一种用于评估硫丹生物毒性的方法
【专利摘要】一种用于评估硫丹生物毒性的方法，该方法包括检测生物样品中生物标志物表达的步骤，所述生物标志物为IL-6和/或IL-8。本发明的方法简便，相关性较高，可以快速评估生物体是否被硫丹暴露并导致了细胞毒性。本发明从炎症角度探讨了硫丹的毒性与炎性因子IL-6和IL-8的表达变化有关，提示了IL-6和IL-8可以作为评价硫丹细胞毒性的生物指标，反映硫丹暴露的浓度与效应之间的关系，对判定硫丹的生物毒性尤其是炎性损伤对生物个体的影响具有重要的意义，有利于揭示环境持久性有机污染物炎性损伤的分子机制。
【专利说明】一种用于评估硫丹生物毒性的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】，涉及一种用于环境污染物生物毒性的方法，尤其是涉及一种评估硫丹炎性损伤的方法。
【背景技术】
[0002]随着科学技术的进步、工业化水平的提高、人类活动区域的拓展，各类化学制剂正不断地进入人们的生活，其中持久性有机环境污染物(POPs)对环境的危害和人体健康的影响已经不容忽视，包括二嗯英(P⑶D/Fs)、多环芳烃(PAHs)、多氯联苯(PCBs)、有机氯农药硫丹(endosulfan)等。
[0003]现有的化学分析方法虽然能对环境或生物体内污染物含量进行定量描述，但仅凭含量无法反映污染物对生物体的效应，这就需要从分子水平研究在环境污染物作用下生物体内各种指标的变化。目前，利用生物标志物(b1marker)作为环境污染物毒性评价方法的研究受到国际上日益广泛的重视，也是当前的研究热点一。
[0004]所谓生物标志物是通过生物介质(如人体组织、细胞或体液)能够表征对某种污染物的暴露和或其效应的生化、细胞、生理、行为或能量等任何可测的改变。利用生物标志物可以衡量环境污染物的暴露及效应的生物学反应，可以作为联系污染物与生物效应之间的纽带，反映污染物暴露的时空变化，揭示污染物浓度与效应，判定污染物引起的效应对生物个体的意义。
[0005]在环境毒理学研究中，常用效应生物标志物来指示污染物的毒性效应和解释分子反应机制，如指示DNA损伤的DNA加合物、细胞色素P450、苯并芘单氧酶、乳酸脱氢酶等，可用于检测环境持久性有机污染物如PCDD/Fs、PAHs、PCBs和硫丹等的毒性评价。
[0006]生物标志物的测定方法包括:1)32P-后标记法，需要进行DNA的提取、酶解、使用放射性32P元素标记和层析等，DNA需要量少，灵敏度较高，但测定步骤复杂；2)免疫学法，如酶联免疫吸附法(ELISA)和超敏感酶放射免疫法(USERIA)，灵敏度更高，但制备抗体困难并且抗体与加合物容易发生交叉反应引起假阳性。3)色谱或质谱法，灵敏度最高，但需要特殊仪器，样品处理复杂；4)荧光法，利用一些污染物可以诱导生物体内某种酶活性的改变，该酶可能会促使其特异性反应发生而产生荧光性物质，通过测定其荧光强度就可以定量检测这些污染物质的种类和浓度(表I)。
[0007]表1.生物标志物用于多环芳烃、多氯联苯、有机氯、二噁英类化合物含量测定及毒性评价
[0008]
【权利要求】
1.一种用于评估硫丹生物毒性的方法,包括检测生物样品中生物标志物表达的步骤，其特征在于，所述生物标志物为IL-6和/或IL-8。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物标志物为IL-6蛋白、IL-6mRNA、IL-8mRNA中的一种或两种以上。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测基于IL-6和/或IL-8的过表达。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述IL-6和/或IL-8的过表达为IL-6蛋白、IL-6mRNA、IL-8mRNA中的一种的过表达或两种以上的过表达。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物样品为培养的细胞、细胞裂解产物，组织、组织裂解产物、全血、血浆、血清。
6.如权利要求1所述的生物标志物IL-6和/或IL-8在评估硫丹生物毒性中的应用。
【文档编号】G01N33/50GK104034879SQ201410310622
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年7月1日 优先权日:2014年7月1日
【发明者】徐丹, 孙野青 申请人:大连海事大学