专利名称：一种新型饲料添加剂糖萜素的提取方法
技术领域：
本发明是关于一种新型饲料添加剂糖萜素的提取方法，属于饲料添加剂领域。
背景技术：
糖萜素是以山茶科植物中糖类和三萜皂甙类为主体研制成的，山茶科属种子饼粕 中三萜皂甙是由有机酸-配基-糖体组成的.生物活性物质化学性质稳定，可溶于温水、二 硫化碳和醋酸乙酯，易溶于含水甲醇、含水乙醇、正丁醇和冰醋酸，但不溶于乙醚、丙酮苯等 溶剂，糖萜素分别与醋酸酐、钼酸铵、三氯化铁和香荚兰素起化学呈色反应。它耐高温，为棕 黄色、无灰微细状结晶。糖萜素主要是由糖类(I > 30% )、三萜皂甙(> 30% )、有机酸组 成。糖萜素在饲料中的添加量为0. 2-0. 5mgAg，它可以完全替代抗生素药物，且无残留，不污 染环境，它是全国唯一 AA级纯天然绿色添加剂。 糖萜素的作用机制明显有别于抗生素，抗生素通过抑制或杀灭畜禽消化道内有害 微生物的生长繁殖防止疾病，使肠壁变薄，促进营养成分的渗透和吸收，加快蛋白合成，促 进动物生长，其作用发挥短期效应。而糖萜素则是通过提高动物的整体免疫性能和内分泌 系统的功能，提高动物的健康水平，进而改善动物的生产性能。 糖萜素所含的生物活性物质，具有调节网状内皮系统，增强巨噬细胞、淋巴细胞、 白细胞介素的活性，提高抗体水平，调节cAMP与cGMP含量和补体的生成等作用，明显增强 机体免疫功能。自由基对生物系统的危害极大。抗氧化剂能够稳定具有高度活性的自山基， 从而司保持细胞结构和功能的完整性(chew，1995)。糖萜素能与游离基产生作用而阻止自 行氧化的继续进行。它具有清除超氧自由基、羟自由基和脂自由基的作用。糖萜素还可提 高动物体内小肠内消化酶(蛋白水解酶、脂肪酶、淀粉酶)的活性，改善消化吸收功能，提高 生产性能。 糖萜素作为新一代高效、无残留和无公害绿色饲料添加剂来代替药物饲料添加 剂，具有良好的市场前景。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种新型饲料添加剂糖萜素有效成分的提取方法及含 量测定方法。 本发明的目的之二是为糖萜素为有效成分的新型饲料的研究开发提供一些有效 的信息。 本发明的技术解决方案如下 称取山茶科植物的种子，干燥后去皮粉碎，按照比例加入溶剂乙醇，用微波加热， 提取三次。提取完毕后合并提取液，将其减压浓縮回收溶剂后加水成悬浮液，悬浮液依次用 石油醚、丙酮萃取，弃去石油醚、丙酮萃取液。余相用正丁醇萃取，该萃取液经减压浓縮，称重。 采用分光光度法测定提取物中有效成分三萜皂甙的含量，551nm为测定波长。
标准曲线的制订精确吸取齐墩果酸标准溶液0、0. 05、0. 10、0. 15、0. 20和0. 25ml 分置于具塞试管中，挥去甲醇，精密加入5 %香草醛-冰醋酸溶液(新鲜配制)0. 2ml ，高氯 酸0. 8ml，摇匀，于6(TC水浴中加热15min后，置冰浴中冷却。加冰醋酸5ml，摇匀，立即在 551nm波长下测定吸光度A，同时以试剂空白做参照。以吸光度A为纵坐标，浓度C(mg/ml) 为横坐标，绘制标准曲线。 样品液的测定精确吸取0.3ml的供试品溶液，置于具塞试管中，挥去甲醇，照标 准曲线项下的方法操作，平行做5次实验，测定吸光度A，代入回归方程，计算总皂苷的含 山茶皂苷主要为五环三萜类，故我们选择了与山茶皂苷类成分基本母核结构接近 的齐墩果酸为对照品。皂苷的分析测定有多种方法，如沉淀法、溶血指数法、层析法等，沉淀 法测定往往易带进杂质或导致皂苷变质；层析法一般可以分离出总皂苷，但对总含量测定 不适，误差大，成本高，采用分光光度计法测定其总皂苷的含量操作简便、灵敏，属于经典、 成熟、高效的方法。
权利要求
一种新型饲料添加剂糖萜素的提取方法，其特征在于包括以下步骤称取山茶科植物的种子，干燥后去皮粉碎，按照比例加入的溶剂乙醇，用微波加热，提取三次。提取完毕后合并提取液，将其减压浓缩回收溶剂后加水成悬浮液，悬浮液依次用石油醚、丙酮萃取，弃去石油醚、丙酮萃取液。余相用正丁醇萃取，该萃取液经减压浓缩，称重。采用分光光度法测定提取物中有效成分三萜皂甙的含量，551nm为测定波长。先用齐墩果酸标准对照品溶液的梯度溶液测定的吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制成标准曲线，得到回归方程。供试品溶液取0.3ml，按照标准曲线下的方法操作，平行测定5次，代入回归方程，即可计算出提取物中三萜皂甙的含量。
2. 根据权利要求1所说的按照比例加入溶剂乙醇，用微波加热，提取三次，其特征在于乙醇的浓度为95%，原料(m):溶剂(v) = 1 : 8，微波功率为300W，辐射时间20min。
3. 根据权利要求1中所说的齐墩果酸标准对照品溶液和供试品溶液，其特征在于干燥的齐墩果酸对照品，加入甲醇，配制成0. 5mg/ml的对照品溶液；山茶子乙醇提取物的干浸膏，加入甲醇配制成2. 36mg/ml的供试品溶液。
4. 根据权利要求1所说的先用齐墩果酸标准溶液的梯度溶液测定的吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制成标准曲线，得到回归方程，其特征在于精确吸取齐墩果酸标准溶液[0、0. 05、0. 10、0. 15、0. 20和0. 25ml分置于具塞试管中，挥去甲醇，精密加入5%香草醛-冰醋酸溶液(新鲜配制)0. 2ml，高氯酸0. 8ml，摇匀，于6(TC水浴中加热15min后，置冰浴中冷却。加冰醋酸5ml，摇匀，立即在551nm波长下测定吸光度A，同时以试剂空白做参照。以吸光度A为纵坐标，浓度C(mg/ml)为横坐标，绘制标准曲线。
全文摘要
本发明公开了一种新型饲料添加剂糖萜素的提取方法。称取山茶科植物的种子，干燥后去皮粉碎，用乙醇为溶剂，微波加热提取三次。合并提取液，将其减压浓缩，用正丁醇萃取，萃取液经减压浓缩干燥，得到提取物粉末。用分光光度计，标准曲线法测定提取物中有效成分三萜皂甙的含量。方法实用、简单、效果好。
文档编号A23K1/16GK101756023SQ200810121708
公开日2010年6月30日 申请日期2008年10月23日 优先权日2008年10月23日
发明者吴菁, 陈群 申请人:湖州来色生物基因工程有限公司;吴菁