一种中枢神经系统脱髓鞘疾病的生物诊断标记物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种生物诊断标记物，具体是一种中枢神经系统脱髓鞘疾病的生物诊 断标记物。
【背景技术】
[0002] 在脱髓鞘疾病中，中枢神经系统脱髓鞘疾病不但存在髓鞘的脱失，也存在轴索的 损伤，就中枢神经系统疾病MS和视神经脊髓炎NMO而言，视神经脊髓炎NMO的病理学损伤 在轴索上更为明显，特别是AQP4蛋白密集区域。在疾病早期，AQP4-Ab、CSF-OCB等免疫指 标为疾病的进展提供了一个很好的参考标准，但是由于随访时间和个体差异等因素，在视 神经炎ON首次发作后，疾病的预后和转归尚不能有较为合适的生物学指标作为参照。
[0003] 视神经炎ON是以视神经炎症、脱髓鞘及神经变性为特征的疾病，是神经眼科最常 见的疾病之一。西方国家报道以特发性脱髓鞘性视神经炎ID0N最为常见，该种类型的视神 经炎ON与中枢神经系统疾病MS关系密切，0NTT研宄小组经过长达15年的研宄发现，成人 患者中有近50%的孤立视神经炎患者最终转化为中枢神经系统疾病MS，其中72%发病时 颅脑MRI阳性，25%发病时颅脑MRI阴性。而在亚洲国家，关于视神经脊髓炎NM0的报道较 多。很长一段时间，对视神经脊髓炎NM0是独立的疾病或中枢神经系统疾病MS亚型一直是 有争议的，近些年的研宄发现血清中水通道蛋白4/AQP4抗体是视神经脊髓炎NM0较为特异 的一项指标，在视神经脊髓炎NM0诊断中有较高的敏感性和特异性。视神经脊髓炎NM0除了 部分原发进展型之外，多由反复发作的特发性脱髓鞘性视神经炎ID0N发展而来。这部分最 终发展为视神经脊髓炎NM0的视神经炎ON患者，在视神经脊髓炎NM0首次发病的过程中， 其临床表现和普通的视神经炎ON极为相似。同时由于这部分视神经炎ON患者血清中水通 道蛋白4/AQP4抗体的阳性率很低，因此并不能依靠水通道蛋白4/AQP4抗体检测预判其疾 病的转归。鉴于此，寻找新特异有效的生物诊断标记物及阻碍疾病髓鞘再生机制显得尤为 重要。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种检测方便、相关性强的中枢神经系统脱髓鞘疾病的生 物诊断标记物，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0005] 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
[0006] 一种中枢神经系统脱髓鞘疾病的生物诊断标记物，该生物诊断标记物为血小板源 性生长因子roGF。
[0007] 与现有技术相比，本发明的有益效果是：
[0008] 本发明通过检测视神经炎ON患者和视神经脊髓炎NM0患者脑脊液中血小板源性 生长因子roGF的水平和变化，比较不同疾病、视神经炎ON不同发病时期、视神经炎ON磁共 振成像扫描MRI表现及视神经炎ON是否复发等脑脊液中血小板源性生长因子TOGF含量的 差异，同时对血小板源性生长因子TOGF含量与白细胞数、IgG含量及蛋白含量等参数进行 相关性分析，得到脑脊液中血小板源性生长因子togf水平较低的患者中枢神经系统脱髓 鞘更为严重，血小板源性生长因子roGF作为视神经炎ON和视神经脊髓炎NMO的生物学标 记物，可以评估其髓鞘再生能力，在视神经炎ON的不同阶段，监测脑脊液中血小板源性生 长因子TOGF的水平可以评估其病情变化，为视神经炎ON和视神经脊髓炎NM0的预后及转 归提供实验依据，并为其治疗提供新的思路。
【附图说明】
[0009] 图1为本发明中各组患者脑脊液中血小板源性生长因子roGF的水平比较示意图。
[0010] 图2为本发明中视神经炎ON不同发病时期脑脊液中血小板源性生长因子roGF的 水平比较示意图。
[0011] 图3为本发明中磁共振成像MRI分组脑脊液中血小板源性生长因子roGF的水平 比较示意图。
【具体实施方式】
[0012] 下面结合【具体实施方式】对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
[0013] 请参阅图1，一种中枢神经系统脱髓鞘疾病的生物诊断标记物，该生物诊断标记物 为血小板源性生长因子roGF。通过检测视神经炎ON和视神经脊髓炎NM0患者脑脊液中血 小板源性生长因子roGF的水平和变化，得到脑脊液中血小板源性生长因子roGF水平较低 的患者中枢神经系统脱髓鞘更为严重，在视神经炎ON的不同阶段，监测脑脊液中血小板源 性生长因子roGF的水平可以评估其病情变化，判断预后情况。
