一种罗汉果中罗汉果皂苷v的检测方法
【专利摘要】本发明公开了一种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，包括以下步骤：步骤1：将罗汉果粉碎后，过筛；步骤2：称取0.5重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用；步骤3：在预先放好过滤膜的萃取池中先加入2重量份硅胶，混合均匀后加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；步骤4：将萃取液在15000r/min的条件下离心3min，取上清液进行液相色谱测试。本发明提供了一种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，该方法操作简单，相比于药典，其提取更为彻底。
【专利说明】
一种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法
技术领域
[0001] 本发明涉及实验室检测领域，特别是一种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法。
【背景技术】
[0002] 2010年药典记录了提取罗汉果中罗汉果皂苷V的方法：取本品粉末(过四号筛）约 0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流2小时，放 冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液20ml，回收溶剂至干， 加水10ml溶解，通过大孔吸附树脂柱AB-8(内径为lcm，柱高为10cm)，以水100ml洗脱，弃去 水液，再用20%乙醇100ml洗脱，弃去洗脱液，继用稀乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，回收溶剂 至干，残渣加流动相溶解，转移至l〇ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
[0003] 药典的方法操作过程复杂，对操作人员的操作技能要求高。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，该方法操作简单，相 比于药典，其提取更为彻底。
[0005] 本发明提供的技术方案为：一种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，包括以下步 骤：
[0006] 步骤1:将罗汉果粉碎后，过筛；
[0007] 步骤2:称取0.5重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用；
[0008] 步骤3:在预先放好过滤膜的萃取池中先加入2重量份硅胶，混合均匀后加入适量 的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取;萃取结束后得到萃取液；
[0009] 静态萃取分为两步进行：
[0010]第一步:用水进行洗脱，弃去洗脱液；
[0011] 洗脱条件为:萃取温度70°c，静态萃取时间为5min，冲洗体积100%，静态循环次数 1次；
[0012] 第二步:用体积比为80:20的甲醇和乙酸乙酯混合液进行萃取;收集得到萃取液； [0013]萃取条件为:萃取温度100°C;静态萃取时间5min;冲洗体积100%;静态循环次数1 次；
[0014] 步骤4:将萃取液在15000r/min的条件下离心3min，取上清液进行液相色谱测试； [0015]所述的液相色谱测试的参数为：
[0016] a)仪器:液相色谱仪
[0017] b)色谱柱：碳 18色谱柱；3*100mm 3um
[0018] (3)柱温:40°〇
[0019] d)流速:0.3mL/min
[0020] e)流动相：乙腈-水，其中，乙腈和水的体积比23:77 [0021] f)检测波长：203nm〇
[0022]在上述的罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法中，所述的萃取池的体积为10ml，所述 的第一步和第二步中的压力均为1500psi，所述的第一步和第二步中吹扫时间均为60s。 [0023]在上述的罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法中，所述的液相色谱仪为Thermo U-3000双三元液相色谱仪;色谱柱为Thermo Syncronis C18色谱柱，所述的静态萃取所用的 设备为ASE快速溶剂萃取仪。
[0024] 本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：
[0025] 本发明的萃取和测定的方法操作简单，相比于药典，其提取效率更高，检测精度更 好。
【具体实施方式】
[0026] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制。
[0027] 实施例1:
[0028] -种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，包括以下步骤：
[0029]步骤1:将罗汉果粉碎后，过筛；
[0030]步骤2:称取0.5重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用；
[0031]步骤3:在预先放好过滤膜的萃取池中先加入2重量份硅胶，混合均匀后加入适量 的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取;萃取结束后得到萃取液； [0032]静态萃取分为两步进行：
[0033]第一步:用水进行洗脱，弃去洗脱液；
[0034]第二步:用体积比为80:20的甲醇和乙酸乙酯混合液进行萃取;收集得到萃取液； [0035]萃取条件(见表1)为：
[0038] 分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：
[0039] a)仪器：Thermo 双三元液相（U-3000)
[0040] b)色谱柱：Thermo Syncronis C18 3*1 00mm 3um
[0041] c)柱温：4(TC
[0042] d)流速:0.3mL/min
[0043] e)流动相：乙腈-水(体积比2 3:7 7)
[0044] f)检测波长：203nm
[0045] 色谱分析有效性验证：
[0046] 取罗汉果皂苷V对照品适量，精密称定，加流动相制成每lml含0.2mg的溶液，即得 罗汉果皂苷V对照品。
[0047] 取罗汉果皂苷V对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%乙腈制成每lml含异 阿魏酸880.4yg的溶液，然后分别精密吸取该溶液0. lyl、0.2yl、0.5yl、0.8yl、1. Oyl进入LC 测定，并依照上述LC液相色谱法测定，结果详见表2;
[0048]表 2
[0050] 1.1实施例1的萃取方法的重现性验证：
[00511 取相同批号的样品（批号：1510180)0.5g，共6份，精密称定，按实施例1的ASE提取 方法提取供试品溶液，进样量为lyL，以上述的色谱条件平行试验，测得样品中罗汉果皂苷v 的含量见表二，RSD为0.73 %，试验表明ASE提取方法重复性良好，结果详见表3
[0052]表 3
[0054] 1.2实施例1的萃取方法的精确度测试
[0055] 采用实施例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对罗汉果进行萃取，罗汉果为3批， 批号分别为 1508166,1510180,150723;
[0056] 实施例1的ASE萃取方法对同一批次的罗汉果平行测试两次，分别为ASE1和ASE2表 不。
[0057]具体测试结果见下表4;
[0058]表4
[0060]以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任 何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:将罗汉果粉碎后，过筛； 步骤2:称取0.5重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用； 步骤3:在预先放好过滤膜的萃取池中先加入2重量份硅胶，混合均匀后加入适量的硅 藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取;萃取结束后得到萃取液； 静态萃取分为两步进行： 第一步:用水进行洗脱，弃去洗脱液； 洗脱条件为:萃取温度70°C，静态萃取时间为5min，冲洗体积100%，静态循环次数1次； 第二步：用体积比为80:20的甲醇和乙酸乙酯混合液进行萃取;收集得到萃取液； 萃取条件为:萃取温度100 °C ;静态萃取时间5min;冲洗体积100 % ;静态循环次数1次； 步骤4:将萃取液在15000r/min的条件下离心3min，取上清液进行液相色谱测试； 所述的液相色谱测试的参数为： a) 仪器:液相色谱仪 b) 色谱柱:碳18色谱柱;3*100mm 3um (：)柱温:40°〇 d) 流速:0.3mL/min e) 流动相：乙腈-水，其中，乙腈和水的体积比23:77 f) 检测波长：203nm〇2. 根据权利要求1所述的罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，其特征在于，所述的萃取 池的体积为l〇ml，所述的第一步和第二步中的压力均为1500psi，所述的第一步和第二步中 吹扫时间均为60s。3. 根据权利要求1所述的罗汉果中罗汉果皂苷V的检测方法，其特征在于，所述的液相 色谱仪为Thermo U-3000双三元液相色谱仪;色谱柱为Thermo Syncronis C18色谱柱，所述 的静态萃取所用的设备为ASE快速溶剂萃取仪。
【文档编号】G01N30/02GK105929071SQ201610268377
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月27日
【发明人】陈学松, 欧妮, 陈翠玲, 钟水桥, 李仁乔
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所