专利名称：一种广东金线莲的组培快繁方法
技术领域：
本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种广东金线莲的组培快繁方法。
背景技术：
金线莲(Anoectochitus formosa皿s)是我国传统的名贵药材，属于兰科开唇兰属多年生草本植物，别名金蚕、金线兰、金石松、金线虎头蕉、金线入骨消等。金线莲也可以作
为观赏价值极高的观赏植物。金线莲富含维生素和多糖，其微量元素含量、氨基酸含量高，具有抗菌、抗癌、强心、止痛、降血糖等作用。由于金线莲在治疗肝病、高血压、糖尿病及肿瘤方面的良好功效，日益引起医学界的重视。 但是，金线莲种子微小，发芽率低，其生长对生态环境要求严格，自然繁殖和生长缓慢。近年来随着生态资源环境的破坏，野生金线莲生长环境受到了破坏，野生金线莲资源非常稀少，现已濒临灭绝。目前，金线莲的繁殖方法有种子繁殖、扦插繁殖和组培繁殖。但是金线莲的种子的胚未成熟，不易发芽；采用扦插法的繁殖系数低，难以形成商品化规模种植。 如果能建立一套金线莲种苗的组织培养快速繁殖技术，将对保护和合理利用广东金线莲资源做出重要贡献，并大力促进金线莲商品化、规模化的种植技术推广。
发明内容
本发明的目的是克服现有金线莲尤其是金线莲繁殖技术的不足，建立一种广东金
线莲的组培快繁方法，提高广东金线莲的繁殖系数使种苗生产能够满足生产需要。 本发明的目的具体是通过激素诱导广东金线莲的顶芽或腋芽产生不定芽进行快
速繁殖来实现金线莲的商品化规模种植。 本发明具体的技术方案是 提供一种广东金线莲的组培快繁方法，包括金线莲外植体的消毒、不定芽诱导、生根培养得到组培苗和组培苗移栽步骤。 本发明优选野生广东金线莲的腋芽或顶芽作为外植体材料。 所述外植体消毒是采用质量体积比为O. 1%的升汞溶液(0. lg升汞/100ml水)进
行表面消毒，消毒时间为10min，无菌水清洗三次，每次清洗时间为2min。 诱导方法是将外植体切为带有一个芽的小段，接种在诱导培养基上。所述不定芽诱导的培养基为MS+1. Omg/1 6-BA+0. lmg/1 IBA， Kl值为5. 8。所述生根培养基为MS+0. 5mg/l NAA+0. 3mg/1 IBA， PH值为5. 8。 生根培养的光照条件优选采用人工光照，光强度2000Lx，培养温度为25°C。 出苗后进行移栽。本发明优选在生根培养基中培养1个月后，炼苗7天，移栽至人
工大棚，移栽用基质为泥炭土和园土以3:1的体积比例混合的混合物。 具体地方法为选取野生广东金线莲的腋芽或顶芽为外植体，O. 1%升汞溶液消
毒10min，无菌水清洗三次，每次2min，在超净工作台上接种到MS+1. Omg/1 6-BA+O. lmg/1
3IBA、 ra值为5. 8的诱导培养基中，进行人工光照培养，光强度2000Lx，培养温度为25°C，
待不定芽诱导出来之后转接至相同培养基增殖，继代5 10次，生根培养基为MS+0. 5mg/
lNAA+0.3mg/1 IBA，ffl为5. 8，培养条件同不定芽诱导。生根培养1个月，炼苗7天后，移栽
至人工大棚，基质为泥炭土和园土以3 : l的体积比例混合。 与现有的广东金线莲种苗繁殖技术相比，本发明的有益效果在于 采用本发明的组培快繁方法繁殖广东金线莲在3个月内增殖系数可以达到7 8，
极大地提高了广东金线莲的种苗数量，为工厂化育苗和广东金线莲产业化发展的提供了技
术保障。通过无性繁殖的种苗能够完全获得亲本的遗传信息，母本的优良品质得以稳定遗
传。种苗具有苗壮、生长一致的优点，便于统一管理，可以大大节省成本。 本发明建立了一套简单易行的广东金线莲的组培快速繁殖方法，增值系数比现有
的扦插繁殖和分株繁殖大大提高，并且能够周年生产种苗，为金线莲的大规模种植提供丰
富的种苗资源，有效解决目前因种苗严重不足而限制金线莲产业发展的技术难题和技术瓶颈。 采用本发明方法可以对广东金线莲的野生种质资源进行人工保持，为今后开展相关研究提供技术材料和技术保障。
具体实施例方式
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细地阐述。
实施例1 采用的材料为野生广东金线莲，取自广东南昆山。
按照以下步骤繁殖广东金线莲 1、取野生广东金线莲植株，切成每段含有一个腋芽的小段。 2、将茎段放入质量体积比为0. 1%升汞溶液中消毒10min，无菌水清洗三次，每次2min。 3、在超净工作台上将消毒后的茎段接种到诱导培养基，诱导培养基组成为MS+1. Omg/1 6-BA+O. lmg/1 IBA， PH值为5. 8。人工光照，强度2000Lx，培养温度为25°C 。
4、1个腋芽可诱导产生2 4个左右的新芽。待不定芽诱导有2 4个之后将芽转接至相同培养基(组成为MS+1. Omg/1 6-BA+O. lmg/1 IBA，m值为5. 8)继代，增殖。2个月后增殖系数为3 4。 5、取长约lcm左右的不定芽，单株接到生根培养基进行培养，生根培养基为
