相对较高的原则，选择8个峰作为特征峰，建立胆舒滴丸特征图谱的对照图 谱，与薄荷脑相应的峰为对照峰（S); 其中，相对保留时间规定值为；峰1为0. 37,峰2为0. 73,峰3为0. 78,峰4为0. 87， 峰5为0. 90,峰6为0. 92,峰S为1. 00,峰8为1. 05; (5) 检测时，吸取供试品溶液，注入气相色谱仪，测定，记录色谱图，供试品特征图谱中 呈现8个特征峰，分别计算各特征峰与S峰的相对保留时间，在规定值的±5%范围之内则 为合格质量的产品。
[0034]实施例2 其它内容如实施例1，其中： 气相色谱仪中W聚己二醇20000为固定相的毛细管柱（柱长为30m，内径为0. 53mm， 膜厚度为1ym);柱温为程序升温：初始温度60°C，保持4分钟，W每分钟3°C的速率升温至 200°C，保持3分钟；进样口温度230°C;检测器温度230°C;分流进样，分流比20 ;1;载气流 量2ml/min;理论板数按薄荷脑峰计算应不低于50000。
[00对 实施例3 其它内容如实施例1，其中： 气相色谱仪中W聚己二醇20000为固定相的毛细管柱（柱长为30m，内径为0. 53mm，膜 厚度为1ym);柱温为程序升温：初始温度80°C，保持4分钟，W每分钟3. 5°C的速率升温至 200°C，保持2分钟；进样口温度230°C;检测器温度230°C;分流进样，分流比15 ;1 ;载气流 量Iml/min;理论板数按薄荷脑峰计算应不低于50000。
[003引 实施例4 其它内容如实施例1，其中气相色谱仪中W聚己二醇20000为固定相的毛细管柱（柱长 为30m，内径为0. 53mm，膜厚度为1ym);柱温为程序升温：初始温度100。保持5分钟，W 每分钟2. 5°C的速率升温至200。保持3分钟进样口温度230°C;检测器温度230°C;分 流进样，分流比12 ;1 ;载气流量2ml/min;理论板数按薄荷脑峰计算应不低于50000。
[0037] 实施例5 其它内容如实施例1，其中气相色谱仪中W聚己二醇20000为固定相的毛细管柱（柱长 为30m，内径为0. 53mm，膜厚度为1ym);柱温为程序升温：初始温度115°C，保持5分钟，W 每分钟4°C的速率升温至200°C，保持3分钟；进样口温度230°C;检测器温度230°C;分流 进样，分流比10 ;1 ;载气流量2ml/min;理论板数按薄荷脑峰计算应不低于50000。
[0038] 特征峰的确定： 采用按油精，（-)-薄荷酬，薄荷脑，胡薄荷酬等对照品进行定位，结果表明；峰1为按油 精，峰2为（一)-薄荷酬，峰7为薄荷脑，峰8为胡薄荷酬。见图1。
[003引对照图谱的建立： 对本品9批样品进行特征图谱的测定，根据相对保留时间稳定及各批次样品均能检出 且峰相对较高的原则，共选择了 8个重复性较好的峰作为特征峰。最终规定；供试品特征 图谱中应呈现8个特征峰，与参照物峰相应的峰为峰S，计算各特征峰与峰S的相对保留时 间，应在规定值的±5%范围之内。相对保留时间规定值为；0. 37 (峰！），0. 73 (峰2)，0. 78 (峰 3)，0.87 (峰 4)，0.90 (峰 5)，0.92 (峰 6)，1.00 (峰S)，1.05 (峰 8)，见表 1; 表1 9批胆舒滴丸相对保留时间
采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）对9批样品(进行合成，建立了胆舒 滴丸特征图谱的对照图谱。见图2、3。
[0040] 试验一：溶液稳定性实验 操作步骤如实施例5,取已制备好的同一批供试品溶液，分别于0,4,8,12,2化测定，检 测70min内的色谱图，对其中的特征峰进行分析，其相对应的色谱峰相对保留时间均小于 0. 3%，特征峰的相对峰面积的RSD均小于2. 0%，结果表明供试品溶液在2化内稳定。见表 2、3。
[0041] 表2稳定性考察一特征峰相对保留时间
试验二：进样精密度实验 操作步骤如实施例5,取胆舒滴丸(批号；1312001)供试品溶液，连续进样6次，每次lyl，W峰1 (按油精)、峰2 ((-)-薄荷酬)、峰8 (胡薄荷酬）作为指标峰，计算同峰S(薄 荷脑）的相对保留时间及相对峰面积，结果相对保留时间及相对峰面积的RSD均小于2. 0%， 表明该方法进样精密度良好。见表4、5: 表4进样精密度考察一特征峰相对保留时间比值
表5进样精密度考察一特征峰相对峰面积比值
试验重复性实验 操作步骤如实施例5,精密称取胆舒滴丸(批号为1312001) 6份，按照拟定方法进行制 备及测定，结果各指标特征峰的相对保留时间及相对峰面积的RSD均小于2. 0%，表明该方 法重复性好。见表6、7。
[0042] 表6重复性考察一特征峰相对保留时间比值
试验四：耐用性实验 操作步骤如实施例5,采用两台仪器岛津GC-14B及Agilent7890B进行检测，结果各特 征峰的相对保留时间均在规定范围内，结果表明本方法对仪器的耐用性良好，结果见表8。
[0043] 表8耐用性实验--特征峰相对保留时间比值
本发明中的检测方法，在现有仪器条件下，简化操作流程，用外标法对薄荷脑等成份进 行测定，结果外表法在最终与用传统方法的内标法检测在检查结果上无差异。本发明中用 气相色谱仪检测胆舒滴丸质量，为全自动进样，进样体积重现性很好，不用内标法也具有很 好的分析精密度，且操作简单，成本低，重复性，稳定性高。
