葱、蒜及其制品中有机磷的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种食品中农药残留的测定方法，具体设及一种葱、蒜及其制品中甲 胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐、对硫憐的测定方法。
【背景技术】
[0002] 甲胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐、对硫憐是广谱性杀虫剂和杀蛾剂，广泛应用于蔬 菜、水果中，并且运类农药使用量较大W。但运些药物残留通过食物链，在人体内积累而致 崎、致癌、致突变W。甲拌憐等有机憐类农药中毒事件时有发生，因此，要严格控制有机憐农 药在蔬菜、水果等农作物上的使用量?。我国对国内和进出口的多种蔬菜、水果对运类农药 残留的要求是不得检出。目前检测运类有机憐的方法有气相色谱法W、气相色谱-质谱法 W、液相色谱?、液相色谱-质谱法m。但运些方法在特殊基质的检测中有一定的局限性， 如洋葱等辛辣样品，运类蔬菜在切碎过程中会释放出硫化物，产生特殊气味?W，运些硫化 物与检测中有机憐性质相似，不易除去，在用FTO检测器检测时容易造成假阳性。而单级质 谱灵敏度和选择性不理想，液相色谱-质谱法前处理过程繁琐，成本高，而且污染大。能够 同时检测葱、蒜及其制品中甲胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐、对硫憐五种有机憐药物残留的 气相色谱/串联=重四级杆质谱法的检测方法尚未见报道。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种葱、蒜及其制品中有机憐 的测定方法。
[0004] 为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：
[0005] -种葱、蒜及其制品中有机憐的测定方法，包括W下步骤：
[000引 （1)提取净化：称取葱、蒜及其制品，置于离屯、管中，加入体积比1:1的乙腊：乙酸 乙醋溶液或丙酬：乙酸乙醋溶液，加入PSA，氨丙基粉，化C1和陶瓷均质子，进行离屯、；准确 移取有机相于氮吹管中，氮气吹至近干，加入丙酬+正己烧（30+70,v/v)溶解残渣后，过滤 膜上机测定；
[0007]似检测：净化液用气相色谱/串联S重四级杆质谱法测定。
[000引优选的，所述步骤（1)中PSA、氨丙基粉、化C1的质量比为（0. 2-0. 25) :0. 2:5。
[0009] 优选的，所述葱、蒜及其制品包括鲜葱、蒜样品或脱水葱、蒜。
[0010] 优选的，所述洋葱制品是指冻洋葱片、冻煮洋葱片等。
[0011] 优选的，所述有机憐包括甲胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐或对硫憐。
[0012] 优选的，所述步骤（1)具体为：
[0013] 鲜葱、蒜样品：称取约20. 00g(精确到0.Olg)样品置于100血离屯、管中，准确加入 40.0血乙腊：乙酸乙醋（1+1)溶液，放置于-18°C冷藏30min。取出后加入0. 2评SA，0. 2g 氨丙基粉，5gNaCl和陶瓷均质子，满旋3min后1000化/min离屯、3min;有机相和水相分层 后，准确移取20血有机相于50血氮吹管中，45°C水浴氮气吹至近干，准确加入1. 0血丙酬 +正己烧（3(H70，v/v)溶解残渣后，过0.22um滤膜上机测定；或者
[0014] 脱水葱、蒜：称取约10. 00g(精确到0.Olg)样品置于100血离屯、管中，加入10血 水润湿，再准确加入40.0血丙酬：乙酸乙醋（1+1)，分别加入0.25评SA，0.2g氨丙基粉， SgNaCl，陶瓷均质子满旋2min，于100(K)r/min离屯、3min;取20血有机相于50血氮吹管中， 45°C水浴氮气吹至近干，准确加入1.OmL丙酬+正己烧（30巧0,v/v)溶解残渣后，过0. 22um 滤膜上机测定。
[0015] 优选的，步骤（2)的色谱条件为：
[0016]GC/MS/MS:色谱柱：HP-5MS(30mX0. 25mmi.d.，0. 25ym)弹性石英毛细管柱；载 气：高纯氮气（99. 999% );碰撞气：高纯氮（99. 999% );流速：3. 8ml/min;进样方式：不分 流进样；柱溫：初始70°C(2min)W25°C/min程序升溫至150°C，再W3°C/min程序升溫至 200°C;进样口溫度：300°C;进样量1. 0yL;离子源：EI源；离子源溫度：300°C;辅助加热溫 度：280°C;溶剂延迟：5min;扫描方式：多反应监测模式（MRM)。
[0017] 优选的，所述多反应监测模式的MRM条件如下表：
[0020] 本发明建立了气相色谱/串联S重四级杆质谱法（GC/MS/M巧分析葱、蒜及其制 品中甲胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐、对硫憐的分析方法。葱、蒜及其制品经提取、净化处 理后，采用气相色谱/串联=重四级杆质谱法检测。甲拌憐、甲胺憐、久效憐、倍硫憐、对硫 憐在线性范围内呈现良好的线性关系，线性系数大于0.99。本检测方法的检出限化0D)为 0. 005yg/g 水平六平行的实验结果表明，该化合物的回收率在80. 5~107. 3%之间，相 对偏差巧SD)在0.67~4. 38%之间。本发明采用串联质谱确证。本方法操作简单，灵敏度 高，重现性好，精密度高，几乎无基质干扰，定性定量准确，可广泛应用于葱、蒜或其制品中 甲胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐、对硫憐的残留检测。
