一种测定四环素尿素复盐母液中尿素含量的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物原料检测技术领域，特别是涉及一种恒流高效液相色谱法测定四环素尿素复盐母液中尿素含量的方法。
【背景技术】
[0002]在盐酸四环素生产过程中，四环素尿素复盐结晶过程是四环素精制过程中一个关键环节，目的是通过四环素与尿素的选择性反应，生成四环素尿素复盐，以除去4-差向四环素、4-差向脱水四环素、脱水四环素等杂质。在四环素尿素复盐结晶母液中含有大量尿素，其含量在30%左右，为了环保及降低单耗，生产中会对尿素进行回收再利用。
[0003]对尿素含量的测定，国标采用凯氏定氮法测定，该法耗时较长，专属性差，四环素等含有氮元素的有机物均被测定。郑丽行在《折光率测定尿素含量的方法研究》一文中采用折光率的方法测定尿素含量，该法干扰因素较多，对测定四环素尿素复盐母液中尿素，会受到干扰，不能准确检测尿素含量。梁新红在《分光光度法测定葡萄酒中尿素含量》一文中，将尿素与显色剂反应后用分光光度法测定，耗时较长。
[0004]本发明采用恒流高效液相色谱法，对盐酸四环素生产过程四环素尿素复盐母液中尿素含量进行快速分析，分析时间不足lOmin，分析中能将尿素原料中带入的杂质缩二脲、亚甲基二脲与尿素进行分离。专属性好，结果准确可靠。
【发明内容】
[0005]本发明的目的就在于建立一种能快速测定四环素尿素复盐母液中尿素含量的方法，
为实现上述发明目的所采取的技术方案为:色谱条件:色谱柱:C18柱；流动相:纯化水；流动相流速为:0.8ml/min?1.0ml/min ;检测波长:205nm?210nm ;样品溶液配制:精密移取四环素尿素复盐母液1.0ml，置200.0ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，用微孔滤膜过滤，取20 μ I注入高效液相色谱仪测定。
[0006]【附图说明】:附图为色谱图。
【具体实施方式】
[0007]I色谱条件:
色谱柱:C18柱；流动相:纯化水；流动相流速为:0.8ml/min?1.0ml/min ;检测波长:205nm ?210nm2溶液制备:
对照溶液:取尿素0.15g，置10ml容量瓶中，加纯化水溶解并稀释至刻度。
[0008]供试品溶液:精密移取四环素尿素复盐母液1.0ml，置200.0ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度。
[0009]3测定:将溶液用微孔滤膜过滤后，取20 μ I注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。
[0010]实施例1、
I色谱条件:
色谱柱=Agilent XDB C18柱；流动相:纯化水；流动相流速为:1.0ml/min ;检测波长:205nm
2溶液配制:
对照溶液:取尿素0.1515g，置10ml容量瓶中，加纯化水溶解并稀释至刻度。
[0011]供试品溶液:精密移取四环素尿素复盐母液1.0ml，置200.0ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度。
[0012]3测定:将溶液用微孔滤膜过滤，取20 μ I注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析
测定结果:尿素含量为32.4%。
[0013]实施例2 I色谱条件:
色谱柱=Agilent XDB C18柱；流动相:纯化水；流动相流速为:0.9ml/min ;检测波长:208nm
2溶液配制:
对照溶液:取尿素0.1495g，置10ml容量瓶中，加纯化水溶解并稀释至刻度。
[0014]供试品溶液:精密移取四环素尿素复盐母液1.0ml,置200.0ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度。
[0015]3测定:将溶液用微孔滤膜过滤，取20 μ I注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析
测定结果:尿素含量为33.7%。
[0016]实施例3 I色谱条件:
色谱柱=Agilent XDB C18柱；流动相:纯化水；流动相流速为:0.8ml/min ;检测波长:21 Onm
2溶液配制:
对照溶液:取尿素0.1526g，置10ml容量瓶中，加纯化水溶解并稀释至刻度。
[0017]供试品溶液:精密移取四环素尿素复盐母液1.0ml，置200.0ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度。
[0018]3测定:将溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析测定结果:尿素含量为31.8%。
【主权项】
1.一种测定四环素尿素复盐母液中尿素含量的方法，其特征在于采用高效液相色谱法。
2.按照权利要求1所述的四环素尿素复盐母液中尿素含量的测定方法，其特征在于上述高效液相色谱法的色谱条件的色谱条件为: 色谱柱:C18柱； 流动相:纯化水； 流动相流速为:0.8ml/min?1.0ml/min ； 检测波长:205nm?210nm。
【专利摘要】本发明涉及一种恒流高效液相色谱法测定四环素尿素复盐母液中尿素含量的方法。该方法采用恒流高效液相色谱仪，对仪器设备要求低。本发明测定四环素尿素复盐母液中尿素含量，方法快速，整个分离过程不足10min，结果准确可靠，专属性强。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104655738
【申请号】CN201310585443
【发明人】邹学锋, 孙瑞君, 郭海燕, 靳艳仿, 张志
【申请人】宁夏启元药业有限公司
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2013年11月21日