本发明涉及农药残留检测技术领域，具体涉及一种有机农业产品的农药残留快速检测方法。
背景技术：
随着生活水平的提高和生活方式的改变，有机农业产品在人们食物构成中的比重越来越大，目前，几乎所有的商场都设置有有机食品专柜，并且售价是非有机食品的好几倍。有机农业(organicagriculture)是遵照特定的农业生产原则，在生产中不采用基因工程获得的生物及其产物，不使用化学合成的农药、化肥、生长调节剂、饲料添加剂等物质，遵循自然规律和生态学原理，协调种植业和养殖业的平衡，采用一系列可持续发展的农业技术以维持持续稳定的农业生产体系的一种农业生产方式。有机产品(organicproduct)是按照国家标准(gb/t19630-2011)生产、加工、销售的供人类消费、动物食用的产品。
有一定规模的有机农场，虽然不使用化学合成的农药，但是“天然”农药是必不可少的，否则害虫早就把农作物吃光了，据统计，有机农场使用经过正规有机认证机构认可的有机杀虫剂超过20种，有机农场不但用农药，而且用量往往比非有机的还要多，原因就在于有机种植所使用的“天然”农药的药效往往比化学合成的农药低，必须加大剂量才管用。
农药残留常见的检测方法主要有色谱检测法、免疫试纸条法和农残速测卡法。其中色谱检测法是根据分析物质在固定相和流动相之间的分配系数的不同达到分离目的,并将分析物质的浓度转换成易被测量的电信号(电压、电流等),然后送到记录仪记录下来的方法，色谱检测法尽管灵敏度高、准确度高，但需要大型昂贵的仪器、专业的操作人员以及复杂的样品前处理过程，检测时间长；免疫试纸条法检测过程虽简单，但抗体昂贵、且一次只能测单种农药；而农残速测卡法尽管操作简便、成本低廉，但准确性不高、不能定量。因此，发展一种现场、简单、快速、廉价、高灵敏的有机农业产品农药残留定量检测方法具有重要的现实意义。
技术实现要素：
本发明的发明目的是，针对上述问题，提供一种有机农业产品的农药残留快速检测方法，本发明提供操作简单、对检测人员无专业性要求、检测灵敏度高，且成本低廉的一种有机农业产品的农药残留快速检测方法。
为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种有机农业产品的农药残留快速检测方法，包括以下步骤：
步骤1、向有机农业产品样品中加入去离子水浸泡，然后加入冰醋酸-乙腈溶液、无水硫酸镁、氯化钠和乙酸钠，依次进行涡旋和离心处理；
步骤2、取步骤1的上清液，加入无水硫酸镁和多壁碳纳米管，依次进行涡旋和离心处理；
步骤3、取步骤2的上清液于旋转蒸发仪内浓缩，用正己烷-丙酮混合溶剂定容后过滤，取得滤液；
步骤4、通过金属离子与有机配体作用，合成原位包覆有乙酰胆碱酯酶的配位聚合物材料；
步骤5、在丝网印刷电极表面滴加聚酰胺-胺型树枝状高分子水溶液，使电极表面形成一层薄膜；
步骤6、通过戊二醛偶联的方式，将步骤4获得的配位聚合物材料共价修饰到步骤5的电极上；
步骤7、将步骤6制备的丝网印刷电极与便携式电化学工作站相连，通过方波阳极溶出伏安法检测农药加入前、后乙酰胆碱电流信号的变化，根据农药浓度与电流信号变化值之间的关系完成定量检测，以获得农药浓度与电流信号的关系；
步骤8、将步骤3的滤液用步骤7的方式，获得滤液此时的电流信号，再根据步骤7所知农药浓度与电流信号关系以及国标中对农药的限量，可判断出该有机农产品农药残留是否超标。
优选的，在步骤1中，所述冰醋酸-乙腈溶液的浓度为1.5-2.5wt％，所述冰醋酸和所述乙腈的体积比为1：(105-120)。
优选的，在步骤2中，所述涡旋的时间为3-5min，所述离心的转速为5000-6000r/min，离心时间为5-10min。
优选的，在步骤3中，所述上清液与所述正己烷-丙酮混合溶剂的体积比为(1.5-2.5)：1。
优选的，步骤4中，所述金属离子为cu2+、zn2+或者ptcl62-中其中的任意一种；所述有机配体为2,4-二巯基-5,6-二氨基嘧啶、2,5-二氨基-1,4-苯二硫醇二盐酸盐或者2,5-二巯基对苯二甲酸其中的任意一种。