MS+0.5mg/1 NAA+0.3mg/1 IBA， ffl值为5. 8 ;培养条件同不定芽诱导(人工光照，强度
2000Lx，培养温度为25°C )。生根培养1个月左右时间，生根率可达到90%以上。 6、炼苗7天后，将组培苗移栽至人工大棚，基质为泥炭土和园土以3 : l的体积比
例混合物。 7、移栽后进行日常管理。每天浇水3次，浇至基质湿透为止，每半月施复合肥1次，并注意防治病虫害。所述复合肥采用蔬菜专用肥料(氮15%、五氧化二磷7%和氧化钾8% )。 繁殖得到的广东金线莲在3个月内通过不定芽的诱导，增殖系数可以达到7 8，极大地提高了广东金线莲的种苗数量。
实施例2 采用的材料为野生广东金线莲，取自广东南昆山。
按照以下步骤繁殖广东金线莲 1、取野生广东金线莲植株，切下含有一个顶芽的小段。 2、将茎段放入质量体积为0. 1%升汞溶液消毒10min，无菌水清洗三次，每次2min。 3、在超净工作台上将消毒后的茎段接种到诱导培养基，诱导培养基组成为MS+1. Omg/1 6-BA+0. lmg/1 IBA， PH值为5. 8。人工光照，强度2000Lx，培养温度为25°C 。
4、l个腋芽可诱导产生2 4个左右的新芽。待不定芽诱导出来之后将芽转接至相同培养基(组成为MS+1. Omg/1 6-BA+O. lmg/1 IBA， PH值为5. 8)继代，增殖。2个月后增殖系数为3 4。 5、取长约lcm左右的不定芽，单株接到生根培养基进行培养，生根培养基为
MS+0. 5mg/l NAA+0. 3mg/1 IBA， ffl值为5. 8 ;培养条件同不定芽诱导(人工光照，强度
2000Lx，培养温度为25°C )。生根培养1个月左右时间，生根率可达到90%以上。 6、炼苗7天后，将组培苗移栽至人工大棚，基质为泥炭土和园土以3 : l的体积比
例混合物。 7、移栽后进行日常管理。每天浇水3次，浇至基质湿透为止，每半月施复合肥1次，并注意防治病虫害。所述复合肥采用蔬菜专用肥料(氮15%、五氧化二磷7%和氧化钾8% )。 本发明方法1个腋芽可诱导产生2 4个左右的新芽，2个月后增殖系数为3 4，生根率可达到90%以上，大大提高了广东金线莲的育苗生产能力，縮短育苗时间，节省种植成本，为广东金线莲遗传资源的保存提供了技术保障。
权利要求
一种广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于是通过激素诱导广东金线莲的顶芽或腋芽产生不定芽进行快速繁殖。
2. 根据权利要求1所述广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于包括以下步骤(1) 取野生广东金线莲的腋芽或顶芽作为外植体材料，外植体进行消毒；(2) 不定芽诱导；(3) 生根培养得到组培苗； (4) 将组培苗移栽。
3. 根据权利要求2所述广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于步骤(1)消毒是采 用质量体积比为0. 1%的升汞溶液进行外植体表面消毒10min。
4. 根据权利要求2所述广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于步骤(2)所述诱导 的培养基是MS+1. Omg/1 6-BA+O. lmg/1 IBA， PH值为5. 8 ;诱导条件为强度为2000Lx的人 工光照，培养温度为25°C。
5. 根据权利要求2所述广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于步骤(3)所述生根 培养基为MS+0. 5mg/l NAA+0. 3mg/l IBA， PH值为5. 8。
6. 根据权利要求5所述广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于所述生根培养的条 件为强度2000Lx的人工光照，培养温度为25°C 。
7. 根据权利要求2所述广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于步骤(4)所述移栽 是在炼苗7天、组培苗长到2cm高时进行。
8. 根据权利要求2或7所述广东金线莲的组培快繁的方法，其特征在于移栽用的基质 为泥炭土和园土以3:1的体积比例混合的混合物。
全文摘要
本发明公开了一种广东金线莲的组培快繁方法。本发明选取我国广东地区的金线莲的腋芽或顶芽为外植体，经过诱导不定芽、增殖、生根培养得到大量无性繁殖的后代植株。采用本发明方法，1个腋芽可诱导产生2～4个左右的新芽，2个月后增殖系数为3～4，生根率可达到90％以上，大大提高了广东金线莲的育苗生产能力，缩短育苗时间，节省种植成本，为广东金线莲遗传资源的保存提供了技术保障。
文档编号A01H4/00GK101773069SQ20091021435
公开日2010年7月14日 申请日期2009年12月29日 优先权日2009年12月29日
发明者任顺祥, 王泽清 申请人:华南农业大学