高效液相色谱-电喷雾串联二级质谱 (LC-MS/MS)检测待测样品A多反应监测(MRM)色谱图。分别检测样品A、B各组分相应的峰面 积，由于样品B为空白样品，其峰面积较小，且与杂质峰重叠。由实施例1表4中标准曲线计 算，样品A中各组分含量如表5所述。
[0109]表5
[0112] 实施例3
[0113] 1、待测样品的预处理：
[0114] (1)分别称取lg(精确至O.Olg)原料牛乳(此为空白样品，不含Ξ种待测组分)作为 样品A和样品B，置于lOmL聚丙締离屯、管中。样品A中加入实施例1的50yg/Kg混合标准溶液 (最终定容后浓度），混匀，作为待测样品A。样品B不做任何处理，作为待测样品B。待测样品A 和待测样品B均进行如下处理:再加入0.1%甲酸、lOmL乙腊，旋满震荡Imin，W5000巧m的速 度离屯、5min，移取上清液至25血容量瓶中，再向待测样品中加入0.1%甲酸、10血乙腊，重复 W上提取步骤，合并两次提取液，水定容至25mM上述百分比均为甲酸占乙腊添加量的体积 百分比；
[0115] (2)将步骤(1)所得的两份溶液分别进行下述操作：
[0116] 取Oasis PRiME HLB固相萃取小柱，用8mL的10% (百分比为甲醇占水的体积百分 比）甲醇水溶液进行活化。将步骤（1)中上清液上样到Oasis PRiME化B固相萃取小柱，保持 每秒0.05毫升液体的流速，收集全部流出液，即得预处理后的待测样品A和预处理后的待测 样品B。
[0117] 2、待测样品A、B中阿莫西林、青霉素 G和青霉素 V的检测
[0118] 将预处理后的待测样品A和预处理后的待测样品B分别进行下述操作：
[0119] (1)将预处理后的待测样品在25°C下用氮气吹干，lmL的20% (百分比为甲醇占水 的体积百分比）甲醇水溶液溶解，经0.45WI1的有机微孔滤膜过滤，得进料样品；
[0120] (2)将步骤（1)所得进料样品，进行高效液相色谱-电喷雾串联二级质谱化C-MS/ MS)检测，即可。
[0121 ]高效液相色谱法检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[0122] 质谱检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[0123] 3、检测结果
[0124] 分别检测样品A、B各组分相应的峰面积，由于样品B为空白样品，其峰面积较小，且 与杂质峰重叠。由实施例1表4中标准曲线计算，样品A中各组分含量如表6所述。
[01巧]表6
[0126]
[0127] 实施例4
[012引待测样品的预处理：
[0129] (1)分别称取2g(精确至O.Olg)高巧牛奶(市售产品，此为空白样品，不含Ξ种待测 组分)作为样品A和样品B，置于50mL聚丙締离屯、管中。样品A中加入实施例1的10yg/Kg混合 标准溶液(最终定容后浓度），混匀，作为待测样品A。样品B不做任何处理，作为待测样品B。 待测样品A和待测样品B均进行如下处理：加入2 %甲酸、乙腊1 OmL，旋满震汤3min，W 1000化pm的速度离屯、30min，移取上清液至25mL容量瓶中；再向待测样品中加入2%甲酸、乙 腊lOmL，重复W上提取步骤，合并两次提取液，水定容至25ιΛ;上述百分比均为甲酸占乙腊 添加量的体积百分比；
[0130] (2)将步骤(1)所得的两份溶液分别进行下述操作：
[0131] 取Oasis PRiME HLB固相萃取小柱，用4mL的60%(百分比为乙腊占水的体积百分 比）乙腊水溶液进行活化。；将步骤（1)中所得溶液上样到Oasis PRiME HLB固相萃取小柱， 保持流速为〇.3mL/s，收集全部流出液，即得预处理后的待测样品A和预处理后的待测样品 B。
[0132] 2、待测样品A、B中阿莫西林、青霉素 G和青霉素 V的检测
[0133] 将预处理后的待测样品A和预处理后的待测样品B分别进行下述操作：
[0134] (1)将预处理后的待测样品在50°C下用氮气吹干，用ImL水溶解，经0.45μπι的有机 微孔滤膜过滤，得进料样品；
[0135] (2)将步骤(1)所得进料样品进行高效液相色谱-电喷雾串联二级质谱化C-MS/MS) 检测，即可。
[0136] 高效液相色谱法检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[0137] 质谱检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[013引 3、检测结果
