一种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法
【专利摘要】本发明公开了一种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，该方法包括以下步骤：在酒醅中加入香茅醇和超纯水浸泡60-150min后，超声20-40min，离心得上清液，取上清液于试管中，加入氯化钠直至溶液饱和；再加入有机溶剂，振荡3-5min，静置5-10min后离心，有机相与水相分层，留取有机相即得。本发明具有操作简便快速、有机溶剂用量少、劳动强度小、定量准确等特点，适用于酒醅中挥发性风味物质的定性及定量分析。
【专利说明】一种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于分析检测【技术领域】，具体涉及一种针对固态发酵酒醅挥发性风味物质快速简便提取方法。
【背景技术】
[0002]中国白酒是世界上六大蒸馏酒之一，其采用的固态酒醅发酵和固态蒸馏操作方法。酒醅发酵过程中，各种物质不断地产生与消失，逐渐生成了醇、酸、酯、醛、酮等多种物质成分。酒醅中的挥发性成分直接地构成了白酒的风味物质，从而决定白酒的独特风味和品质。
[0003]目前，对白酒酒醅的微量挥发性成分的研究主要有以下三种方法:a)利用顶空固相微萃取方法分析酒醅中的挥发性化合物的组成和含量，如专利号为201110427384.1、专利名称为“一种快速测定曲或酒醅或发酵醪中氨基甲酸乙酯的方法”所用方法，该技术存在所需设备价格昂贵、操作程序复杂、萃取头等耗材用量大、检测样品成本高等缺点山)采用大量有机溶剂的多次反复萃取、再将有机相收集起来除水、浓缩，然后进样分析，该方法操作复杂、萃取时间长，劳动强度大，所需有机溶剂量大，对实验人员伤害大，因此不适合对大量样品的萃取分析。同时由于步骤繁多，每步操作都会造成挥发性风味物质的损失，进而不能对样品微量物质含量进行定量等后续分析；c)直接利用水或乙醇水浸提后直接进样，如专利申请号为201110147621.9、专利名称为“快速检测糟醅香味成分的方法”所述，虽然该方法简便快速，但是直接用乙醇溶液浸泡后进样对色谱柱损伤大，且提取风味物质成分少(仅分析出16种物质)，再由于没有加入内标，定量效果差。
[0004]因此本领域需要一种新的快速简便的方法来提取、定量及分析酒醅中的微量挥发性物质成分。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种快速简便提取酒醅挥发性风味物质的方法，解决现有技术操作复杂、设备要求高、成本昂贵、检测不稳定或有机溶剂使用量大、劳动强度大、定量不准确等问题。
[0006]本发明是通过以下技术方案实现的:
[0007]—种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，包括以下步骤:
[0008]a)浸泡与超声提取:取5_15g酒醅，加入5-10 μ I香茅醇内标和35_45ml的超纯水，浸泡60-150min后，超声提取20_40min，离心得上清液；
[0009]b)有机溶剂萃取:取上述离心所得上清液15_25ml置于50ml带塞磨口试管中，力口入氯化钠直至溶液饱和；再加入2-6ml有机溶剂，盖上瓶塞，振荡3-5min，静置5_10min后离心，有机相与水相分层，取l_3ml有机相检测备用；
[0010]c)挥发性风味物质测定:物质定性采用NIST08Databas、AMDIS图谱库中标准离子碎片图谱进行比对，要求匹配度大于85% ;定量方法采用半定量方法，将待测物质丰度与内标物质丰度相比，根据内标物质浓度计算各挥发性风味物质成分含量。
[0011]上述步骤a)中，超纯水需煮沸10_20min后冷却使用。
[0012]上述步骤a)、b)中，离心条件为 5000-18000r/min，5-15min。
[0013]优选地，上述离心条件为8000-10000r/min，8-12min。
[0014]上述步骤b)中，有机溶剂为乙醚、戊烷或两者的混合液。
[0015]本发明有益效果如下:
[0016]1、操作快速简便、劳动强度小、溶剂用量少、设备要求低，达到快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的要求，与采用有机溶剂反复萃取的方法相比，简单有效。
