一种氟醚菌酰胺残留量的lc-ms/ms测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方法，更具体地说是采用液 相色谱串联质谱（LC-MS/MS)定性定量测定粮谷、猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉等动物肌肉及制品 等复杂基质的动植物源性食品中残留的氟醚菌酰胺含量的方法，属于农药残留量的测定技 术领域。
【背景技术】
[0002] 双酰胺类杀虫剂是近年来全球热门的杀虫剂产品，可广泛应用于水稻、蔬菜、棉花 等作物的害虫控制，具有低毒、环境安全、高活性等优点，包括氯虫苯甲酰胺、氰虫酰胺、氟 虫双酰胺等品种，氟醚菌酰胺（SYP-9080)是由中化集团下属沈阳化工研宄院研发、中化农 化有限公司经营的新产品，我国首个具有自主知识产权的双酰胺类杀虫剂，已获得国家农 业部的临时登记。
[0003] 氟醚菌酰胺（SYP-9080)属于鱼尼丁受体激活剂类杀虫剂，其通过与害虫体内鱼 尼丁受体结合，打开钙离子通道，使储存在细胞内的钙离子持续释放到肌浆中，钙离子和肌 浆中基质蛋白结合，引起肌肉持续收缩。昆虫体症状表现为抽搐、拒食，最终死亡。氟醚菌 酰胺为低毒、广谱杀虫剂，对鳞翅目害虫均具有很好的活性。防治对象包括稻纵卷叶螟、二 化螟、小菜蛾、甜菜夜蛾、玉米螟、甘蔗螟、小卷蛾、食心虫等。
[0004] 随着氟醚菌酰胺的登记、推广和使用，有关氟醚菌酰胺残留消解动态及最终残留 量等环境行为的研宄势必增加，同时，作为我国主要出口市场的欧盟、日本等国家规定若田 间使用农药没有在该国家登记，没有制定相应的残留限量标准时，出口至其国家的食品农 产品包括畜禽肉等动物源性食品中残留限量均实行0. 〇lmg/L的"一律标准"。
[0005] 迄今为止，未见国内外有关于食品农产品中氟醚菌酰胺残留量检测方法的报道， 使用LC-MS/MS测定食品农产品中农药残留具有快速、简便、灵敏度高等优点，由于粮谷、动 物源性食品等食品农产品基质比较复杂，须建立净化效果良好的样品前处理方法才能满足 检测要求，因此建立简便、快速、准确、耐用、能准确定性和定量分析蔬菜和水果中氟醚菌酰 胺残留量的LC-MS/MS检测方法具有重要意义。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方法，主要用于测 定粮谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中氟醚菌酰胺残留量。
[0007] 为实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/ MS测定方法，包括如下步骤：
[0008] (1)提取 称取粉碎样品于具塞离心管中，加入适量水复苏后，定量加入乙腈或含1 %乙酸的乙 腈溶液均质或振荡超声提取，然后加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋 Imin后离心。
[0009] (2)净化 移取一定体积样品提取液，浓缩至ImL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收 集洗脱液，用乙腈定容，取定容液过膜后，待液相色谱串联质谱（LC-MS/MS)检测；
[0010] ⑶标准工作溶液的配制 将不含氟醚菌酰胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理，得样品提取净化 液，用空白提取净化液配制成至少3个浓度的氟醚菌酰胺系列混合标准工作液；
[0011] ⑷液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS)测定 将步骤（3)中的各浓度梯度的标准工作液进行LC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱 峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤（2)中净化 后的样品液注入LC-MS/MS进行测定，测得样品液中氟醚菌酰胺的色谱峰面积，代入标准曲 线，得到样品液中氟醚菌酰胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中氟 醚菌酰胺残留量。
[0012] 步骤（1)中样品若为粮谷及动物肝脏等含水量较少的样品，提取前须加适量水充 分浸润。
[0013] 步骤（1)中米用乙腈提取时加入氯化钠盐析，米用含1 %乙酸的乙腈溶液提取时 加入乙酸钠盐析。
[0014] 步骤⑵中进行C18/PSA固相萃取净化，乙腈洗脱时，洗脱体积为6~8mL。
[0015] 步骤⑷中液相色谱的流动相为：含5mmol/L乙酸铵的水溶液和乙腈，流速 0. 2-0. 4mL/min，进样量 5 μ L。
[0016] 步骤（4)中液相色谱使用梯度洗脱的方法，梯度洗脱程序为：
【主权项】
1. 一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步 骤： (1) 提取 称取混匀样品于具塞离心管中，加适量水后，加入乙腈或含1 %乙酸的乙腈溶液均质或 振荡超声提取后，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋Imin后离心； (2) 净化 移取一定体积样品提取液，浓缩至ImL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收 集洗脱液，用乙腈定容，取定容液过膜后，待液相色谱串联质谱（LC-MS/MS)检测； (3) 标准工作溶液的配制 将不含氟醚菌酰胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理，得样品提取净化 液，用空白提取净化液配制成至少5个浓度的氟醚菌酰胺系列混合标准工作液； (4) 测定和结果计算 将步骤（3)中的各浓度梯度的标准工作液进行LC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰 面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤（2)中净 化后的样品液注入LC-MS/MS进行测定，测得样品液中氟醚菌酰胺的色谱峰面积，代入基质 标准曲线，得到样品液中氟醚菌酰胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样 品中氟醚菌酰胺残留量。
2. 根据权利要求1所述的一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方法，其特征在于， 步骤（1)中样品若为粮谷及动物肝脏等含水量较少的样品，提取前须加适量水充分浸润。
3. 根据权利要求1所述的一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方法，其特征在于， 步骤⑴中采用乙腈提取时需加入氯化钠盐析，采用含1%乙酸的乙腈溶液提取时需加入 乙酸钠盐析。
4. 根据权利要求1所述的一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方法，其特征在于， 步骤⑵中进行C18/PSA固相萃取净化，乙腈洗脱时，洗脱体积为6~8mL。
5. 根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方 法，其特征在于，步骤（4)中LC-MS/MS的液相色谱分析条件为：填料为C 18的色谱柱，柱温为 30°C;进样体积为5 μ L ;流动相为：含5mmol/L乙酸铵的水溶液和乙腈，梯度洗脱；梯度洗脱 程序为：
质谱条件为：电喷雾质谱检测；电喷雾电压为-3500至-4500V ;雾化气压力为 275. 9kPa ;干燥气和鞘气均为氮气；干燥气温度为300°C ;干燥气流速为5. OL/min ;鞘气温 度为250°C，鞘气流速为11. OL/min，喷嘴电压500V，多反应监测（MRM)负离子扫描模式；氟 醚菌酰胺的母离子为414. 4~415. 4,子离子分别为163. 3~164. 3和178. 4~179. 4。
【专利摘要】本发明公开了一种氟醚菌酰胺残留量的LC-MS/MS测定方法，该方法主要用于测定粮谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中残留的氟醚菌酰胺含量的方法。用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的氟醚菌酰胺，C18/PSA固相萃取柱净化后，液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准曲线，外标法定量。本方法平均回收率为83.1%～89.5%，平均相对标准偏差（RSD）为4.0%～6.3%，检出限低于0.12μg/kg，具有操作简便、快速、去杂效果好、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。能满足0.01mg/kg残留限量的“一律标准”技术要求，为保障我国人民食品安全、对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。
【IPC分类】G01N30-06, G01N30-88
【公开号】CN104730191
【申请号】CN201510109791
【发明人】崔淑华, 李瑞娟, 张晓梅
【申请人】崔淑华
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年3月12日