专利名称：电泳转移一种大分子核酸的方法
技术领域：
本发明涉及采用电泳转移一种大分子核酸的方法在进行核酸的各种杂交实验前，都要先做核酸的硝基纤维素纸转移，即把经琼脂糖凝胶电泳分离的DNA片段转移到硝基纤维素纸上，然后进行DNA-DNA，DNA-RNA杂交实验，根据国同内外现通常采用核酸转移方法为吸印法，电转移方法，吸印法对于大于15Kb的DNA分子，需要很长的转移时间(至少20小时以上)，而且转移常常不彻底，只是利用了吸水纸对水的吸力，而使DNA分子随水向上移动，由于吸水纸的作用力很有限，转移速度自然缓慢，电转移方法采用不锈钢电极专用设备，在不锈钢板上需人为打眼，其孔径及孔的均匀程度不能保证，很容易引进杂质离子，同时它必须是专用的电极设备。本发明经过大量的试验研究探索，研制出采用电泳转移一种大分子核酸的方法。
本发明的目的在于，研制电泳转移一种大分子核酸的方法，其主要是首先制做支持胶，然后将硝基纤维素纸，电泳纸切下的含DNA酶解谱带的琼脂条先后垂直贴在一块支持胶的断面上，再用另一块支持胶将硝基纤维纸条和电泳胶条夹紧，给两块支持胶搭上纸桥，接通电源即可，该方法是利用琼脂糖中自身的孔径转移，可防止杂质离子进入，同时它还适用于任何一种电极设备，时间短，转移完全，该方法制做简单，使用方便，安全可靠。
本发明所述的电泳转移一种大分子核酸的方法，首先制做支持胶，然后将硝基纤维素纸、电泳后切下的含DNA酶解谱带的琼脂条先后垂直贴在一块支持胶的断面上，再用另一块支持胶将硝基纤维素纸条和电泳胶条夹紧，给两块支持胶搭上纸桥，接通电源，电流50-100WA，电泳1-2小时。支持胶是用电泳缓冲液配制1-2％琼脂糖溶液，倒入玻璃盒内凝固，凝固后除去玻璃盒切成胶条即可。本发明所述的电泳转移方法还可推广用于聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的转移，聚丙烯酰胺凝胶电泳，但聚丙烯酰胺凝胶的孔径小，一般难于进行通常的转移，而改用电泳转移，则可得到好的结果。
实施例1首先制做支持胶，用电泳缓冲液配制定1％琼脂糖溶液，倒入玻璃盒内凝固，凝固后除去玻璃盒内切成胶条即成支持胶，然后将硝基纤维素纸，电泳后切下的含DNA敏解谱带的琼脂条，先后垂直贴在一块支持胶的垂直断面上排尽气泡，再用另一块支持胶将硝基纤维素纸条和电泳胶条夹紧，给两块支持胶搭上纸桥，接通电源、电流50WA，电泳1小时即可得到转移完全的硝基纤维素纸条，用于杂交实验。
实施例2首先制做支持胶，用电泳缓冲液配制2％琼脂糖溶液，倒入玻璃盒内凝固，凝固后除去玻璃盒切成胶条即成支持胶，然后将硝基纤维素纸、电泳后切下的含DNA酶解谱带的琼脂条，先后垂直贴在一块支持胶的垂直断面上排尽汽泡，再用另一块支持胶将硝基纤维素纸条和电泳胶条夹紧，给两块支持胶搭上纸桥，接通电源，电流100WA，电泳2小时，即可得到转移完全的硝基纤维纸条，用于杂交实验。
权利要求
1.一种电泳转移一种大分子核酸的方法，其特征在于，首先制做支持胶，然后将硝基纤维素纸、电泳后切下的含DNA酶解谱带的琼脂条先后垂直贴在一块支持胶的断面上，再用另一块支持胶将硝基纤维素纸条和电泳胶条夹紧，给两块支持胶搭上纸桥，接通电源，电流50-100WA，电泳1-2小时。
2.根据权利要求1所述的电泳转移一种大分子核酸的方法，其特征在于支持胶是用电泳缓冲液配制1-2％琼脂糖溶液，倒入玻璃盒内凝固，凝固后除去玻璃盒切成胶条即可。
全文摘要
本发明涉及电泳转移一种大分子核酸的方法,其主要是首先制做支持胶,然后将硝基纤维素纸,电泳后切下的含DNA酶解谱带的琼脂条先后垂直贴在一块支持胶的断面上,再用另一块支持胶一将硝基纤维素纸条和电泳胶条夹紧,给两块支持胶搭上纸桥,接通电源即可,使用该方法可防止杂质离子进入,同时它还适用于任何一种电极设备,时间短、转移完全,该方法制做简单,使用方便,安全可靠。
文档编号G01N27/26GK1186790SQ96118960
公开日1998年7月8日 申请日期1996年12月31日 优先权日1996年12月31日
发明者赵民安, 杨向明, 刘敏 申请人:中国科学院新疆化学研究所