一种医用交联透明质酸钠凝胶中盐酸利多卡因含量的检测方法与流程

本发明涉及药品检测
技术领域：
，特别涉及一种医用交联透明质酸钠凝胶中盐酸利多卡因含量的检测方法
背景技术：
：医用交联透明质酸钠凝胶中盐酸利多卡因含量检测，其中医用交联透明质酸钠凝胶为颗粒物和润滑液组成，其中颗粒物为紧密的三维网状结构，盐酸利多卡因溶解在产品中，可能会存在在网状结构中。盐酸利多卡因含量检测，产品需要过滤，可能无法使所有的盐酸利多卡通过滤膜，影响检测结果的准确性和重复性。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题在于针对现有中国药典盐酸利多卡因含量检测存在的不足而提供一种制剂中盐酸利多卡因含量的检测方法，该方法操作简单，准确性好，重复性高本发明所要解决的技术问题可以通过以下技术方案来实现：一种医用交联透明质酸钠凝胶中盐酸利多卡因含量的检测方法，具有如下步骤:(1)流动相配制步骤取1mol/L磷酸二氢钠溶液1.3ml与0.5mol/L磷酸氢二钠溶液32.5ml，用水稀释至1000ml，磷酸盐溶液：乙腈＝500:500，调节pH为8.0；(2)对照品溶液配制步骤取利多卡因对照品适量，精密称定，用流动相稀释至0.2mg/ml～1.0mg/ml；(3)供试品溶液配制步骤取含盐酸利多卡的医用交联透明质酸钠凝胶1.0g，用浓度为20-100U/ml的透明质酸钠酶溶液3.0-5.0ml，37℃水浴锅中恒温12-28小时，溶解后用流动相定容至10ml，0.45μm滤膜过滤，备用；(4)测试步骤：仪器：高效液相色谱仪、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱柱温：25℃，流速：1ml/min精密取步骤(3)制备的供试品溶液、步骤(2)制备的对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以外标法按峰面积计算含量。在本发明一个优选实施例中，所述步骤(2)中，所述对照品溶液浓度为0.3mg/ml-0.4mg/ml。在本发明一个优选实施例中，所述步骤(3)中，所述透明质酸酶溶液的浓度为50U/ml-60U/ml。在本发明一个优选实施例中，所述步骤(3)中，37℃水浴锅中恒温为20-24小时。本发明通过透明质酸酶使医用交联透明质酸钠凝胶水解，再进行过滤，使盐酸利多卡因完全通过滤膜，过滤到检测样品中，检测正确性好，重复性高，操作方便。附图说明图1为本发明实施例1的对照品溶液的液相色谱图。图2为本发明实施例1的供试品溶液的液相色谱图。图3为本发明实施例2的对照品溶液的液相色谱图。图4为本发明实施例2的供试品溶液的液相色谱图。图5为本发明实施例3的对照品溶液的液相色谱图。图6为本发明实施例3的供试品溶液的液相色谱图。图7为本发明实施例4的对照品溶液的液相色谱图。图8为本发明实施例4的供试品溶液的液相色谱图。图9为本发明实施例5的对照品溶液的液相色谱图。图10为本发明实施例5的供试品溶液的液相色谱图。具体实施方式：下面结合实施例对本发明进一步说明，可以帮助本领域的技术人员更全面的理解本发明。但不以任何方式限制本发明，凡依照本发明的内容所做的任何本领域的等同替换均属于本发明的保护范围之内。实施例1流动相配制：1mol/L磷酸二氢钠溶液1.3ml与0.5mol/L磷酸氢二钠溶液32.5ml，用水稀释至1000ml，磷酸盐溶液：乙腈＝500:500，调节pH为8.0对照品溶液配制：取利多卡因对照品15.6mg，用流动相稀释至0.312mg/ml，备用。供试品溶液配制：取产品1.1014g，用浓度为60U/ml的透明质酸钠酶溶液4.0ml，37℃水浴锅中恒温24小时，溶解后用流动相定容至10ml，0.45μm滤膜过滤，备用。检测：仪器：高效液相色谱仪、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱柱温：25℃，流速：1ml/min精密取供试品溶液、对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图如图1和图2，以外标法按峰面积计算含量。结果见表1表1样品名称保留时间峰面积％峰面积备注JJ-1013.852100.001843474对照品JJ-213.814100.001775824供试品实施例2流动相配制：1mol/L磷酸二氢钠溶液1.3ml与0.5mol/L磷酸氢二钠溶液32.5ml，用水稀释至1000ml，磷酸盐溶液：乙腈＝500:500，调节pH为8.0对照品溶液配制：取利多卡因对照品15.1mg，用流动相稀释至约0.302mg/ml，备用。