可视灵敏活组织切片检查法用于癌症早期诊断的制作方法

文档序号:12267847阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于信号放大的可视、灵敏活组织切片检查法,其特征是,以带有H2O2识别位点的聚碳酸酯聚合物(PMPC-Bpe)为基础,并在其中包载有淀粉。尽管癌症组织中含有比正常组织中更多的H2O2,但在癌症早期,组织切片中H2O2含量较少。所以本发明可以在癌症早期组织切片上释放出包载的大量淀粉,形成信号放大。随后,在组织切片上滴加碘溶液,会产生碘与淀粉形成大量的蓝色络合物。从变蓝程度就可以直观的指示组织中H2O2的含量。以此为癌症早期诊断的新方法。具体为:将包载有淀粉的H2O2响应胶束分散在PBS缓冲溶液中,定容。然后,将一定量的胶束溶液滴加到已知面积的癌症组织切片上面,使胶束与组织切片充分作用一段时间。随后加入碘,使组织切片上胶束响应后释放出来的淀粉变蓝。通过普通显微镜放大可以直观地对组织切片变蓝的程度及组织学特征进行观察,实现对癌症早期诊断。

2.根据权利要求1所述的淀粉包载量与H2O2响应胶束的质量比为1:5-5.1,且最终浓度定为0.48-0.51mg/mL。

3.根据权利要求1所述PBS缓冲溶液的pH为7.2-7.4。

4.根据权利要求1所述胶束溶液为0.48-0.51mg/mL。

5.根据权利要求1所述癌症组织切片厚度为28-30μm。面积为:0.25-0.30cm2

6.根据权利要求1所述胶束与组织切片作用时间为:90-105min,所述加入碘的含量为:1mM L-1-1.2mM L-1。所述普通显微镜型号为:尼康TE 2000显微镜,所用的镜头100×。

7.根据权利要求1所述的聚碳酸酯聚合物PMPC-Bpe的合成过程为:向50mL Schlenk瓶中,加入200mg PEG-b-poly(MPC),76.13mg Bpe-N3,4.50mg抗坏血酸钠,再加入4mL DMF,橡胶塞封口,再经过冷冻为固态-抽真空-解冻三次循环后,加入DMF溶解的2.8mg硫酸铜,室温搅拌反应24h,用去离子水透析3天(透析袋3500MWCO),冰冻法得产物,产率81.30%。

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