[0139] 分别检测样品Α、Β各组分相应的峰面积，由于样品Β为空白样品，其峰面积较小，且 与杂质峰重叠。由实施例1表4中标准曲线计算，样品A中各组分含量如表7所述。
[0140] 表7
[0141]
[0142]
[0143] 实施例5
[0144] 1、待测样品的预处理
[0145] (1)分别称取lg(精确至O.Olg)低乳糖牛奶(市售产品，此为空白样品，不含Ξ种待 测组分)作为样品A和样品B，置于lOmL聚丙締离屯、管中。样品A中加入实施例1的50yg/Kg混 合标准溶液(最终定容后浓度），混匀，作为待测样品A。样品B不做任何处理，作为待测样品 B。待测样品A和待测样品B均进行如下处理：加入1 %乙酸、lOmL乙腊，旋满震荡lOmin，W 1500化pm的速度离屯、5min，移取上清液至25mL容量瓶中；再向待测样品中加入1 %乙酸、乙 腊lOmL，重复W上提取步骤，合并两次提取液，乙腊定容至25ιΛ;上述百分比均为乙酸占乙 腊添加量的体积百分比；
[0146] (2)将步骤(1)所得的两份溶液分别进行下述操作：
[0147] 取Oasis PRiME HLB固相萃取小柱，用5mL的80% (百分比为乙腊占水的体积百分 比）乙腊水溶液进行活化;将步骤（1)中所得溶液上样到Oasis P化ME化B固相萃取小柱，保 持流速为〇.2mL/s，收集全部流出液，即得预处理后的待测样品A和预处理后的待测样品B。
[0148] 2、待测样品A、B中阿莫西林、青霉素 G和青霉素 V的检测
[0149] 将预处理后的待测样品A和预处理后的待测样品B分别进行下述操作：
[0150] (1)将预处理后的待测样品在30°C下用氮气吹干，lmL的10% (百分比为甲醇占水 的体积百分比）甲醇水溶液，经0.22WI1的有机微孔滤膜过滤，得进料样品；
[0151 ] (2)将步骤（1)所得进料样品，进行高效液相色谱-电喷雾串联二级质谱化C-MS/ MS)检测，即可。
[0152] 高效液相色谱法检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[0153] 质谱检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[0154] 3、检测结果
[0155] 分别检测样品A、B各组分相应的峰面积，由于样品B为空白样品，其峰面积较小，且 与杂质峰重叠。由实施例1表4中标准曲线计算，样品A中各组分含量如表8所述。
[0156] 表8
[0157]
[015引实施例6
[0159] 1、待测样品的预处理
[0160] (1)分别称取2g(精确至O.Olg)高铁牛奶(此为空白样品，不含Ξ种待测组分)作为 样品A和样品B，置于50mL聚丙締离屯、管中。样品A中加入实施例1的5化g/Kg混合标准溶液 (最终定容后浓度），混匀，作为待测样品A。样品B不做任何处理，作为待测样品B。待测样品A 和待测样品B均进行如下处理:加入1 %乙酸、乙腊20血，旋满震荡lOmin，W1500化pm的速度 离屯、5min，移取上清液至50mL容量瓶中；再向待测样品中加入1 %乙酸、乙腊lOmL，，重复W 上提取步骤，合并两次提取液，乙腊定容至50mM上述百分比均为乙酸占乙腊添加量的体积 百分比
[0161] (2)将步骤(1)所得的两份溶液分别进行下述操作：
[0162] 取Oasis PRiME HLB固相萃取小柱，用lOmL的5% (百分比为乙腊占水的体积百分 比）乙腊水溶液进行活化;将步骤（1)中所得溶液上样到Oasis P化ME化B固相萃取小柱，保 持流速为〇.2mL/s，收集全部流出液，即得预处理后的待测样品A和预处理后的待测样品B。
[0163] 2、待测样品A、B中阿莫西林、青霉素 G和青霉素 V的检测
[0164] 将预处理后的待测样品A和预处理后的待测样品B分别进行下述操作：
[0165] (1)将预处理后的待测样品在35°C氮气吹干，ImL的6% (百分比为甲醇占水的体积 百分比）甲醇水溶液溶解，经0.22WI1的有机微孔滤膜过滤，得进料样品；
[0166] (2)将步骤(1)中所得进料样品，进行高效液相色谱-电喷雾串联二级质谱化C-MS/ MS)检测，即可。
[0167] 高效液相色谱法检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[0168] 质谱检测的方法和条件具体与实施例1中相同。
[0169] 3、检测结果
[0170] 分别检测样品A、B各组分相应的峰面积，由于样品B为空白样品，其峰面积较小，且 与杂质峰重叠。由实施例1表4中标准曲线计算，样品A中各组分含量如