一种液基细胞制片的方法与流程

文档序号:31661070发布日期:2022-09-27 23:05阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种液基细胞制片的方法,包括以下步骤:s1:将液基样品放入到培养皿中,孵育后,切换至生理盐水体系,然后向培养皿中加入苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯组成的混合物,离心,然后用生理盐水冲洗掉上层的红细胞、白细胞和粘液;再然后用吸走表层液膜,底层即为处理后的液基样品;s2:向步骤s1中处理后的液基样品中加入细胞保存处理液,充分振荡,对细胞进行定型,得到定型处理后的液基样品;s3:将步骤s2中定型处理后的液基样品置于沉降仓中进行沉降,沉降后,去除上清液,然后进行巴氏染色,得到染色后的液基样品;s4:将步骤s3中染色后的液基样品进入离心机的制片仓,通过离心作用,在病理玻片上形成均匀的细胞层,封片后,即可用于检测。2.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法,其特征在于,所述步骤s1中,苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯的质量比为(0.47~0.59):(0.41~0.53);混合物的密度在1.14~1.17g/cm3;混合物配置时,是将甘油三苯酸甲酯加入到苯甲酸甲酯中,加热至70~80℃,使甘油三苯酸甲酯充分溶解,得到均匀的混合物。3.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法,其特征在于,所述步骤s1中,苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯组成的混合物加入量为液基样品生理盐水体系体积的0.2~0.3倍。4.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法,其特征在于,所述步骤s1中,离心的转速为1000~1200r/min;生理盐水冲洗时间为4~5min。5.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法,其特征在于,所述步骤s2中,每100ml细胞保存处理液,有以下组分组成:十二水磷酸氢二钠:2.5~3.1g;二水磷酸二氢钠:0.25~0.35g;乙醇20~30ml;甲醛 1~5ml;氯化钠0.1~1g;二硫苏糖醇0.2~0.4g;谷氨酰胺0.03~0.05g;叶酸0.1~0.2g;加蒸馏水补充至100ml。6.根据权利要求5所述的液基细胞制片的方法,其特征在于,所述步骤s2中,处理后的液基样品和细胞保存处理液的体积比为1:2~4。7.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法,其特征在于,所述步骤s3中,巴氏染色的具体步骤为:向沉降后的液基样本中加入95%无水乙醇固定15~20min,蒸馏水清洗4~5次,接着置于苏木素染液中3~5min,清水冲洗2~3次,进行蓝化,接着95%的乙醇进行漂洗,置于橙黄染液中1~10s,接着95%的乙醇进行漂洗,再接着100%的乙醇漂洗,然后置于ea50染料中3~5min,接着95%的乙醇进行漂洗2次,100%的乙醇漂洗,置于无水乙醇中2~3min,接着置于二甲苯中2min。8.根据权利要求1所述的液基细胞制片的方法,其特征在于,所述步骤s4中,离心转速为700~800r/min。

技术总结
本申请涉及一种液基细胞制片的方法,本申请中的方法通过在液基样品的生理盐水体系中加入苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯组成的混合物,通过离心作用,是杂质细胞与液基细胞实现有效的分离,从而可以避免这些杂质细胞的存在,影响液基细胞的观察,提高检测的效率和准确率。本申请中通过苯甲酸甲酯和甘油三苯酸甲酯的比例,可以控制液膜的形成,从而更好的实现杂质的去除。本申请中配置了细胞保存处理液,可以使液基细胞保持较好的形态,避免了细胞的萎缩和肿胀破裂等形态变化情况的发生,维持细胞的稳定性,同时细胞保存处理液还可以实现细胞的固定,使细胞易染色,从而提高细胞制片的清晰度,便于后续的病理检验工作。便于后续的病理检验工作。


技术研发人员:张海娟 张金花 傅亮 白丽娜
受保护的技术使用者:山西尚宁高科技医学检验中心(有限公司)
技术研发日:2022.07.08
技术公布日:2022/9/26
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