血液分析装置及血液分析方法
【专利说明】
[00011 本申请是申请号为201280020274.6、申请日为2012年3月30日、名称为"血液分析 装置及血液分析方法"的由同一申请人提交的中国发明专利申请的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明涉及一种光学测定血液样本并对血液样本中所含有的血细胞进行分类的 血液分析装置及血液分析方法、以及让计算机对血液进行分析的计算机程序。
【背景技术】
[0003] 正常末梢血液中存在淋巴细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒 细胞这五种白细胞，多数血细胞计数装置都具有将血液样本中的白细胞分为上述五类的功 能。另一方面，在病毒感染症或造血器官肿瘤等疾病中会出现正常末梢血中不存在的细胞。 末梢血液中出现的异常白细胞中包括异常单个核细胞，关于异常单个核细胞，比如在慢性 淋巴性白血病和恶性淋巴瘤等疾病中，末梢血液中会出现肿瘤性成熟淋巴细胞，8卩"异常淋 巴细胞(abnormal lymphocyte)"。而在急性白血病中，末梢血液中出现的异常单个核细胞 是未成熟的白细胞，即"未成熟细胞（blast)(成髓细胞：myeloblast，成淋巴细胞： lymphoblast)"。此外，在病毒感染或药物过敏等情况下，末梢血液中会出现的异常单个核 细胞是因抗原刺激而活化的淋巴细胞，即"异型淋巴细胞(atypical lymphocyte)"。从末梢 血中将异常淋巴细胞与异型淋巴细胞和未成熟细胞(blast)区分并检测出来，这样的做法 对于末梢血液中会出现异常淋巴细胞的慢性淋巴性白血病这一疾病的筛查或诊断来说是 极为有用的。
[0004] 专利文献1及专利文献2记载，用将白细胞分为五类或四类的试剂将含有异常淋巴 细胞的异常白细胞与正常白细胞区分开并检测出来。具体而言，文献中记述，用含阳离子表 面活性剂和非离子表面活性剂的溶血剂以及包含染色核酸的荧光色素的染色液作为分类 白细胞的试剂，使异常白细胞与正常白细胞之间产生荧光强度和散射光强度差，根据这些 差异将异常白细胞与正常白细胞区分开并检测出来。
[0005] 专利文献3中公开了一种用一定试剂将成髓细胞与成熟白细胞及幼稚粒细胞区分 开并检测出来的方法(参照图1、2、5)。具体而言，此文献中公布，用包含非离子表面活性剂 和增溶剂的溶血剂以及含染色核酸的荧光色素的染色液作为上述试剂，使成髓细胞、成熟 白细胞及幼稚粒细胞之间产生荧光强度和散射光强度差，根据这些差异将成髓细胞与成熟 白细胞和幼稚粒细胞区分并检测出来。
[0006] 专利文献4公开了一种用一定试剂将成淋巴细胞和成髓细胞与成熟白细胞和幼稚 粒细胞区分开并检测出来的方法(参照图13A、13B)。具体而言，此文献中公布，用包含非离 子表面活性剂和增溶剂的溶血剂以及含染色核酸的荧光色素的染色液作为上述试剂，并将 成淋巴细胞和成髓细胞与成熟白细胞和幼稚粒细胞区分开并检测出来。
[0007] 先行技术文献 专利文献 专利文献1:美国专利申请公报第2009/0023129号说明书 专利文献2:美国专利申请公报第2010/0151509号说明书 专利文献3:日本专利公开公报(特开)2007-263894号 专利文献4:日本专利公开公报(特开)2010-237147号。
【发明内容】
[0008] 发明要解决的课题 然而，在上述专利文献1所公开的方法中，在侧向荧光强度和侧向散射光强度的散点图 中异常淋巴细胞与未成熟细胞(blast)出现在同一区域，无法区分两者（参照图2)。而且专 利文献1没有任何关于异型淋巴细胞的出现的内容。