[0014] 所述检测视神经炎ON和视神经脊髓炎NM0患者脑脊液中血小板源性生长因子 roGF的水平和变化的方法如下：
[0015] (1)研宄对象：实验组和对照组的患者年龄均彡16岁，至少有3个月没有激素、免 疫抑制剂或免疫调节剂治疗史，排除感染性视神经炎及其他眼部疾病和全身性疾病。
[0016] 实验组：视神经炎ON患者35人和视神经脊髓炎NM0患者10人，其中视神经炎ON 患者以本次发病后四周为节点，分为视神经炎ON急性期组18人和视神经炎ON平稳期组17 人。
[0017] 对照组：颜内静脉窦血栓形成CVST患者10人。
[0018] (2)临床资料及标本的收集：
[0019] 受试者均接受系统的眼科检查，包括最佳矫正视力、裂隙灯检查、直接及间接检眼 镜检查、Goldmann眼压检测等，入院后行血清学检查和腰椎穿刺术检查，脑脊液除行常规 白细胞计数、生化检测及免疫检测外，留取第三管脑脊液3ml，500 y 1/EP管分装后立即置 于-80°C冰箱中保存。对于颅内静脉窦血栓形成CVST患者还需结合颅脑低场强磁共振脑静 脉窦血管成像MRV或者脑血管造影DSA检查排除其他疾病，对于视神经炎NO患者及视神经 脊髓炎NM0患者还需进行系统的神经内科查体，必要时行眼眶、颅脑、颈胸椎MRI检查、视觉 诱发电位、光学相干断层扫描0CT、视网膜电流图ERG等检查。
[0020] (3)血小板源性生长因子H)GF的检测：
[0021] 采用ELISA方法检测，最后以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度0D 值，根据标准品的浓度及对应的0D值计算出标准曲线的回归方程，R 2> 0. 98,再根据样品 的0D值计算出对应的样品浓度。
[0022] (4)统计分析：
[0023] 采用统计学软件进行统计分析，患者额年龄、脑脊液中白细胞计数、蛋白质含量、 葡萄糖、IgG、IgA、IgM、PDGF水平均为正态分布计量资料，用均数土标准差，x±s表示，比 较不同疾病和不同时期患者脑脊液中血小板源性生长因子TOGF的水平，比较实验组和对 照组的患者脑脊液中血小板源性生长因子TOGF的水平，比较视神经炎ON患者不同发病时 期磁共振成像MRI的阳性率，对血小板源性生长因子TOGF水平与白细胞数、IgG含量及蛋 白质含量进行相关性分析，P < 〇. 05为差异有统计学意义。
[0024] (5)结果：
[0025] A、脑脊液检测结果：视神经炎ON患者组共有35例，其中男10例，占总人数的 28. 57%，女25例，占总人数的71. 43%，男女之比1 : 2. 5,年龄为16-58岁，平均年龄为 33. 97 ± 11. 65岁。视神经脊髓炎NM0患者组共有10例，其中女性8例，占总人数的80. 00 %， 平均年龄为38. 90±13. 69岁，较视神经炎ON患者组年龄大，但差异无统计学意义。脑脊液 检查中白细胞计数神经脊髓炎NM0患者组高于视神经炎ON患者组和颅内静脉窦血栓形成 CVST患者组，P = 0. 005及P = 0. 009。9名视神经脊髓炎NM0患者中，有4名IgG含量高 于正常值，其平均含量为3. 46±1.83mg/dl，高于其他各组，P = 0. 020及P = 0. 039。具体 检测结果见表1所示：
[0026] 表1.患者检测结果
[0027]
【主权项】
1. 一种中枢神经系统脱髓鞘疾病的生物诊断标记物，其特征在于，该生物诊断标记物 为血小板源性生长因子I3DGF。
【专利摘要】本发明公开了一种中枢神经系统脱髓鞘疾病的生物诊断标记物，该生物诊断标记物为血小板源性生长因子PDGF。本发明通过检测视神经炎ON患者和视神经脊髓炎NMO患者脑脊液中血小板源性生长因子PDGF的水平和变化，得到脑脊液中血小板源性生长因子PDGF水平较低的患者中枢神经系统脱髓鞘更为严重，血小板源性生长因子PDGF作为视神经炎ON和视神经脊髓炎NMO的生物学标记物，可以评估其髓鞘再生能力，在视神经炎ON的不同阶段，监测脑脊液中血小板源性生长因子PDGF的水平可以评估其病情变化，为视神经炎ON和视神经脊髓炎NMO的预后及转归提供实验依据，并为其治疗提供新的思路。
【IPC分类】G01N24-00
【公开号】CN104698019
【申请号】CN201510112322
【发明人】陈霆隽, 魏世辉, 李朝辉
【申请人】中国人民解放军总医院
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2015年3月16日