ml含柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品各Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷:乙酸乙酯=9:1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。 [0074]【检查】应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2010年版一部附录IC)。
【权利要求】
1.一种银柴颗粒的检测方法，包括性状、鉴别、检查项目，其特征在于:所述鉴别包括薄荷脑的鉴别、忍冬藤的鉴别、柴胡的鉴别、大叶柴胡的鉴别，检测方法包括以下: (1)薄荷脑的鉴别 取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取薄荷脑对照品，加60~90°C石油醚制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10~20 μ 1、对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:醋酸乙酯=17~21:0.8~1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (2)忍冬藤的鉴别 取本品3g，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取忍冬藤对照药材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5~10 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=8~12:4~6:3.5~4.5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (3)柴胡的鉴别 取本品6g，加 水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加入聚酰胺柱a，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取柴胡对照药材lg，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加入聚酰胺柱b，分别用水100mL和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2~IOul和对照药材溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=10~14:1.8~2.2:0.9~1.1为展开剂,展开,取出，晾干,喷以5%对二甲氨基苯甲醒的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (4)大叶柴胡的鉴别: 取本品IOgJP 60~90°C石油醚30ml，浸泡10分钟，超声处理15分钟，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液，另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品，加甲醇制成每1ml含柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品各Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷:乙酸乙酯=7~9:0.8~1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
2.根据权利要求1所述的银柴颗粒的检测方法，其特征在于:更具体的检测方法如下: (I)薄荷脑的鉴别 取本品12g，加60~90°C石油醚30ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液，另取薄荷脑对照品，加60~90°C石油醚制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10~20 μ 1、对照品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯:醋酸乙酯=19:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液:乙醇=1:4的混合溶液，在100°C烘5~10分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (2)忍冬藤的鉴别 取本品3g，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取忍冬藤对照药材3g，粉碎成粗粉，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各5~10 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯:甲酸:水=10:5:4的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (3)柴胡的鉴别 取本品6g，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加入聚酰胺柱a，分别用水、20%乙醇和50%乙醇各100mL洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取柴胡对照药材lg，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加入聚酰胺柱b，分别用水100mL和50%乙醇150ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2~IOul和对照药材溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:乙醇:水=12:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (4)大叶柴胡的鉴别: 取本品IOgJP 60~90°C石油醚30ml，浸泡10分钟，超声处理15分钟，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液，另取柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品，加甲醇制成每1ml含柴胡毒素、乙酰柴胡毒素对照品各Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷:乙酸乙酯=8:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钥酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1或2所述的银柴颗粒的检测方法，其特征在于:步骤(3)所述聚酰胺柱a为聚酰胺过100~200目筛，称取过筛后的聚酰胺Sg，选择内径为2.5~3cm的层析柱，湿法装柱。
4.根据权利要求1或2所述的银柴颗粒的检测方法，其特征在于:步骤(3)所述聚酰胺柱b为聚酰胺过100~200目，称取过筛后的聚酰胺4g，选择内径为2cm的层析柱，湿法装柱。
【文档编号】G01N30/90GK103954725SQ201410175789
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年4月28日 优先权日:2014年4月28日
【发明者】钟茂团, 黎勇, 吴诗惠, 林剑 申请人:四川逢春制药有限公司