[0009] 专利文献2公开了在侧向荧光强度和侧向散射光强度的散点图中的异常淋巴细胞 的出现区域(参照图4和图7)，但关于未成熟细胞(blast)和异型淋巴细胞的出现则没有任 何记述。且专利文献2中记述的试剂的特征与专利文献1记述的试剂的特征类似，专利文献2 所示散点图中的异常淋巴细胞的出现区域的位置与专利文献1所示散点图中的异常淋巴细 胞和未成熟细胞(blast)的出现区域相同，因此可以推断出在专利文献2中，上述异常淋巴 细胞的出现区域也会出现未成熟细胞(blast)，无法区分两者。
[0010] 专利文献3和专利文献4中并未公开将异常淋巴细胞与其他血细胞区分开并检测 出来。
[0011] 有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种能够将异常淋巴细胞与未成熟细胞 (blast)和异型淋巴细胞区分开并检测出来的血液分析装置、血液分析方法及计算机程序。
[0012] 解决课题的手段 为解决上述课题，本发明一种方式中的血液分析装置具有:试样制备部件，该试样制备 部件将实际上不含阳离子表面活性剂且含非离子表面活性剂的溶血剂、血液样本和用于染 色核酸的荧光色素混合起来制备测定试样;光源，该光源用光照射所述试样制备部件制备 的测定试样;受光部件，该受光部件接受所述光源光照所述测定试样时所述测定试样中的 细胞产生的荧光和散射光，并输出所接受的荧光的相关荧光信号和所接受的散射光的相关 散射光信号;细胞分析部件，该细胞分析部件根据所述受光部件输出的荧光信号和散射光 信号，将显示出一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞作为异常淋巴细胞检测出来;输 出部件，该输出部件根据所述细胞分析部件的检测结果进行输出。
[0013] 在此方式中可以如下设置:所述细胞分析部件将显示所述一定范围的荧光强度和 散射光强度的细胞与未成熟细胞(blast)和异型淋巴细胞区分开，并将其作为异常淋巴细 胞检测出来。
[0014] 在此方式中可以如下设置:所述受光部件接受光照所述测定试样时所述测定试样 中的细胞产生的前向散射光和侧向散射光，并输出包括所接受的前向散射光的相关前向散 射光信号和所接受的侧向散射光的相关侧向散射光信号在内的所述散射光信号，所述细胞 分析部件根据所述荧光信号和所述前向散射光信号与所述侧向散射光信号中的至少其中 之一检测出显示一定范围的荧光强度及散射光强度的细胞，并将其作为异常淋巴细胞。
[0015] 在上述方式中可以如下设置:所述受光部件接受光照所述测定试样时所述测定试 样中的细胞产生的前向散射光和侧向散射光，并输出包括所接受的前向散射光的相关前向 散射光信号和所接受的侧向散射光的相关侧向散射光信号的所述散射光信号，所述细胞分 析部件根据选自所述前向散射光信号、所述侧向散射光信号和所述荧光信号中的至少两种 信号将未成熟细胞(blast)与异常淋巴细胞和异型淋巴细胞区分开并检测出来。
[0016] 在上述方式中可以如下设置:所述细胞分析部件根据所述前向散射光信号和所述 侧向散射光信号将显示一定范围的前向散射光强度和侧向散射光强度的细胞与异常淋巴 细胞和异型淋巴细胞区分开，并将其作为未成熟细胞(blast)检测出来。
[0017] 在上述方式中可以如下设置:所述试样制备部件将实际上不含阳离子表面活性剂 但含非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂的所述溶血剂、血液样本和所述荧光色素加以 混合来制备测定试样。
[0018] 在上述方式中可以如下设置:所述试样制备部件混合有核红细胞测定用的第二溶 血剂、血液样本和有核红细胞测定用的第二荧光色素，以此制备第二测定试样，所述受光部 件接受所述光源光照所述第二测定试样时所述第二测定试样中的细胞产生的荧光和散射 光，并输出所接受的荧光的相关第二荧光信号和所接受的散射光的相关第二散射光信号， 所述细胞分析部件根据所述受光部件输出的第二荧光信号和第二散射光信号，进行用于检 测出所述第二测定试样中的有核红细胞的检测处理，并在该检测处理的结果满足一定条件 时将显示所述一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞作为异常淋巴细胞检测出来。
