一种中药水蒸气蒸馏液中挥发性物质含量的快速检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药质量控制和检验分析领域，适用于中药水蒸气蒸馈操作的工艺过 程研究和现场检测。
【背景技术】
[0002] 挥发性物质在植物界分布极广，作为中药使用的植物就有数百种可提取挥发油， 尤其在菊科、芸香科、伞形科、姜科等科属中较为常见。绝大多数挥发性物质难溶于水而易 溶于有机溶剂，化学结构上主要包括芳香族化合物、祗締、倍半祗締及其含氧衍生物、脂肪 族化合物等等。大量的药理实验证明，药用植物中挥发性物质的作用相当广泛，包括抗炎、 抗过敏、抗微生物、抗突变和抗癌、驱虫作用、酶抑制作用、对中枢神经系统、呼吸系统W及 平滑肌的作用等。
[0003] 现代生产可供选用的挥发性物质提取方法有水蒸气蒸馈法、溶剂提取法、压棒法 等。由于挥发性物质沸点较低或能与水形成共沸物，而水蒸气易得、无毒，因此水蒸气蒸馈 法在中药制剂生产中最为常用。若药材所含挥发性物质较多，且极性较低，则可在蒸馈液中 W油滴或油膜状析出；若蒸馈液中挥发性物质含量较低，或在水中溶解度较大，则不会出现 明显的两相分离，该种蒸馈液被称为芳香水。多数挥发性物质比重低于水，常温下成油状， 亦称为精油；但也有部分挥发性物质可生成比重大于水的结晶或不定形物，当蒸馈液冷却 或被浓缩时析出。
[0004] 实际生产中水蒸气蒸馈法的装置形式多样，工艺过程也受到多方面因素的影响， 过程控制和终点判断都需要对蒸馈液中挥发性物质的含量进行检测。然而，目前挥发性物 质的测定W《中国药典》所载的蒸馈法最为常用，该方法利用挥发油测定仪器将挥发油成分 蒸馈出来，W体积比表示挥发油含量。该方法虽然简便实用，但也存在取样量大，蒸馈时间 长，定量不准确，易受环境干扰等问题；另有气相色谱法测定结果准确，但检验时间过长，仪 器价格昂贵，均不适于生产现场快速检验的要求。
【发明内容】
[0005] 本发明目的是提供一种中药水蒸气蒸馈液中挥发性物质含量的快速检测方法。
[0006] 本发明利用挥发性物质难溶于水而易溶于有机溶剂的特点，利用萃取剂从中药水 蒸气蒸馈液中萃取所含的挥发性成分。挥发性物质溶于萃取剂，导致萃取剂密度相应变化， 通过准确测定萃取剂密度，即可间接推算蒸馈液中挥发性物质的含量。
[0007] 本发明采用的技术方案是；
[000引一种中药水蒸气蒸馈液中挥发性物质含量的快速检测方法，所述方法包括W下步 骤：
[0009] (1)精密称取不同体积的已纯化的中药挥发性物质样品，加入具塞刻度试管中，力口 入纯水定容至a体积，充分混合，配制成不同体积浓度的标准试样；
[0010] (2)分别向a体积的标准试样中加入b体积的萃取剂，a ;b = 10?100 ;1，所述萃 取剂为与水不互溶的有机溶剂，强力混合或均质处理后，静置或离屯、分层，取有机层，为澄 清的标准试样萃取液，吸取标准试样萃取液测量T温度下萃取液的密度；W标准试样萃取 液的密度为横坐标，W标准试样中的中药挥发性物质的体积浓度为纵坐标，绘制标准曲线， 建立回归方程；
[0011] (3)取a体积的待测中药水蒸气蒸馈液试样，按照步骤（2)的相同条件进行萃取和 测量操作；加入b体积的萃取剂，强力混合或均质处理后，静置或离屯、分层，取有机层，为澄 清的待测试样萃取液，吸取澄清的待测试样萃取液测量T温度下的密度；根据步骤（2)的回 归方程和待测试样萃取液的密度，计算得到待测中药水蒸气蒸馈液试样中中药挥发性物质 的体积浓度。
[0012] 所述步骤（1)中，所述已纯化的中药挥发性物质样品是按照2010版《中国药典》一 部附录XD所载的挥发性物质测定法，将中药水蒸气蒸馈液进行蒸馈富集后、取挥发油层脱 水精制后得到的纯挥发油性物质。该是本领域技术人员公知的中药挥发性物质纯品制备方 法。对于同一种中药，挥发性物质纯品的成分、理化性质都是稳定的，几乎不会发生变化。
