一种土壤线虫分离提取的装置及方法_2

文档序号:8254636阅读:来源:国知局
br>[0029]4)在土液积累到第二级分离筛上面时,用玻璃棒轻轻搅拌,同时打开加水设备,向喷水管加水,使水冲刷筛壁和筛底,使土液向引液口方向流动;
[0030]5)检查盛土杯中土液的残留,用少量水冲洗,直至盛土杯中无土液残留,第一级分离筛筛下的土液澄清为止,然后关闭旋塞阀;
[0031]6)不断用加水设备通过向喷水管加水,冲洗积累在第二级分离筛上面的土液;观察透过第二级分离筛的土液,直至透过分离筛的土液澄清为止;
[0032]7)收集容器收集到线虫悬液,经过沉淀,去除上层清液后转移到离心管中,把收集容器用水冲洗干净,将悬液进行离心,2000?3000转/每分钟,然后再去除上清液;
[0033]8)在离心管中加入800g/L蔗糖溶液,在2000转/分钟速度下离心2分钟,将上清液注进500目的筛子进行过筛,并用水冲洗筛子即可获取干净的线虫。
[0034]由于采取以上技术方案而使本发明具有的有益效果是:
[0035]1、实现了对土壤颗粒充分分散。该装置利用倾斜的叶片与土液接触,具有与土壤接触面积大,在叶轮转动的过程中,土液可以通过叶片,进一步增加搅拌的力度。
[0036]2、可控制土液流出的速度。土液通过旋塞进入分离筛,如果速度过快,与可能造成土液在分离筛的外溢,因此不能太快,旋转控制旋钮,可随时使活塞打开或关闭。
[0037]3、可实现多次搅拌。由于搅拌分散的土液沉淀速度快,为充分的分散,可根据土质的需要而进行多次搅拌。
[0038]4、减少线虫损失。盛土杯座部为弧形结构,一方面是减小叶轮与盛土杯底的直接接触而伤害线虫,另外也有利于对残余的土液进行清洗,避免因土液残存而造成线虫数量的减少,从而提尚获取线虫的效率。
[0039]5、分离筛易于冲洗。在筛壁上设计喷水管,可以自动冲洗筛壁和筛底。另外,水柱来自不同的方向,一次注水,可以从各方向对筛壁和筛底进行冲洗,减少了冲洗时给水的工作量,也减小了对线虫的压强,有利于线虫活力的维持。
[0040]6、有利于线虫的获取。对400目分离筛进行倾斜设计,可使得冲洗线虫的水自然流向下端的收集管处,进而对线虫水悬液进行收集。收集管收集到的线虫悬液还有的土粒均大于0.038mm,对获取线虫的土液进一步沉淀并用鹿糖溶液浮选,时间可缩短,减小了线虫在蔗糖溶液中的脱水,且获得的线虫溶液澄清,易于进一步收集和分析。
【附图说明】
[0041]图1是装置的一种实施例的整体结构示意图;
[0042]图2是盛土杯的一种实施例结构示意图;
[0043]图3是搅拌器的一种实施例结构示意图;
[0044]图4是分离筛的结构示意图(不带挡水板);
[0045]图5是分离筛与喷水管的一种组合实施例纵剖示意图;
[0046]图6-1是分离筛与喷水管的另一种组合实施例纵剖示意图;
[0047]图6-2是分离筛与喷水管的另一种组合实施例俯视示意图;
[0048]图7是喷水管的示意图。
【具体实施方式】
[0049]下面结合附图和实施例对本发明进行详细的描述。但本领域的技术人员应该知道,以下实施例并不是对本发明技术方案作的唯一限定,凡是在本发明技术方案精神和实质下所做的任何等同变换或改动,均应视为属于本发明的保护范围。
[0050]本发明涉及的内容主要有两方面,一是最大限度地把线虫同土壤中分离出来,得到含有线虫的较干净的土壤悬液,此过程主要包括:
[0051]I) 土壤线虫的游离:主要是对供试土样加水搅拌,使线虫从土壤毛管水中游离出来;
[0052]2)筛分出大的颗粒以及小的土壤粉粘微粒:主要是把经过分散的土液进行筛分,移出大于40目(0.42mm)粗砂粒以及小于400目(0.038mm)的粉沙以及粘粒,并收集到含有较细砂粒的线虫悬液。
[0053]二是把线虫从悬液中分离出来,获取澄清的线虫溶液,以获得准确的线虫数量。为完成上述过程,本发明采用的配套装置以及相应的方法说明如下:
[0054]一,结构装置