[0019] 本发明的另一方式中的血液分析装置具有:试样制备部件，该试样制备部件用血 液样本和第一试剂制备第一测定试样，用血液样本和第二试剂制备第二测定试样;光源，该 光源光照所述试样制备部件制备的所述第一测定试样和所述第二测定试样;受光部件，该 受光部件接受所述光源光照所述第一测定试样时所述第一测定试样中的细胞产生的荧光 和散射光，并输出所接受的荧光的相关第一荧光信号和所接受的散射光的相关第一散射光 信号，接受所述光源光照所述第二测定试样时所述第二测定试样中的细胞产生的荧光和散 射光，并输出所接受的荧光的相关第二荧光信号和所接受的散射光的相关第二散射光信 号;细胞分析部件，该细胞分析部件根据所述第二荧光信号和所述第二散射光信号进行用 于检测出所述第二测定试样中的有核红细胞的检测处理，当该检测处理的结果满足一定条 件时，根据所述第一荧光信号和所述第一散射光信号检测出显示一定范围的荧光强度和散 射光强度的细胞，并将其作为异常淋巴细胞;输出部件，该输出部件根据所述细胞分析部件 的检测结果进行输出。
[0020] 在上述方式中可以如下设置:所述细胞分析部件进行的上述检测处理如下：根据 所述第二荧光信号和所述第二散射光信号进行获取显示第二一定范围的荧光强度和散射 光强度的细胞个数的数值的获取处理，当获取的数值未超过一定阈值时，检测出显示所述 一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞并将其作为异常淋巴细胞。
[0021] 本发明一种方式中的血液分析方法具有以下步骤:将实际上不含阳离子表面活性 剂但含非离子表面活性剂的溶血剂、血液样本和用于染色核酸的荧光色素加以混合来制备 测定试样的步骤;光照所制备的测定试样的步骤;接受光照所述测定试样时所述测定试样 中的细胞产生的荧光和散射光，获取所接受的荧光的相关荧光信号和所接受的散射光的相 关散射光信号的步骤;根据所述荧光信号和所述散射光信号将显示一定范围的荧光强度和 散射光强度的细胞作为异常淋巴细胞检测出来的步骤;根据检测结果进行输出的步骤。
[0022] 在此方式中可以如下设置:在检测所述异常淋巴细胞的步骤中将显示所述一定范 围的荧光强度和散射光强度的细胞与未成熟细胞(blast)和异型淋巴细胞区别开并将其作 为异常淋巴细胞检测出来。
[0023] 在此方式中可以如下设置:在获取所述荧光信号和所述散射光信号的步骤中，接 受光照所述测定试样时所述测定试样中的细胞产生的荧光、前向散射光和侧向散射光，获 取所接受的荧光的相关荧光信号、以及包含所接受的前向散射光的相关前向散射光信号和 所接受的侧向散射光的相关侧向散射光信号的所述散射光信号，在检测所述异常淋巴细胞 的步骤中，根据所述荧光信号及所述前向散射光信号与所述侧向散射光信号中的至少其中 之一检测出显示一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞，并将其作为异常淋巴细胞。
[0024] 在上述方式中可以如下设置:在获取所述荧光信号和所述散射光信号的步骤中， 接受光照所述测定试样时所述测定试样中的细胞产生的荧光、前向散射光和侧向散射光， 获取所接受的荧光的相关所述荧光信号、以及包含所接受的前向散射光的相关前向散射光 信号和所接受的侧向散射光的相关侧向散射光信号的所述散射光信号，所述血液分析方法 还包括根据选自所述前向散射光信号、所述侧向散射光信号和所述荧光信号中的至少两种 信号将未成熟细胞(blast)与异常淋巴细胞和异型淋巴细胞区分开并检测出来的步骤。