[0013] 所述步骤（1)中，配制标准试样时，标准试样中中药挥发性物质的体积浓度范围 一般为0?5%，优选0?0. 2%。
[0014] 所述步骤（2)中，通常采用与水不互溶的有机溶剂作为萃取剂，优选正己烧、石油 離、己酸己醋、二氯甲烧或正了醇，事先应根据待测挥发性物质的性质加W选择，萃取剂的 选择主要考虑待测挥发性物质在水和萃取剂中的分配系数。两相平衡时，待测挥发性物质 在有机相的浓度应至少达到水相浓度的100倍。
[00巧]所述步骤（2)中，a ;b = 10?100 ;1，优选10?15 ;1。
[0016] a体积的取值范围一般为10?4〇111以此范围可根据待测液中实际含挥发性物质的 多少，相应调整待测液体积进行萃取测定。一般待测液中含挥发性物质少时相应取较大体 积，挥发性物质多时，取较小体积的待测液。
[0017] 所述步骤（2)和步骤（3)中，萃取时，为加快两相分离，可向标准试样或待测中药 水蒸气蒸馈液试样中加入饱和食盐水，所述饱和食盐水的体积用量为标准试样或待测中药 水蒸气蒸馈液试样体积的1?20%，优选10%。
[0018] 所述步骤（3)的萃取和测量操作与步骤（2)相同，即步骤（2)、（3)所用的萃取剂 相同，混合方式相同，分层方式相同，步骤（2)采用强力混合，则步骤（3)也采用强力混合 等，步骤（2)中加入饱和食盐水，则步骤（3)也加入相同量的饱和食盐水。该是为了保证萃 取条件的完全一致。
[0019] 步骤（2)和步骤（3)中，测量萃取液密度时，T温度的范围为5?30°C，且步骤（2)、 (3)中的T温度保持相同。
[0020] 测量萃取液密度时，温度控制精度应在±0. rc之间，单次密度测量精度不低于 0.0005g/ml〇
[0021] 所述步骤（2)中，建立回归方程时，通常可W采取线性回归方式，在浓度范围较大 时可采用二次回归，应确保回归系数R2〉0. 9。
[0022] 优选本发明方法为：
[0023] (1)精密称取不同体积的已纯化的中药挥发性物质样品，加入具塞刻度试管中，力口 入纯水定容至40mU充分混合，配制成不同体积浓度的标准试样，所述标准试样为混悬液， 标准试样中中药挥发性物质的体积浓度范围为0?5% ;
[0024] (2)分别向40血的标准试样中加入3ml的萃取剂、4ml饱和食盐水，所述萃取剂为 与水不互溶的有机溶剂，强力混合或均质处理后，静置或离屯、分层，取有机层，为澄清的标 准试样萃取液，吸取标准试样萃取液测量T温度下萃取液的密度；W标准试样萃取液的密 度为横坐标，W标准试样中的中药挥发性物质的体积浓度为纵坐标，绘制标准曲线，建立回 归方程；
[0025] (3)取40mL的待测中药水蒸气蒸馈液试样，按照步骤（2)的相同条件进行萃取和 测量操作；加入3ml的萃取剂、4ml饱和食盐水，强力混合或均质处理后，静置或离屯、分层， 取有机层，为澄清的待测试样萃取液，吸取澄清的待测试样萃取液测量T温度下的密度；根 据步骤（2)的回归方程和待测试样萃取液的密度，计算得到待测中药水蒸气蒸馈液试样中 中药挥发性物质的体积浓度。
[0026] 更进一步，本发明所述的中药挥发性物质为五味子挥发油，待测中药水蒸气蒸馈 液试样为五味子水蒸气蒸馈液样品，本发明方法优选按W下步骤操作：
[0027] (1)精密称取不同体积的已纯化的五味子挥发油，加入具塞刻度试管中，加入纯水 定容至40mU充分混合，配制成不同体积浓度的标准试样，所述标准试样中五味子挥发油的 体积浓度范围为0?0.2% ;
[00測 似分别向40血的标准试样中加入3ml的正己烧、4ml饱和食盐水，强力混合后， 静置分层，取有机层，为澄清的标准试样萃取液，吸取标准试样萃取液测量T温度下萃取液 的密度；W标准试样萃取液的密度为横坐标，W标准试样中五味子挥发油的体积浓度为纵 坐标，绘制标准曲线，建立回归方程；
[0029] (3)取40mL的五味子水蒸气蒸馈液样品，按照步骤（2)的相同条件进行萃取和测 量操作：加入3ml的正己烧、4ml饱和食盐水，强