供试品溶液配制：取产品1.0689g，用浓度为50U/ml的透明质酸钠酶溶液4.0ml，37℃水浴锅中恒温24小时，溶解后用流动相定容至10ml，0.45μm滤膜过滤，备用。检测：仪器：高效液相色谱仪、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱柱温：25℃，流速：1ml/min精密取供试品溶液、对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图如图3和图4，以外标法按峰面积计算含量。结果参见表2表2样品名称保留时间峰面积％峰面积备注JJ-1113.842100.001833534对照品JJ-413.776100.001786631供试品实施例3流动相配制：1mol/L磷酸二氢钠溶液1.3ml与0.5mol/L磷酸氢二钠溶液32.5ml，用水稀释至1000ml，磷酸盐溶液：乙腈＝500:500，调节pH为8.0对照品溶液配制：取利多卡因对照品16.6mg，用流动相稀释至约0.332mg/ml，备用。供试品溶液配制：取产品1.1826g，用浓度为100U/ml的透明质酸钠酶溶液4.0ml，37℃水浴锅中恒温16小时，溶解后用流动相定容至10ml，0.45μm滤膜过滤，备用。检测：仪器：高效液相色谱仪、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱柱温：25℃，流速：1ml/min精密取供试品溶液、对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图如图5和图6，以外标法按峰面积计算含量。结果参见表3表3样品名称保留时间峰面积％峰面积备注JJ-112.952100.001943474对照品JJ-1013.852100.001885474供试品实施例4流动相配制：1mol/L磷酸二氢钠溶液1.3ml与0.5mol/L磷酸氢二钠溶液32.5ml，用水稀释至1000ml，磷酸盐溶液：乙腈＝500:500，调节pH为8.0对照品溶液配制：取利多卡因对照品15.3mg，用流动相稀释至约0.306mg/ml，备用。供试品溶液配制：取产品1.0307g，用流动相定容至10ml，0.45μm滤膜过滤，备用。检测：仪器：高效液相色谱仪、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱柱温：25℃，流速：1ml/min精密取供试品溶液、对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图如图7和图8，以外标法按峰面积计算含量。结果参见表4表4样品名称保留时间峰面积％峰面积备注JJ-513.525100.001753475对照品JJ-113.853100.00614346供试品实施例5流动相配制：1mol/L磷酸二氢钠溶液1.3ml与0.5mol/L磷酸氢二钠溶液32.5ml，用水稀释至1000ml，磷酸盐溶液：乙腈＝500:500，调节pH为8.0对照品溶液配制：取利多卡因对照品15.1mg，用流动相稀释至约0.302mg/ml，备用。供试品溶液配制：取产品1.0204g，用浓度为20U/ml的透明质酸钠酶溶液4.0ml，37℃水浴锅中恒温28小时，溶解后用流动相定容至10ml，0.45μm滤膜过滤，备用。检测：仪器：高效液相色谱仪、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱柱温：25℃，流速：1ml/min精密取供试品溶液、对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图如图9和图10，以外标法按峰面积计算含量。结果参见表5表5样品名称保留时间峰面积％峰面积备注JJ-113.832100.001743447对照品JJ-112.194100.00584759供试品将以上实施例所得成品送检，检验结果以及过程工艺参数汇总如下表6：表6由上表可得出结论，实施例1，实施例2，实施例3均采用透明质酸酶进行水解后检测，结果接近理论值，结果相对稳定，重复性好，相对标准偏差为0.3％。实施例4，实施例5没有采用透明质酸酶水解，结果偏低，重复性差，相对标准偏差8.0％。当前第1页1 2 3