[0017]2、本发明操作过程简便，在超纯水超声提取的同时加入香茅醇，与样品一同提取，可以较为准确定量样品中各物质浓度，从而可以真实的反应样品中各挥发性风味物质的含量，同步操作即减少了程序步骤，更使挥发性风味物质成分的损失大大减少。若萃取后加入，则定量的是提取得到溶液中各物质浓度，从而要考察提取率，才能定量样品中各物质浓度。
[0018]3、采用本发明的提取方法，有利于对后续酒醅挥发性风味物质成分的检测，尤其适用于固态酿造酒醅挥发性风味物质成分的定性与定量分析。从检测结果来看，能有效分析出30种物质，大大高于仅采用水或有机溶剂提取的方法，且标准偏差低于12%，说明本方法有效、可行。
【专利附图】
【附图说明】
[0019]图1是运用本发明提取的酒醅挥发性风味物质总离子色谱图。
【具体实施方式】
[0020]下述实例将有助于理解本发明，但不限制本发明的内容。
[0021]本发明实施例中材料和设备的选用说明:
[0022]香茅醇购于美国Sigma公司；NaCl (分析纯)、乙醚(色谱纯)、戊烷(色谱纯)购于上海国药集团。
[0023]气相色谱-质谱联用仪使用美国安捷伦科技有限公司的7890A-5975CGC-MS。
[0024]实施例1
[0025]a)浸泡与超声提取:取IOg酒醅，加入8 μ I香茅醇内标和煮沸15min后冷却的超纯水40ml，浸泡120min后，超声提取30min，然后在10000r/min条件下离心12min，得上清液；
[0026]b)有机溶剂萃取:取上述离心所得上清液20ml，置于50ml带塞磨口试管中，加入氯化钠使溶液达到饱和；再加入5ml乙醚，盖上瓶塞，振荡4min，静置5min后离心，有机相与水相分层，取2ml有机相检测备用；
[0027]c)挥发性风味物质定性与定量:物质定性米用NIST 08Databas (AgilentTechnologieslnc.)、AMDIS图谱库中标准离子碎片图谱比对，要求匹配度大于85% ;出窖酒醅挥发性风味物质总离子色谱图见图1 ;定量方法采用半定量方法，将待测物质丰度与内标物质丰度相比，根据内标物质浓度计算各挥发性风味物质成分含量，见表I。
[0028]为了验证该方法的稳定性，对出窖酒醅进行重复提取(n=5)，结果见表I。从表中可以看出，各物质的相对标准偏差(RSD)均小于8%。
[0029]表1出窖酒醅风味物质的相对含量
[0030]
【权利要求】
1.一种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:包括以下步骤: a)浸泡与超声提取:取5-15g酒醅，加入5-10μ I香茅醇内标和35_45ml的超纯水，浸泡60-150min后，超声提取20_40min，离心得上清液； b)有机溶剂萃取:取上述离心所得上清液15-25ml置于50ml带塞磨口试管中，加入氯化钠直至溶液饱和；再加入2-6ml有机溶剂，盖上瓶塞，振荡3-5min，静置5_10min后离心，有机相与水相分层，取l_3ml有机相检测备用； c)挥发性风味物质测定:物质定性采用NIST08Databas、AMDIS图谱库中标准离子碎片图谱进行比对，要求匹配度大于85% ;定量方法采用半定量方法，将待测物质丰度与内标物质丰度相比，根据内标物质浓度计算各挥发性风味物质成分含量。
2.根据权利要求1所述的快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:所述步骤a)中，超纯水需煮沸10-20min后冷却使用。
3.根据权利要求1所述的快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:所述步骤a)、b)中，离心条件为5000-18000r/min, 5_15min。
4.根据权利要求3所述的快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:所述步骤a)、b)中，离心条件为8000-10000r/min, 8_12min。
5.根据权利要求1所述的快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:所述步骤b)中有机溶剂为乙醚、戊烷或两者的混合液。
【文档编号】G01N30/06GK103852543SQ201410090158
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2014年3月12日 优先权日:2014年3月12日
【发明者】陈良强, 林琳, 杨帆, 王和玉, 汪地强, 王莉 申请人:贵州茅台酒股份有限公司