[0021] 下面本申请人对实验条件进行筛选及优化：
[002引1色谱条件的优化
[0023]该方法检测组分多，且碎片离子接近，在实验过程中采用不同的碰撞能量进行对 比，同时在分离过程中采用程序升溫有效的改善了峰形，同时运用分段离子扫描的方式提 高了检测的灵敏度。
[0024] 气相色谱/串联S重四级杆质谱分离10化g/血甲胺憐等5种有机憐色谱图如图 1所示。
[00巧]2前处理条件优化
[0026] 通过查阅文献，提取甲胺憐等有机憐残留时可用乙酸乙醋W作为提取溶剂，通过 实验对比乙腊和乙酸乙醋的提取效果，发现用乙腊：乙酸乙醋（1 + 1)作为葱、蒜的提取溶 剂，提取效果好，回收率高，基质干扰小。而脱水葱、蒜提取过程中用丙酬：乙酸乙醋（1 + 1) 效果较好。
[0027] 通过查阅文献U1 123,发现此类物质前处理方法中大多利用微波方法去除杂质，但 微波方法消除干扰时，微波过程中高溫使得甲胺憐、甲拌憐降解从而降低了回收率。作者 对本文方法和微波方法进行对比，采用本方法甲胺憐和甲拌憐回收率分别提高了 6. 4%、 10. 1%。
[0028]在前处理过程中大多采用碳粉和C18、PSA、硫酸儀等物质，通过实验发现，碳粉和C18对上述农药残留有吸附，从而降低了农药残留的回收率，在实验过程中重现性也较差， 所得结果的变异系数大。通过实验发现，加入陶瓷均质子后的回收率提高了 20%左右，RSD 提局到2.0%W下。实验结果见下表1:
[0029] 表1不同前处理过程有机憐农药在葱、蒜样品中的回收率和精密度对比
[0031] 其中，PSA、氨丙基粉、氯化钢的质量比为0. 2:0. 2:5。
[0032] 3葱、蒜及其制品等样品在制样过程中产生大量硫化合物，基质干扰严重，微波过 程中高溫使得有机憐尤其是甲胺憐、甲拌憐降解从而降低了回收率。本申请的前处理方法 前后新鲜洋葱样品气相色谱对比图如图2曰、图化所示。
[0033] 4方法的检出限和线性范围
[0034] 根据空白样品的3倍信噪比确定方法的检出限，10倍信噪比确定方法的定量限。 葱、蒜及其制品中甲胺憐、甲拌憐、对硫憐的检出限为〇.〇〇5ng/g，久效憐和倍硫憐的检出限 为O.OlOng/g。
[003引用丙酬-正己烧（3巧），配制了 0. 050, 0. 10, 0. 20, 0. 50, 1. 0yg/mL的系列甲胺憐 等5种有机憐标准溶液。W目标组分的峰面积y对相应的质量浓度X(yg/mL)，绘制标准曲 线，其线性相关系数大于0. 99,表明甲胺憐等5种有机憐在气相色谱/串联=重四级杆质谱 法检测中具有较好的线性关系。
[003引5回收率和精密度
[0037] 在洋葱样品中添加10, 20, 100 y g/kg(有机憐与洋葱样品的重量之比）S个浓度 的甲胺憐等有机憐标液，按前处理的方法提取、净化、上机，每个浓度做平行实验6次，测得 回收率在87. 9~95. 3%之间，相对偏差在1. 23~2. 64%之间，精密度和准确度均达到农 药残留检测的要求。实验结果见表2:
[0038] 表2甲胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐、对硫憐在洋葱样品中的回收率和精密度
[0039]Table2Recoveriesandprecisionofmethamidophos,thimet,monocrotophos ，psr过thion过ndfenthioninonion
CN105116082A 坑明巧 日/13页
[0042] 6结果与讨论
[0043] 甲胺憐等5种标准溶液10yg/kg加入葱、蒜及其制品的气相色谱S重四级杆质谱 检测所得色谱图分别如图3-7所示。
[0044] 从色谱图中可W看出，洋葱样品采用上述前处理方法处理后基质干扰降低，与传 统微波或加入不同净化物质相比，本方法回收率高，变异系数小，而采用气相色谱/串联= 重四级杆质谱法检测葱、蒜及其制品中甲胺憐等5种有机憐农药残留，因采用MRM模式中最 佳碰撞能量和选择离子，使得该方法选择性好、灵敏度高，降低了检测线，有效的提高了检 测的准确度。
[0045] 实验表明，采用本方法检测葱、蒜及其制品中的甲胺憐、甲拌憐、久效憐、倍硫憐、 对硫憐所得结果准确度和精密度高，检测过程操作简单，分析速度快，检测底线低，可满足 国内外食品中残留药物的定性及定量检测，对葱、蒜及其制品残留监管及安全控制也具有 很好的实用性。
【附图说明】
[0046] 图1为气相色谱/串联S重四级杆质谱法分离l(K)ng/mL有机憐色谱图，其中1.甲 胺憐、2.甲拌憐、3.久效憐、4.倍硫憐、5.对硫憐色谱图；
[0047] 图2a为未经本申请前处理方法前的新鲜洋葱样品气相色谱图；
[0048]图化为经本申请前处理方法后的新鲜洋葱样品气相色谱图；
[0049] 图3是实施例1的分析色谱图；
[0050]