l、2、5、10、20、50yg/L基质标准工 作溶液。
[0031 ] (3)气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)测定将不同浓度梯度的标准工作液分别注入 GC-MS/MS，W外标法进行娃嚷菌胺含量的定量分析，即W标准工作液的色谱峰面积对其相 应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线;在相同条件下将样品提取液注入GC-MS/MS进行 测定，测得样品液中娃嚷菌胺的色谱峰面积，代入标准工作曲线，得到样品液中娃嚷菌胺含 量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中娃嚷菌胺残留量。
[0032] 其中色谱条件为：
[0033] 色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25皿。
[0034] 进样口溫度:250. (TC，进样模式:不分流进样，进样量:化L。
[00巧]载气:化，恒流模式，流速1.2mL/min。
[0036] 炉箱升溫程序:初溫60°C保持2min，W每分钟20°C的速度升至200°C，然后W每分 钟2°C的速度升至220°C，再W每分钟20°C的速度升至280°C，保持IOmin;
[0037] 传输线溫度:290°C。
[0038] 其中，质谱参数为：
[0039] 电离模式:电子轰击电离，目陳模式，能量70eV。
[0040] 离子源溫度:280°C。
[0041] 碰撞气:氣气。
[0042] 扫描方式:多反应监测(SM)扫描模式。
[0043] MRM检测参数见表1。 表1:实施例1的MRM检测参数
*为定量离子对。
[0044] 定性鉴定:在相同的条件下，如果样液中农药色谱峰保留时间与标准溶液中相应 农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且离子 丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在运种农药;若上述两个条件 不能同时满足，则判断不含该种农药。
[0045] W标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线如表 2。 亲2苹果巧白某质中巧睫荫胺的标准T化曲线
[0047] 在不含娃嚷菌胺的苹果中加入10、20和20化g/kg3个浓度水平的娃嚷菌胺标准溶 液，待农药添加30min后按上述处理步骤进行残留量测定，200yg/kg添加浓度的样品待测液 用体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂稀释5倍后再用GC-MS/MS测定。将测定浓度与农药 理论添加浓度进行比较，得到农药添加回收率，每个添加水平平行测定6次，得其相对标准 偏差，测定结果见表3。由表3可W看出，在3个加标水平上，娃嚷菌胺的平均回收率为85.3% ~90.8 %，平均相对标准偏差(RSD)为5.1 %~6.5 %，说明本发明方法的回收率较高，重复 性好。
[004引表3娃嚷菌胺的回收率和重复性(n = 6)
[0049] 检出限；
[0050] 将不同浓度的娃嚷菌胺基质标准工作溶液注入GC-MS/MS，W最低浓度基质标准溶 液色谱峰的3倍信噪比和样品处理过程的浓缩倍数(苹果的浓缩倍数为0.5倍)计算检出限， 娃嚷菌胺的检出限为0.01化g/kg。
[0051] 实施例2:黄瓜中娃嚷菌胺残留量的检测
[0化2] (1)样品前处理称取经充分混匀的黄瓜10 . Og于50mL离屯、管中，准确加入20mL含 1 %乙酸的乙腊溶液，均质提取Imin,加入3g无水硫酸儀、2g乙酸钢和2mL7jC，满旋Imin后， TOOOr/min离屯、5min。离屯、后，取6mL乙腊提取液转移至装有900mg无水硫酸儀、300mg Cis和 15〇11^?54的离屯、管中，满旋1111；[]1，500〇1'/111；[]1离屯、5111；[]1。取1111]^上清液于氮吹管中，于40°[氮 气吹干，加入体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂溶解残渣，满旋后混匀后，移入进样瓶中 待GC-MS/MS测定。
[0053] (2)标准工作溶液的配制 将lOOOiig/mL标准中间液溶液用体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂稀释成lOiig/mL 标准中间液。将不含娃嚷菌胺的黄瓜空白样品按上述前处理步骤处理，取8mL空白提取净化 液，浓缩至干后，加入SmL体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂满旋溶解，用该溶剂最终配 制成1、2、5、10、20、50yg/L基质标准工作溶液。
[0054] (3)气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)测定操作步骤、色谱和质谱条件与上述苹果 样品中娃嚷菌胺的测定一致。
[0化日]定性鉴定：
[0056]同上述苹果样品中娃嚷菌胺的测定一致。
[0化7]线性关系：
[0058] W标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线为Y =31058X-13324，相关系数为0.9996。
[0059] 加标回收率和重复性：
[0060] 在不含娃嚷菌胺的黄瓜中加入10、20和20化g/kg 3个浓度水平的娃嚷菌胺标准溶 液，待农药添加30min后按上述处理步骤进行残留量测定，200yg/kg添加浓度的样品待测液 用体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂稀释5倍后再用GC-MS/MS测定。将测定浓度与农药 理论添加浓度进行比较，得到农药添加回收率，每个添加水平平行测定6次，得其相对标准 偏差，测定结果见表4。由表4可W看出，在3个加标水平上，娃嚷菌胺的平均回收率为83.0% ~88.7 %，平均相对标准偏差(RSD)为5.6 %~7.5 %，说明本发明方法的回收率高，重复性 好。
