一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物质量测定方法技术领域，具体为一种用气相色谱仪检测薄荷素油 滴丸质量的方法。
[0002]
【背景技术】
[0003] 薄荷素油滴丸中主要成分为薄荷素油，薄荷素油主要成份为薄荷脑（menthol),还 含有按油精、（一)-薄荷酬和胡薄荷酬等成份，如何在检测薄荷脑同时还检测其它成份的 含量，从而从整体上能够对胆舒滴丸的质量进行控制，保证临床用药的有效性和安全性，是 目前所需要的研究发向。
[0004]目前薄荷素油滴丸中成份含量测定选择W薄荷脑为主要测定指标，从而通过对薄 荷素油滴丸中薄荷脑含量的测定，来有效的控制其质量。薄荷脑，是一种白色条状或柱状结 晶，为单祗类成分，沸点较低，易挥发，难溶于水，易溶于己醇、醋等，制成水溶型制剂存在 一定的困难。
[0005] 薄荷素油挥发油中主要成分为薄荷酬、异薄荷酬、胡薄荷酬、胡椒酬、胡椒締酬、按 油精等。薄荷素油中包含的成分虽然很多，但成分和含量较为固定，因此可采用特征图普法 对其质量进行控制。
[0006] 现在有人运用气相色谱仪来进行原料成份的检测与分析，气相色谱仪是一种多组 份混合物的分离、分析工具，它是W气体为流动相，采用冲洗法的柱色谱技术。当多组份的 分析物质进入到色谱柱时，由于各组分在色谱柱中的气相和固定液液相间的分配系数不 同，因此各组份在色谱柱的运行速度也就不同，经过一定的柱长后，顺序离开色谱柱进入检 测器，经检测后转换为电信号送至数据处理工作站，从而完成了对被测物质的定性定量分 析。
[0007] 但采用气相色谱法建立含量和质量测定方法，标准操作步骤不仅仅是仪器的开 机、关机等简单的确操作步骤。不同原料种类具有不同的关键测定参数，不同的关键测定参 数会得到不同的检测结果。
[0008]目前还没有关于用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的相关报道。因此，是否可 W用气相色谱仪检测薄荷脑含量的同时检测按油精、（一)-薄荷酬和胡薄荷酬等成份？如 何在测定过程中选择适合薄荷脑、按油精、薄荷酬和胡薄荷酬的测定参数，从而从整体上来 控制薄荷素油滴丸质量？并且如何使选取目标峰的分离度、对称性、理论塔板数均能都达 到药典要求的条件？等等。该些问题目前则是未知，需要去探索。
[0009]
【发明内容】
[0010] 为了解决W上技术问题，本发明提供一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的 方法，此方法操作简单，重复性高，稳定性好，检测成本低。
[0011] 解决W上技术问题的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于；包括W下步骤： (1) 制备对照品溶液；取按油精对照品、（一)-薄荷酬对照品、薄荷脑、胡薄荷酬对照 品，称定，分别加己醇制成溶液，即得； 具体为取按油精对照品、（一)-薄荷酬对照品、薄荷脑、胡薄荷酬对照品，称定，分别加 无水己醇制成每1ml含2mg的溶液，即得； (2) 制备供试品溶液： 取N个批次的供试品，分别称定后置不同的量瓶中，加水和无水己醇、过滤后取滤液， 即得； 具体为取N个批次的供试品，分别称定后置不同的量瓶中，加水，超声处理使溶散，加 入无水己醇，超声处理4-5分钟，放冷，加无水己醇至所需刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即 得； (3) 特征峰的确定； 吸取按油精对照品溶液、（一)-薄荷酬对照品溶液、薄荷脑溶液、胡薄荷酬对照品溶 液，分别注入气相色谱仪进行测定，确定峰1为按油精，峰2为（一)-薄荷酬，峰7为薄荷 脑，峰8为胡薄荷酬； (4) 对照图谱的建立： 分别吸取供试品溶液，注入气相色谱仪，进行测定，记录色谱图，采用中药色谱指纹图 谱相似度评价系统对各个供试品色谱图进行合成，根据相对保留时间稳定及各批次样品均 能检出且峰相对较高的原则，选择8个峰作为特征峰，建立胆舒滴丸特征图谱的对照图谱， 与薄荷脑相应的峰为对照峰（S); 其中，相对保留时间规定值为；峰1为0. 37,峰2为0. 73,峰3为0. 78,峰4为0. 87， 峰5为0. 90,峰6为0. 92,峰S为1. 00,峰8为1. 05; (5) 检测时，吸取供试品溶液，注入气相色谱仪，测定，记录色谱图，供试品特征图谱中 呈现8个特征峰，分别计算各特征峰与S峰的相对保留时间，若在规定值的±5%范围之内 则为合格质量的产品。
[0012] 本发明优化方案中，所述气相色谱仪中W聚己二醇20000为固定相的毛细管柱； 分流进样，分流比10-20 ;1 ;柱温为程序升温，初始温度50-115°C，保持4-5分钟，W每分钟 1. 5-4°C的速率升温至200°C，保持2-3分钟；进样口温度230°C;检测器温度230°C;载气流 量l-2ml/min。