[0025] 在上述方式中可以如下设置:在检测所述未成熟细胞(blast)的步骤中，根据所述 前向散射光信号和所述侧向散射光信号，将显示一定范围的前向散射光强度和侧向散射光 强度的细胞与异常淋巴细胞和异型淋巴细胞区分开，并将其作为未成熟细胞(blast)检测 出来。
[0026] 在上述方式中可以如下设置:在制备所述测定试样的步骤中，将实际上不含阳离 子表面活性剂但含非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂的所述溶血剂、血液样本和所述 荧光色素加以混合来制备测定试样。
[0027]本发明的其他方式中的血液分析方法具有以下步骤:用血液样本和第一试剂制备 第一测定试样的步骤;光照所制备的所述第一测定试样的步骤;接受光照所述第一测定试 样时所述第一测定试样中的细胞产生的荧光和散射光，获取所接受的荧光的相关第一荧光 信号和所接受的散射光的相关第一散射光信号的步骤;用血液样本和第二试剂制备第二测 定试样的步骤;光照制备的所述第二测定试样的步骤;接受光照所述第二测定试样时所述 第二测定试样中的细胞产生的荧光和散射光，获取所接受的荧光的相关第二荧光信号和所 接受的散射光的相关第二散射光信号的步骤;根据所述第二荧光信号和所述第二散射光信 号，进行用于检测出所述第二测定试样中的有核红细胞的检测处理，判断该检测处理的结 果是否满足一定条件的步骤；当所述检测处理的结果满足所述一定条件时，根据所述第一 荧光信号和所述第一散射光信号，检测出显示一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞， 并将其作为异常淋巴细胞的步骤;根据检测结果进行输出的步骤。
[0028]本发明一种方式中的计算机程序是一种让具有通信部件和输出部件的计算机对 血液样本进行分析的计算机程序，它使所述计算机执行以下步骤:将实际上不含阳离子表 面活性剂但含非离子表面活性剂的溶血剂、血液样本和用于染色核酸的荧光色素加以混合 所制备的测定试样在被光照时，所述测定试样中的细胞产生的荧光和散射光的相关荧光信 号和散射光信号被所述通信部件接受的步骤;根据所述荧光信号和所述散射光信号，检测 出显示一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞，并将其作为异常淋巴细胞的步骤;让所 述输出部件输出基于检测结果的信息的步骤。
[0029] 在此方式中可以如下设置:在检测所述异常淋巴细胞的步骤中，让所述计算机将 显示所述一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞与未成熟细胞(blast)和异型淋巴细胞 区分开，并将其作为异常淋巴细胞检测出来。
[0030] 本发明的其他方式中的计算机程序是一种让具有通信部件和输出部件的计算机 对血液样本进行分析的计算机程序，它使所述计算机执行以下步骤:光照由血液样本和第 一试剂制备的第一测定试样时所述第一测定试样中的细胞产生的荧光和散射光的相关第 一荧光信号和第一散射光信号、光照由血液样本和第二试剂制备的第二测定试样时所述第 二测定试样中的细胞产生的荧光和散射光的相关第二荧光信号和第二散射光信号被所述 通信部件接受的步骤;根据所述第二荧光信号和所述第二散射光信号，进行用于检测出所 述第二测定试样中的有核红细胞的检测处理，判断该检测处理的结果是否满足一定条件的 步骤；当所述检测处理的结果满足所述一定条件时，根据所述第一荧光信号和所述第一散 射光信号，检测出显示一定范围的荧光强度和散射光强度的细胞，并将其作为异常淋巴细 胞的步骤;让所述输出部件输出基于检测结果的信息的步骤。
[0031] 发明效果 采用本发明的血液分析装置、血液分析方法及计算机程