[0061] 表4娃嚷菌胺的回收率和重复性(n = 6)
[0062] 检出限；
[0063] 将不同浓度的娃嚷菌胺基质标准工作溶液注入GC-MS/MS，W最低浓度基质标准溶 液色谱峰的3倍信噪比和样品处理过程的浓缩倍数(黄瓜的浓缩倍数为0.5倍)计算检出限， 娃嚷菌胺的检出限为0.01化g/kg。
[0064] W上的实施例仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行 限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术对本发明的技术方案作出 的各种变型和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1. 一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步 骤： (1) 提取 称取蔬菜和水果样品于具塞离心管中，加入乙腈或含1 %乙酸的乙腈溶液均质提取 lmin，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁振荡后离心； (2) 净化 移取样品提取液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，取一定量净 化液氮气吹干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串 联质谱(GC-MS/MS)检测； (3) 标准工作溶液的配制 将不含硅噻菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理，得样品提取净化残 渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的硅噻菌胺系列混合标准工 作液； (4) 测定和结果计算 将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰 面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线;在相同条件下将步骤(2)中净化 后的样品液注入GC-MS/MS进行测定，测得样品液中硅噻菌胺的色谱峰面积，代入基质标准 工作曲线，得到样品液中硅噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品 中硅噻菌胺残留量;若上机溶液中硅噻菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上 机溶液浓度稀释至线性范围之内。2. 根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，其特征在于， 步骤(1)中蔬菜和水果样品若为脱水样品，需降低称样量，并加适量水充分浸润。3. 根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，其特征在于， 步骤（1)中采用乙腈提取时需加入氯化钠盐析，采用含1%乙酸的乙腈溶液提取时需加入乙 酸钠盐析。4. 根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，其特征在于， 步骤(2)中基质分散固相萃取剂由无水硫酸镁、C 18和PSA组成，每毫升提取液中无水硫酸镁、 C18和PSA加入量分别为150mg、50mg和25mg。5. 根据权利要求1所述的一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，其特征在于， 步骤(4)中GC-MS/MS分析条件为:色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚 0.25μπι;进样口温度250.0°C;载气：He，不分流模式进样，进样量：lyL;恒流模式，流速 1.2mL/min;升温程序:初温60°C保持2min，以每分钟20°C的速度升至200°C，然后以每分钟2 °C的速度升至220°C，再以每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin;传输线温度:290°C ;电 离模式：电子轰击电离(El，70eV);离子源温度280°C ;碰撞气:氩气；多反应监测扫描方式， 监测参数为：
【专利摘要】本发明公开了一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的硅噻菌胺，提取液经乙二胺?N?丙基硅烷（PSA）和十八烷基硅烷键合相（C18）基质分散净化后，气相色谱串联质谱（GC?MS/MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为83.0%～90.8%，平均相对标准偏差（RSD）为5.1%～7.5%，检出限低于0.013 μg/kg，具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。能满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。
【IPC分类】G01N27/62, G01N30/06, G01N30/02
【公开号】CN105717210
【申请号】CN201610065697
【发明人】郭庆龙
【申请人】郭庆龙
【公开日】2016年6月29日
【申请日】2016年1月30日