[0013] 又优化方案中，所述超声处理中超声功率200W，频率40曲Z。
[0014] 本发明的优化方案中所述毛细管柱柱长为30m，内径为0. 53mm，膜厚度为1ym。
[0015] 所述分流比为10:1。
[0016] 所述载气流量2ml/min。
[0017] 所述柱温为程序升温：初始温度80-115°C，保持4-5分钟，W每分钟3-4°C的速率 升温至200°C，保持3分钟；进样口温度230°C。
[0018] 进一步优化方案中，所述柱温为程序升温：初始温度115°C，保持5分钟，W每分钟 4°C的速率升温至200°C，保持3分钟；进样口温度230°C。
[0019] 所述检测方法中按薄荷脑峰计算，理论板塔数不低于50000。
[0020] 所述N>3。
[0021] 本发明的检测过程中每次吸取供试品溶液量为1y1。
[0022] 为了简化操作流程，全面的控制胆舒滴丸的质量，本发明中建立特征图谱有效的 控制其质量，保证临床用药的有效性和安全性。
[0023] 采用气相色谱法对胆舒滴丸中的挥发油成分进行色谱分离，并建立其特征图普。 其中柱温、载气流速、分流比为关键参数。柱温，载气流速不同出峰时间、目标峰的对称性、 分离度、理论塔板数不同；分流比不同，进入仪器的样品量不同，分流比大，进入仪器的样品 量大，分流比小，进入仪器的样品量小。
[0024] 气相色谱仪要求进行仪器的样品各成分均具有挥发性，在选择溶剂时优先选择具 有挥发性，毒性小的溶剂，经过多种溶剂的对比，最终选择无水己醇作为提取溶剂。
[00巧]本发明中的检测方法的理论板数为157833、分离度位1. 52、重复性为1%和拖尾因 子为1. 03,均达到《中国药典》2010年版一部附录VID高效液相色谱法中的规定。
[0026]
【附图说明】
[0027] 图1为本发明中实施例5的胆舒滴丸色谱峰指认图 图2为本发明中实施例5的9批胆舒滴丸特征图谱 图3为本发明中实施例5的胆舒滴丸对照图谱 图1中；1胡薄荷酬，2薄荷脑，3 (-)-薄荷酬，4按油精 图3中：峰1;按油精，峰2;(-)-薄荷酬，峰7 (S);薄荷脑，峰8;胡薄荷酬，峰3、 4、5、6为相应其它的峰
【具体实施方式】
[0028]W下通过实例对本发明作进一步的说明，其中： 所用实验仪器为Agilent78090B气相色谱仪；色谱柱；HP-INN0WAX毛细管柱 (30*0. 53*1);万分之一天平(赛多利斯BS110S)、KQ- 250B型超声清洗器（昆山超声电子 有限公司）。
[0029] 所用试剂及试药；水为超纯水，无水己醇为分析纯。
[0030] 薄荷脑为中国药品生物制品检定所110728-200506; 胆舒滴丸：四川新绿色药业科技发展股份有限公司，批号为1312001，312002， 1312003,140501，140502,140503,150401，150402,150403。
[00引]实施例1 一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，包括W下步骤： (1)制备对照品溶液；取按油精对照品、（一)-薄荷酬对照品、薄荷脑、胡薄荷酬对照 品，称定，分别加无水己醇制成每1ml含2mg的溶液，即得； 在特征图谱项对照品溶液的制备中，选择了薄荷素油中已知同时中国药品生物制品鉴 定所已有的4种成分(按油精、（一)-薄荷酬、薄荷脑、胡薄荷酬)进行参照定性。能够在整 体上对胆舒滴丸的质量进行控制。
[0032] (2)制备供试品溶液；取本品5丸，精密称定，置50ml量瓶中，加水4ml，超声处理 使溶散，加入无水己醇30ml，超声处理(功率200W，频率40曲z) 5分钟，放冷，加无水己醇至 刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 胆舒滴丸的基质为聚己二醇6000，在水或己醇中易溶，薄荷素油与己醇、氯仿或己離 能任意混合，同时在测定过程当中大量进水样对毛细管柱损伤比较大，因此确定本发明中 胆舒滴丸图谱供试品溶液的制备方法。
[0033] (3)特征峰的确定； 吸取按油精对照品溶液、（一)-薄荷酬对照品溶液、薄荷脑溶液、胡薄荷酬对照品溶 液，分别注入气相色谱仪，进行测定，记录色谱图，确定峰1为按油精，峰2为（一)-薄荷酬， 峰7为薄荷脑，峰8为胡薄荷酬； 气相色谱仪中W聚己二醇20000为固定相的毛细管柱（柱长为30m，内径为0. 53mm，膜 厚度为1ym);柱温为程序升温：初始温度50°C，保持5分钟，W每分钟1. 5°C的速率升温至 200°C，保持3分钟；进样口温度230°C;检测器温度230°C;分流进样，分流比10 ;1 ;载气流 量1. 5ml/min;理论板数按薄荷脑峰计算应不低于50 000; (4) 对照图谱的建立； 分别吸取供试品溶液，注入气相色谱仪，测定峰面积，记录色谱图，采用中药色谱指纹 图谱相似度评价系统对各个供试品色谱图进行合成，根据相对保留时间稳定及各批次样品 均能检出且峰