专利名称：一种香椿树无性系组培苗高效培养的方法
技术领域：
本发明涉及一种植物组培苗快速培养繁殖技术，具体是提供一种香椿树无性系组培苗组织培养繁殖获得大量香椿苗木的方法。
背景技术：
香椿，又名香椿芽、香椿头等，原产于中国，生长于东亚与东南亚地区，北从北朝鲜南至泰国、印尼等地，很耐干旱、瘠薄、不耐水湿，能耐中度盐碱土，在中性、酸性、钙质土均生长良好。树长可至25米高，树干直径可达70厘米，其羽状复叶约为50-70厘米长、30-40 厘米宽，叶片约为9-15厘米长、2. 5-4厘米宽，10-11月果实成熟，种子椭圆形，上有木质长翅，种粒小，发芽率低。香椿的叶片有独特浓厚的味道，嫩叶可以食用，干燥后磨成细粉，素食者时常拿来当调味料。嫩芽食用，木材纹理细，是高档家具、造船和建筑材料，木屑及根可提芳香油，国外用作雪茄烟的赋香剂；种子可榨油，含油量38. 5%;根皮及果入药，有收敛止血去湿止痛的功效。树皮含川楝素，图醇，鞣质；叶含胡萝卜烃，维生素B，维生素C。香椿全身都是宝，具有重要的经济价值和社会效益。发展香椿种植有利于增加用材林、提高椿芽的产量，降低供需矛盾，提供人民的生活水平具有重大意义。目前生产香椿苗的方法为采用的根蘖育苗和枝条扦插育苗，其方法简便易行，管理也比较容易，但繁殖系数小，难以迅速大量提供种苗；种子繁殖培育，种粒小，发芽率低， 也不能满足大量种植的需要；组织培养，研究较少，在实际生产中还未真正投入使用，因而迫切需要研究香椿树优良无性系高效组培技术。组织培养技术具有繁殖速度快、方法简单，不受季节限制，同时子代能够获得母本的优良遗传特性，并获得脱毒苗的特点。因此，研究香椿组织培养技术，并应用到实际生产过程中对缓解香椿苗木紧张、推动山区经济和提高山区人民的生活水平意义重大。周玉玲等的红香椿组织培养和快速繁殖研究以“红香椿一号”的茎段为外植体进行植物组织培养，采用四因素三水平正交设计法试验筛选出生根、诱芽的适宜培养基， 以不同培养基的生根数为鉴定指标，筛选出适宜红香椿一号茎分化苗生根的培养基，以不同培养基的增芽数为鉴定指标，筛选出适宜红香椿一号茎分化丛生芽的培养基，进而掌握不同生长素之间的适宜配比。通过试验研究表明在9个培养基中生根最佳的培养基是(MS+6-BA0. lmg/L+NAAl. Omg/L+IBAl. 0mg/L+ZT0. 2mg/L);增殖适宜的培养基是 (MS+6-BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L+IBA0. lmg/L+ZT0. lmg/L)。中国专利申请号200910064257. 2，香椿组培快繁技术及培养基的配比。是从正在生长的植株中，剪取当年生半木质化腋芽饱满的枝条，经杀菌、消毒，剪成含有1-2个腋芽的茎段，快速接种到分化诱导培养基中，进行分化培养；再利用分化培养出的植株，放入增殖培养基中进行增殖快繁；扩繁到一定数量时，放入生根培养基中进行壮苗生根培养，壮苗生根后，转入练苗移载。目前，香椿树的组织培养，未能完全解决组织培养中的褐变、脱毒、生根难、多次继代增殖容易退化和香椿幼苗移栽成活率低等问题。
发明内容
本发明的针对现有技术褐变、脱毒、生根难等问题，提供了一种生根率高、根系质量好、生根成本低的香椿组培苗高效培养技术。本发明提供的香椿无性系组培苗高效生根方法，包括初代培养、继代培养、壮苗培养和生根培养过程，其中初代培养基的筛选及激素配比选取当年生新稍，取顶端1-3厘米进行消毒处理， 然后进行初代培养，培养基为 WPM+BAl—3mg/L+IBA0. I—lmg/L+NAAl-2mg/L ；继代培养基的筛选及激素配比将获得的无菌苗转移到继代培养基上进行增殖， 培养基为 WPM+BA2—5mg/L+IBA0. I—3mg/L+ZT0. 05-lmg/L ；壮苗培养基的筛选及激素配比对增殖过程中获得的无菌苗进行壮苗，采用 WPM+IBAO. l-3mg/L+NAA0. 5_3mg/L进行壮苗，待组培苗长到2_4厘米后进行生根诱导；生根材料的激素预处理将组培苗的基部在1000 4000ppm的IBA溶液中浸泡 5-10 秒；生根培养基的筛选将经过预处理的组培苗接种在(1/2-1)MS+AC200-600的培养基上，25-30天后，组培苗生根形成完整植株。采用本发明提供的继代培养基，使增殖周期缩短至30-35天，增值系数达5. I
9.2.。经过壮苗培养基、激素预处理及生根培养基后，生根率达100%以上，移栽成活率 90%以上。