优选的，步骤5中，所述聚酰胺-胺型树枝状高分子溶液浓度为1％，体积为5μl。
优选的，步骤6中，所述戊二醛的浓度为3％。
优选的，步骤7中，所述便携式电化学工作站反应体系中，所用底物为乙酰胆碱，其浓度为2％。
优选的，步骤7中，农药加入10-15min后再进行乙酰胆碱电流信号检测。
由于采用上述技术方案，本发明具有以下有益效果：本发明的提取溶剂中添加适量乙酸，回收率好且稳定。本发明采用方法是将净化剂多壁碳纳米管直接加入到提取液中，与传统的固相萃取法相比可节约大量柱活化和淋洗所需的溶剂，并可节省时间。与经典的乙睛提取、弗罗里硅土柱净化法相比较，以冰醋酸-乙腈作提取剂可节省溶剂，减少环境污染。同时，加入多壁碳纳米管后可以具有吸附色素的能力，同时还具有一定的净化效果。金属有机配位聚合物原位包裹乙酰胆碱酯酶进行信号放大，利用聚酰胺-胺型树枝状高分子优良的成膜能力、导电能力以及方波阳极溶出伏安法的富集优势，基于丝网印刷电极和便携式电化学工作站构建以实现果蔬农药残留现场、简单、快速、高灵敏的定量检测平台，其检测限可低至10-12m；其中配位聚合物优良的原位包裹能力和疏松多孔性，不仅能有效提高酶的固定量，而且可以很好地保持酶的活性、保证酶催化反应的顺利进行；再者，聚酰胺-胺型树枝状高分子的使用，由于其特性，不仅提高了金属有机配位聚合物中电子的传递能力，而且还能有效提高其在电极表面的附着性，从而保证乙酰胆碱酯酶的有效固定，提高检测稳定性；此外，本发明中的丝网印刷电极，成本低、即用即抛、操作简便、测试性能非常稳定，和便携式电化学工作站一起非常适合基层现场使用。同时整个过程无需依赖大型仪器以及专业的操作人员，可广泛用于资源匮乏的农村以及发展中国家的现场定量检测。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种有机农业产品的农药残留快速检测方法，包括以下步骤：
步骤1、向有机农业产品样品中加入去离子水浸泡，然后加入冰醋酸-乙腈溶液、无水硫酸镁、氯化钠和乙酸钠，依次进行涡旋和离心处理，其中冰醋酸-乙腈溶液的浓度为1.5wt％，所述冰醋酸和所述乙腈的体积比为1：120；
步骤2、取步骤1的上清液，加入无水硫酸镁和多壁碳纳米管，依次进行涡旋和离心处理，其中涡旋的时间为3min，离心的转速为5000r/min，离心时间为10min；
步骤3、取步骤2的上清液于旋转蒸发仪内浓缩，用正己烷-丙酮混合溶剂定容后过滤，取得滤液，其中上清液与正己烷-丙酮混合溶剂的体积比为1.5：1；
步骤4、通过金属离子与有机配体作用，合成原位包覆有乙酰胆碱酯酶的配位聚合物材料，其中金属离子为cu2+；所述有机配体为2,5-二巯基对苯二甲酸；
步骤5、在丝网印刷电极表面滴加聚酰胺-胺型树枝状高分子水溶液，使电极表面形成一层薄膜，其中聚酰胺-胺型树枝状高分子溶液浓度为1％，体积为5μl；
步骤6、通过戊二醛偶联的方式，将步骤4获得的配位聚合物材料共价修饰到步骤5的电极上，其中戊二醛的浓度为3％；
步骤7、将步骤6制备的丝网印刷电极与便携式电化学工作站相连，通过方波阳极溶出伏安法检测农药加入前、后乙酰胆碱电流信号的变化，根据农药浓度与电流信号变化值之间的关系完成定量检测，以获得农药浓度与电流信号的关系，其中便携式电化学工作站反应体系中，所用底物为乙酰胆碱，其浓度为2％，农药加入15min后再进行乙酰胆碱电流信号检测；
步骤8、将步骤3的滤液用步骤7的方式，通过方波阳极溶出伏安法检测滤液加入前、后乙酰胆碱电流信号的变化，获得滤液此时的电流信号，再根据步骤7所知农药浓度与电流信号关系以及国标中对农药的限量，可判断出该有机农产品农药残留是否超标。
实施例2
一种有机农业产品的农药残留快速检测方法，包括以下步骤：
