快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开了一种快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条：包括底板及设于所述底板中部的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的两端分别与吸水板和HMF单克隆抗体金标垫相互交叠连接，并在所述HMF单克隆抗体金标垫上压接有样品吸液层；在所述硝酸纤维素膜的中部设有一条试验线和一条多克隆抗体控制线。本实用新型所提供的一种快速检测HMF的胶体金试纸条具有特异性强，灵敏度高，易储存，无须专业人员操作，结果清晰易读。
【专利说明】快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条
【技术领域】
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[0001]本实用新型涉及一种快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条，属于胶体金免疫检测领域。
【背景技术】
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[0002]天然蜂蜜营养丰富，易为人体直接吸收，且气味芳香，味甜适口，具有改善肠胃功能、促进消化吸收、镇静安神等功效；研宄还显示其具有抗衰老，帮助减轻体重等疗效，可除单独做药，也可作中药炮制及中成药辅料。为增进营养，用几种不同花型种类的天然蜂蜜调配成调和型蜂蜜。但市场上标注为“调和型蜂蜜”，实质为果葡糖浆、麦芽糖等水解后转化糖与天然蜂蜜按照一定的比例调配而成的加工蜂蜜，营养、药用功效都比不上天然蜂蜜。有些不法厂家及商贩向天然蜂蜜中添加葡萄糖、麦芽糖、色素、香精等进行造假来谋取暴利，甚至以蜂蜜国家标准为技术参数进行造假。根据国家标准GB/T18796-2012蜂蜜及相关文献报道，还原糖经加热、脱水生成的一种具有难闻气味的有毒物质5-羟甲基糠醛(HMF)，在国际贸易中属强检指标，且蜂蜜中HMF的含量应小于40mg/kg (毫克每千克)。HMF的存在会改变蜂蜜风味，摄入过多会引起中毒，甚至引发癌症、造成动物横纹肌麻痹和内脏损伤，各国均将其作为判定是否掺有转化糖的依据。加工蜂蜜由于掺有转化糖，其中HMF的含量超过40mg/kg。天然蜂蜜因储存时间过长，储存温度过高，HMF含量会逐渐升高，但在适当保存条件下超过20个月，其含量仍会超标。因此建立HMF含量的快速简便的测定，是维护普通消费者利益，保证市场稳定，促进社会和谐发展的有效方法。
【发明内容】
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[0003]为克服现有技术的缺陷，本实用新型的目的在于提供一种快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条，是一种适用于检验蜂蜜中HMF是否超标的胶体金检测试纸。
[0004]本实用新型解决技术问题采用如下技术方案:
[0005]快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条:
[0006]包括底板及设于所述底板中部的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的两端分别与吸水板和HMF单克隆抗体金标垫相互交叠连接，并在所述HMF单克隆抗体金标垫上压接有样品吸液层；
[0007]在所述硝酸纤维素膜的中部设有一条试验线和一条多克隆抗体控制线。
[0008]所述控制线是由羊抗兔多克隆抗体包被制成。
[0009]所述试验线是由HMF_BSA(牛血清白蛋白与5_羟甲基糠醛的交联物)包被制成。
[0010]所述金标垫是由HMF单克隆抗体作为胶体金标记。
[0011]所述试验线的检测值设定为国家颁布的蜂蜜中HMF ^ 40mg/kgo
[0012]与已有技术相比，本实用新型的有益效果体现在:
[0013]本实用新型制备HMF胶体金免疫层析试纸条，通过药店、超市销售，使消费者在购买蜂蜜时能现时现场利用HMF胶体金免疫层析试纸条快速检测出HMF的含量，以此来加强食用蜂蜜的安全性，同时也为食品质量检测部门对市场蜂蜜的安全性检测提供简便快速的有效方法。
[0014]本实用新型所提供的一种快速检测HMF的胶体金试纸条具有特异性强，灵敏度高，易储存，无须专业人员操作，结果清晰易读。
【专利附图】
【附图说明】
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[0015]图1为本实用新型俯视结构示意图；图2为本实用新型主视观察结构图；图3为采用本实用新型检测蜂蜜结果为阳性的示意图；图4为检测结果为阴性的示意图。
[0016]图中标号:1吸水板，2硝酸纤维素膜，3多克隆抗体控制线，4试验线，5为HMF单克隆抗体金标垫，6吸液层，7底板。
[0017]以下通过【具体实施方式】，并结合附图对本实用新型作进一步说明。
【具体实施方式】
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[0018]实施例:参见附图，在底板7的中部设有硝酸纤维素膜2，硝酸纤维素膜2的两端分别与吸水板I和HMF单克隆抗体金标垫5相互交叠连接(交叠连接部分为1-2毫米范围)，并在HMF单克隆抗体金标垫5上压接有样品吸液层6 ;在硝酸纤维素膜2的中部设有一条试验线4和一条多克隆抗体控制线3。
[0019]具体设置中，控制线3是由羊抗兔多克隆抗体包被制成。试验线4是由HMF-BSA包被制成。金标垫是由HMF单克隆抗体作为胶体金标记。试验线4的检测值设定为国家颁布的蜂蜜中HMF多40mg/kgo
[0020]检测时，将150uL蜂蜜样品滴加于吸液层的样品孔中，受毛细作用力向金标垫5层析，随后金标垫5上的胶体金标记物复溶于溶液中并随溶液一起向吸水板I处移动，经过试验线、控制线时先后与其包被的抗原抗体发生抗原抗体反应。若蜂蜜样品中HMF的含量<40mg/kg，则过量的胶体金标记物与试验线上蛋白特异性结合形成紫红色条带，即阴性。若样品中HMF含量多40mg/kg，由于金标抗体先与样品中的HMF结合，使得金标记物不能和试验线上蛋白结合，从而不能产生紫红色条带，即阳性。无论蜂蜜中HMF的含量是多少，一条紫红色条带都会出现在质控区内(控制线)。质控区(控制线)所显现的紫红色条带是判定是否有足够的蜂蜜样品，层析过程是否正常的标准，同时也是作为试剂的内控标准。所以当控制线不显色时说明检测结果无效。
【权利要求】
1.快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条，其特征在于: 包括底板(7)及设于所述底板中部的硝酸纤维素膜(2)，所述硝酸纤维素膜(2)的两端分别与吸水板⑴和HMF单克隆抗体金标垫(5)相互交叠连接，并在所述HMF单克隆抗体金标垫(5)上压接有样品吸液层(6); 在所述硝酸纤维素膜(2)的中部设有一条试验线(4)和一条多克隆抗体控制线(3)。
2.根据权利要求1所述的快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条，其特征在于，所述控制线(3)是由羊抗兔多克隆抗体包被制成。
3.根据权利要求1所述的快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条，其特征在于，所述试验线(4)是由HMF-BSA包被制成。
4.根据权利要求1所述的快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条，其特征在于，所述金标垫是由HMF单克隆抗体作为胶体金标记。
5.根据权利要求1所述的快速检测蜂蜜中5-羟甲基糠醛的胶体金试纸条，其特征在于，所述试验线(4)的检测值设定为国家颁布的蜂蜜中HMF多40mg/kgo
【文档编号】G01N33/02GK204165968SQ201420701157
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年11月20日 优先权日:2014年11月20日
【发明者】刘自平, 戴一, 王章姐, 尹伟, 刁欢, 黄茸茸 申请人:安徽新华学院