具体实施例方式实施例I从香椿健壮植株上剪取当年生新稍，取顶端1-3厘米进行消毒处理，放入 WPM+BAlmg/L+IBAO. lmg/L+NAAlmg/L进行初代培养；初代获得的无菌苗转移到WPM+BA2mg/ L+IBAlmg/L+ZTO. 05mg/L继代培养，增殖周期为40天，增值系数达5. 2 ;将增殖过程中获得的无菌苗采用WPM+IBAO. lmg/L+NAAO. 5mg/L进行壮苗，30天组培苗长至2_4厘米时从培养瓶中取出，将组培苗的基部在IOOOppm的IBA溶液中浸泡10秒，然后接种在1/2MS+AC200 的培养基上，30天后生根率达100%。生根后，将组培苗移至营养杯中，基质为泥炭土 珍珠岩=3 I，一移栽成活率达92 %。具体操作如下初代培养培养基用300ml的广口瓶分装，每瓶30ml，封口膜包扎，在120°C 和I. 5kg/cm2条件下没用高压蒸汽灭菌锅灭菌20min。培养条件的筛选在培养温度为 25±2°C，光照1500 2000LX，每日光照时间为12h的培养室中培养。继代培养将获得的无菌苗转移到继代培养基上进行增殖，培养基用300ml的广口瓶分装，每瓶30ml，封口膜包扎，在120°C和I. 5kg/cm2条件下没用高压蒸汽灭菌锅灭菌 20min。培养条件的筛选在培养温度为25±2°C，光照1500 2000LX，每日光照时间为12h 的培养室中培养。壮苗培养将增殖获得的无菌苗转移到壮苗培养基上进行壮苗，培养基用300ml 的广口瓶分装，每瓶30ml，封口膜包扎，在120°C和I. 5kg/cm2条件下没用高压蒸汽灭菌锅灭菌20min。
生根材料的激素预处理将组培苗的基部在IOOOppm的IBA溶液中浸泡10秒，生根培养接种在1/2MS+AC200的培养基上，30天后生根率达100%。移植将组培苗移至营养杯中，基质为泥炭土 珍珠岩按一定比例配制，杯子置于具间歇喷雾设施的温室大棚中生根管理，温度保持20 30°C，喷雾间歇时间10分钟，喷雾时间10秒，移栽成活率达92%。实施例2从香椿健壮植株上剪取当年生新稍，取顶端1-3厘米进行消毒处理，放入 WPM+BA2mg/L+IBA O. 5mg/L+NAA2mg/L进行初代培养；将初代获得的无菌苗转移到 WPM+BA5mg/L+IBA3mg/L+ZTlmg/L继代培养，增殖周期为30天，增值系数达9. I ;将增殖过程中获得的无菌苗采用WPM+IBAO. lmg/L+生物素2mg/L进行壮苗，25天组培苗长至2_4 厘米时从培养瓶中取出，将组培苗的基部在3000ppm的IBA溶液中浸泡5秒，然后接种在 1/2MS+AC600的培养基上，25天后生根率达95%。生根后，将组培苗移至营养杯中，基质为泥炭土 珍珠岩=2 I，一移栽成活率达91 %。具体操作参见实施例I。实施例3从香椿健壮植株上剪取当年生新稍，取顶端1-3厘米进行消毒处理，放入 WPM+BA3mg/L+IBAlmg/L+NAAlmg/L进行初代培养；初代获得的无菌苗转移到WPM+BA2mg/ L+IBAlmg/L+ZTO. 05mg/L继代培养，增殖周期为40天，增值系数达7. 5 ;将增殖过程中获得的无菌苗采用WPM+IBAO. lmg/L+NAAO. 5mg/L进行壮苗，30天组培苗长至2_4厘米时从培养瓶中取出，将组培苗的基部在IOOOppm的IBA溶液中浸泡10秒，然后接种在1/2MS+AC200 的培养基上，30天后生根率达100%。生根后，将组培苗移至营养杯中，基质为泥炭土 珍珠岩=3 I，一移栽成活率达93 %。具体操作参见实施例I。
权利要求
1.香椿无性系组培苗高效生根方法，包括初代培养、继代培养、壮苗培养和生根培养步骤(1)初代培养基的筛选及激素配比选取当年生新稍，取顶端1-3厘米进行消毒处理， 然后进行初代培养，培养基为 WPM+BAl—3mg/L+IBA0. I—lmg/L+NAAl-2mg/L ；(2)继代培养基的筛选及激素配比将获得的无菌苗转移到继代培养基上进行增殖， 培养基为 WPM+BA2—5mg/L+IBA0. I—3mg/L+ZT0. 05-lmg/L ；(3)壮苗培养基的筛选及激素配比对增殖过程中获得的无菌苗进行壮苗，采用 WPM+IBAO. l-3mg/L+NAA0. 5_3mg/L进行壮苗，待组培苗长到2_4厘米后进行生根诱导；(4)生根材料的激素预处理将组培苗的基部在1000 4000ppm的IBA溶液中浸泡 5-10 秒；(5)生根培养基的筛选将经过预处理的组培苗接种在(1/2-1)MS+AC200-600的培养基上，25-30天后，组培苗生根形成完整植株。
全文摘要
一种香椿树无性系组培苗高效培养的方法。本发明公开了提供了一种通过组织培养快速繁殖获得大量生根的香椿树无性系完整植株的技术，包括继代培养基的筛选及激素配比、壮苗培养基的筛选及激素配比、生根预处理、生根培养基的筛选及激素配比的过程。其中初代培养基采用WPM+BA1--3mg/L+IBA0.1--1mg/L+NAA1-2mg/L；继代培养基采用WPM+BA2--5mg/L+IBA0.1--3mg/L+ZT0.05-1mg/L进行增殖，增殖周期缩短至30-40天，增殖系数达4.2-9.1；采用WPM+IBA0.1-3mg/L+NAA0.5-3mg/L进行壮苗，20-25d苗木即可用于生根；将2-4厘米高德组培苗在用IBA处理后，直接接种在(1/2-1)MS+AC200-600的培养基上，25-30天后，组培苗生根形成完整植株，生根率达90％以上。
文档编号A01H4/00GK102577944SQ20111043106
公开日2012年7月18日 申请日期2011年12月21日 优先权日2011年12月21日
发明者关健敏, 罗亚东 申请人:广西金宏昕生物科技有限公司