【主权项】
1. 一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在于：包括以下步骤： (1) 制备对照品洛液： 取桉油精对照品、（一）-薄荷酮对照品、薄荷脑、胡薄荷酮对照品，称定，分别加乙醇制 成溶液，即得； (2) 制备供试品溶液： 取N个批次的供试品，分别称定后置不同的量瓶中，加水和无水乙醇、过滤后取滤液， 即得； (3) 特征峰的确定： 吸取桉油精对照品溶液、（一）_薄荷酮对照品溶液、薄荷脑溶液、胡薄荷酮对照品溶 液，分别注入气相色谱仪进行测定，确定峰1为桉油精，峰2为（一）-薄荷酮，峰7为薄荷 脑，峰8为胡薄荷酮； (4) 对照图谱的建立： 分别吸取供试品溶液，注入气相色谱仪，记录色谱图，采用中药色谱指纹图谱相似度评 价系统对各个供试品色谱图进行合成，根据相对保留时间稳定及各批次样品均能检出且峰 相对较高的原则，选择8个峰作为特征峰，建立胆舒滴丸特征图谱的对照图谱，薄荷脑的峰 为对照峰（S); 其中，相对保留时间规定值为：峰1为〇. 37,峰2为0. 73,峰3为0. 78,峰4为0. 87， 峰5为0? 90,峰6为0? 92,峰S为L 00,峰8为L 05 ; (5) 检测时，吸取供试品溶液，注入气相色谱仪，测定，记录色谱图，供试品特征图谱中 呈现8个特征峰，分别计算各特征峰与S峰的相对保留时间，若在规定值的±5%范围之内 则为合格质量的产品。2. 根据权利要求1所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述气相色谱仪中以聚乙二醇20000为固定相的毛细管柱；分流进样，分流比10-20 : 1 ;柱温为程序升温，初始温度50-115 °C，保持4-5分钟，以每分钟1. 5-4 °C的速率升温至 200°C，保持2-3分钟；进样口温度230°C ;检测器温度230°C ;载气流量l_2ml/min。3. 根据权利要求2所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述超声处理中超声功率200W，频率40kHz。4. 根据权利要求2所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述毛细管柱柱长为30m，内径为0. 53mm，膜厚度为I ym。5. 根据权利要求2所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述分流比为10:1。6. 根据权利要求2所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述载气流量2ml/min。7. 根据权利要求2所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述柱温为程序升温：初始温度80-115°C，保持4-5分钟，以每分钟3-4°C的速率升温 至200 °C，保持3分钟；进样口温度230 °C。8. 根据权利要求7所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述柱温为程序升温：初始温度115°C，保持5分钟，以每分钟4°C的速率升温至200°C， 保持3分钟；进样口温度230 °C。9. 根据权利要求1所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征在 于：所述检测方法中按薄荷脑峰计算，理论板塔数不低于50000。10. 根据权利要求1所述的一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，其特征 在于：所述N彡3。
【专利摘要】本发明属于药物质量测定方法技术领域，具体为一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸质量的方法，包括制备参照物溶液、制备供试品溶液、分别吸取参照物溶液和供试品溶液，注入气相色谱仪，测定相对保留时间，特征峰的确定和对照图谱的建立，供试品特征图谱中呈现8个特征峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，若在规定值的±5％范围之内则为合格质量的产品；其中气相色谱仪中以聚乙二醇20000为固定相的毛细管柱；分流比10-20：1；柱温初始温度50-115℃，保持4-5分钟，以每分钟1.5-4℃的速率升温至200℃，保持2-3分钟；进样口温度230℃；检测器温度230℃；载气流量1-2ml/min。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN104950052
【申请号】CN201510395106
【发明人】周厚成, 胡昌江, 周维, 冯健, 李文兵
【申请人】四川新绿色药业科技发展股份有限公司
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月30日