[0055]如图1所示,本发明采取的装置主要包含以下部件:支架、盛土杯1、搅拌器2、分离筛3、4,喷水系统、收集管7、收集容器8。对本装置的部件和使用方法,下面结合附图进行说明:
[0056]盛土杯I
[0057]如图2所示,盛土杯I是一个底部起码具有一出液口 11的杯子。对于盛土杯的形状不做严格限制,但可以提供几种较佳实施例:一是盛土杯为一圆柱形的平底杯子,在杯子底部开具有几个出液口 ;二是,盛土杯为一锥形或近似于锥形的杯子,在锥底部可开具一出液口 ;三是,盛土杯为一上部为圆柱形,下部为半球形的杯状(也可称之为碗状),在碗底部开具一出液口 ;四是,盛土杯为一上部为圆柱形,下部为锥形的杯子,在锥底部开具一出液口。几种实施例中,平底的杯子不太方便,一是流动性差,需要设置几个出液口才能便于不同位置的液体流出,操作较麻烦;二是搅拌不太方便,平底部液体不容易被搅到,滞留严重。对于球形或锥形等收缩形杯底,开设一个出液口就可以,并且杯子底部存留量小,容易被搅动,所以这种类型的杯子宜于选择。本发明选择深度和跨度较大的盛土杯(直径15cm,高度1cm),而不使用细长的离心管,可以装入较多的样土,也便于放入搅拌器。在保证搅拌容积足够大的同时,还可以保证搅拌物不被杯壁粘滞停留,使搅拌物顺其杯壁在自重作用下自然下流,曲面可以有利于搅拌物向杯体底部中心聚集,这种杯状适用于土壤物的搅拌分散。
[0058]控制杯子底部的出液口尺寸可以控制出液的流量,针对土壤线虫的特定性而言,出液口 11直径设计在2.0cm左右,足可以让线虫流出来。在盛土杯的外底部,设置一导流管12,连接于出液口 11上,出液口 11与导流管12相通,导流管可以是焊接在出液口上,也可以是以密封法兰连接于出液口上。导流管12上横穿一旋塞阀13。由于旋塞阀上有塞孔,所以可以通过控制旋塞阀的旋转角度,来控制塞孔与导流管的开度,开度越大,出液量越大,开度越小,出液量越小。旋塞阀属于常见零件。此类盛土杯结构,是按照分液漏斗原理制作,因此具有分液漏斗的优点。
[0059]搅拌器2
[0060]搅拌器2置于盛土杯里,可以为手动搅拌器,也可以为电动搅拌器。一种手动搅拌器器的实施例是:该手动搅拌器包括手轮21、旋转轴22和搅拌轮23,如图3所示,手轮21连接在旋转轴22的顶部,搅拌轮23连接在旋转轴22的底部,旋转轴22和搅拌轮23伸入到盛土杯里边,搅拌轮到达杯内中下部位置。旋转轴22直径约2cm,高约15cm。搅拌轮23可以是几根搅拌棒呈辐射状环周固定在旋转轴22上(如图2所示);优选地也可以是由几片叶片做成,较佳的是,每片叶片与水平面成一定角度倾斜,较佳约为30?45°,每叶片的形状可选择平面体,也可选择螺旋状曲面体,长、宽、厚度比约为16:10:3,这些在实施例图中没有示出。选择叶片式搅拌轮,可以使搅动接触面积大于搅拌棒;叶片倾斜,或叶片选择螺旋面,都可以减小搅拌阻力,增强搅拌力度。搅拌棒或叶片较佳选择具有一定韧性的橡胶片或塑料片制成。
[0061]为了使搅拌器停留在盛土杯中一定高度,采取的方式是将旋转轴22支撑在一支撑件上,该支撑件可以是一支架,更好的是为一杯盖24。支架和杯盖都支撑在盛土杯杯口上,杯盖则更具有保护盛土杯,免于杯内液体飞溅的作用。旋转轴22支撑在支撑件上的方式可以有两种:一,旋转轴22可以采用变径的方式支撑在支架或杯盖上(如图1和图3所示),在支架或杯盖以上的部分直径大,在支架或杯盖以下的部分直径小在搅拌器置于盛土杯中的同时,支架或杯盖扣于盛土杯杯口,对旋转轴起到支撑的作用,旋转轴卡在支架或杯盖上,而不能落入盛土杯杯底;二,旋转轴22可以采用在旋转轴上露出支撑件的部分横插一根细棍的方式支撑在支架或杯盖上(未给出此实施例图)。旋转轴与支撑件之间为活动穿设关系,旋转轴旋转时支撑件不动,在支撑件上穿设旋转轴的孔处可以设置一轴承。
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