步骤1、向有机农业产品样品中加入去离子水浸泡，然后加入冰醋酸-乙腈溶液、无水硫酸镁、氯化钠和乙酸钠，依次进行涡旋和离心处理，其中冰醋酸-乙腈溶液的浓度为2wt％，所述冰醋酸和所述乙腈的体积比为1：110；
步骤2、取步骤1的上清液，加入无水硫酸镁和多壁碳纳米管，依次进行涡旋和离心处理，其中涡旋的时间为4min，离心的转速为5500r/min，离心时间为8min；
步骤3、取步骤2的上清液于旋转蒸发仪内浓缩，用正己烷-丙酮混合溶剂定容后过滤，取得滤液，其中上清液与正己烷-丙酮混合溶剂的体积比为2：1；
步骤4、通过金属离子与有机配体作用，合成原位包覆有乙酰胆碱酯酶的配位聚合物材料，其中金属离子为zn2+；所述有机配体为2,5-二氨基-1,4-苯二硫醇二盐酸盐；
步骤5、在丝网印刷电极表面滴加聚酰胺-胺型树枝状高分子水溶液，使电极表面形成一层薄膜，其中聚酰胺-胺型树枝状高分子溶液浓度为1％，体积为5μl；
步骤6、通过戊二醛偶联的方式，将步骤4获得的配位聚合物材料共价修饰到步骤5的电极上，其中戊二醛的浓度为3％；
步骤7、将步骤6制备的丝网印刷电极与便携式电化学工作站相连，通过方波阳极溶出伏安法检测农药加入前、后乙酰胆碱电流信号的变化，根据农药浓度与电流信号变化值之间的关系完成定量检测，以获得农药浓度与电流信号的关系，其中便携式电化学工作站反应体系中，所用底物为乙酰胆碱，其浓度为2％，农药加入12min后再进行乙酰胆碱电流信号检测；
步骤8、将步骤3的滤液用步骤7的方式，通过方波阳极溶出伏安法检测滤液加入前、后乙酰胆碱电流信号的变化，获得滤液此时的电流信号，再根据步骤7所知农药浓度与电流信号关系以及国标中对农药的限量，可判断出该有机农产品农药残留是否超标。
实施例3
一种有机农业产品的农药残留快速检测方法，包括以下步骤：
步骤1、向有机农业产品样品中加入去离子水浸泡，然后加入冰醋酸-乙腈溶液、无水硫酸镁、氯化钠和乙酸钠，依次进行涡旋和离心处理，其中冰醋酸-乙腈溶液的浓度为2.5wt％，所述冰醋酸和所述乙腈的体积比为1：105；
步骤2、取步骤1的上清液，加入无水硫酸镁和多壁碳纳米管，依次进行涡旋和离心处理，其中涡旋的时间为5min，离心的转速为6000r/min，离心时间为5min；
步骤3、取步骤2的上清液于旋转蒸发仪内浓缩，用正己烷-丙酮混合溶剂定容后过滤，取得滤液，其中上清液与正己烷-丙酮混合溶剂的体积比为2.5：1；
步骤4、通过金属离子与有机配体作用，合成原位包覆有乙酰胆碱酯酶的配位聚合物材料，其中金属离子为ptcl62-；所述有机配体为2,5-二氨基-1,4-苯二硫醇二盐酸盐；
步骤5、在丝网印刷电极表面滴加聚酰胺-胺型树枝状高分子水溶液，使电极表面形成一层薄膜，其中聚酰胺-胺型树枝状高分子溶液浓度为1％，体积为5μl；
步骤6、通过戊二醛偶联的方式，将步骤4获得的配位聚合物材料共价修饰到步骤5的电极上，其中戊二醛的浓度为3％；
步骤7、将步骤6制备的丝网印刷电极与便携式电化学工作站相连，通过方波阳极溶出伏安法检测农药加入前、后乙酰胆碱电流信号的变化，根据农药浓度与电流信号变化值之间的关系完成定量检测，以获得农药浓度与电流信号的关系，其中便携式电化学工作站反应体系中，所用底物为乙酰胆碱，其浓度为2％，农药加入10min后再进行乙酰胆碱电流信号检测；
步骤8、将步骤3的滤液用步骤7的方式，通过方波阳极溶出伏安法检测滤液加入前、后乙酰胆碱电流信号的变化，获得滤液此时的电流信号，再根据步骤7所知农药浓度与电流信号关系以及国标中对农药的限量，可判断出该有机农产品农药残留是否超标。
应用上述检测方法，对市场上售卖的有机农产品进行农药加样测定，得到上述方法的不同农药的检测灵敏度如下：
从上表可知，本方法对敌敌畏残留检测灵敏度最高，对其他几类农药的灵敏度几乎都不大于0.5，说明本方法满足高灵敏要求。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。