专利名称：一种富硒海带饲料及其养殖富硒鲍鱼的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于营养免疫学技术领域，涉及纳米微量元素在水产养殖生产中的应用， 具体涉及一种含纳米硒的海带饲料、及利用其养殖富硒鲍鱼的方法
背景技术：
硒是人类和动物生命中必须的微量元素，在保障人体健康方面有多种重要功能， 包括免疫调节，抗疲劳、抗氧化、防衰老。免疫和抗氧化功能低下是多种慢性疾病(高血压、 冠心病、糖尿病、癌症)的重要原因。科学补硒有利于预防上述疾病的发生，也可以帮助人体抵抗急性传染病，例如流感。要发挥硒元素的这些作用，《中国居民膳食营养参考摄量》指出硒的摄入量每人每天应高于50微克。但是药补不如食补，人们应该从食物链中摄入硒。众所周知，我国从东北到西南有一条土壤缺硒地带，我国是缺硒大国，国土面积 72%的地区处于低硒地带，其中30%为严重缺硒地区，粮食和蔬菜等食物含硒量极低。东北、华北、西北、西南、华南、华东、珠江三角洲、长江三角洲等的大中城市都属于低硒地区。 目前，我国人群食物中尚达不到每人每天40微克以上的最低硒摄入水平，尤其是缺硒地区人群更难从食物中达到补硒的目的，每日仅有28微克到40微克，直接影响缺硒地带居民的健康水平(傅善来，2009)。家畜家禽缺硒易患死亡率高的白肌病，所以饲料添加亚硒酸钠提高成活率已是畜牧业的规范措施。硒元素按存在形态可分为无机硒(亚硒酸钠、硒酸钠)，有机硒(硒蛋氨酸、硒酵母)和零价元素硒。已知灰色和黑色元素硒没有生物活性。若零价元素硒的粒子为纳米级，则呈红色，称为红色纳米硒。它对热稳定，易溶于水，具有生物活性高、急性毒性低的特点。其急性毒性是无机硒的1/7，有机硒的1/3、生物安全性高。纳米硒还具有更强的抗氧化功能，更高的生物利用率。红色纳米硒作为饲料添加剂生产富硒鸡蛋、对肉鸡生长和抗氧化能力的影响等已有报道(王福香等，2008,王売等,2011)。田福平的发明专利 ZL200810011963. 6含纳米硒、氧化锌有机生物饲料添加剂、制法及使用方法，用纳米硒、氧化锌有机生物饲料添加剂，生产富硒牛奶、羊奶和鸡蛋，同时提高家畜家禽的免疫力。疾病一直是阻碍水产养殖业发展的关键问题，尤其是我国重要的鲍鱼养殖品种——皱纹盘鲍的持续发展受到严重的危害，造成较大的经济损失。疾病问题来自病原、宿主及环境三因素。所以在搞好养殖环境的条件下，提高鲍鱼的自身免疫力是抵抗疾病的重要因子。硒是水产动物的必需营养元素，缺乏或过量都会改变动物对疾病的抵抗力和易感性。硒作为一种抗氧化剂并不是直接发挥作用，而是作为谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)核心组成部分，参与有机和无机过氧化物的清除过程(Fang等2002;)。硒的缺乏抑制水生动物生长，是动物必不可少的营养微量元素。另一方面饲料中过量硒又会有毒性作用，会导致生长缓慢、死亡率增多等，因此需要最佳的硒投量，才能保持鲍鱼体内抗氧化物酶如过氧化氢酶(CAT)，超氧化歧化酶(SOD)(邹国林等，1986)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX) (Bell等， 1985)等，消除新陈代谢所产生的自由基(H202、02_、脂质过氧化物等)，从而有效抵抗氧化损失。对于水产动物饲料中硒的需求量已经有许多研究报告，如鱼类。而甲壳类也有一些报道(Wang等，1994)。对于软体动物如鲍鱼中国海洋大学硕士论文(万敏，2003)曾有报道。 总之以上报道都是用无机硒一亚硒酸钠为硒源营养素，尚未见到用纳米硒作为海带饲料添加剂研究生产富硒鲍鱼以及对抗氧化免疫力的影响。硒的测定依据GB5009. 93-2010的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种含纳米硒的海带饲料养殖富硒鲍鱼的方法。充分利用纳米硒颗粒小，穿透力大，鲍鱼吸收，利用率高，毒性低，安全投加量范围广的优点。富硒鲍鱼有良好的免疫、抗氧化力，实现成活率稿，增产高，含硒量高。本发明全文中所提及的“红色液体纳米硒”是指购于大连理工大学化工学院的纳米硒产品(电话0411-83020358)，其制备方法是，按照发明专利ZL200810011963. 6中的，实施例I中的“纳米硒有机生物中间体”的方法制备(即，按照原专利授权文本中，说明书第9 页
行所列表格中的原料配比，
的方法制备)；本产品的粒径为100 140nm， 使用前配制成浓度为纳米硒的浓度为O. 50mg/mL的液体。为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是本发明的一方面在于，公开一种养殖富硒鲍鱼的富硒海带饲料，其通过以下步骤制备向粒径为100 140nm、浓度为O. 50mg/mL的红色纳米硒溶液中，加7 100倍体积的水，制得纳米硒稀释液，再按纳米硒鲜海带为O. 50 2. OOmg Ikg的比例，将全部稀释液均匀喷洒在条状或浆料状的鲜海带上，海带晾干后制成。其中，喷洒前对红色液体纳米硒按不同的比例加水稀释；可以通过稀释浓度的不同，控制纳米硒在海带表面的附着力，从而造成对喂养的富硒鲍鱼饲养效果的影响。即稀释浓度相对较高的组，喷洒在海带表面均匀度不够，饲养效果不是最佳；稀释浓度相对较小的组，纳米硒在海带表面吸着力小，当投入养殖池中纳米硒容易从海带表面流失到水中，不利于鲍鱼摄取纳米硒，饲养效果不是最佳。因此，即使在海带与纳米硒在同一比例的情况下，由于喷洒前稀释纳米硒的稀释浓度不同，也会导致饲喂鲍鱼效果的差异。因此，喷洒前稀释纳米硒的稀释浓度不同也是配制富硒海带饲料的关键。此方法虽然简便易行效果突出，但至今未在现有技术中记载。上文所述的富硒海带饲料，优化条件下，纳米硒稀释液按红色纳米硒溶液与水的体积比为I : 17 67制得。上文所述的富硒海带饲料，优化条件下，纳米硒稀释液按红色纳米硒溶液与水的体积比为I : 30 35制得。上文所述的富硒海带饲料，优化条件下，纳米硒稀释液按红色纳米硒溶液与水的体积比为30 970制得。上文所述的富硒海带饲料，优化条件下，按纳米硒鲜海带为O. 80
I.20mg Ikg的比例将纳米硒稀释液喷洒到鲜海带上。饲养鲍鱼的投硒量，也就是纳米硒鲜海带的比例，随着其比例增大，富硒鲍鱼体内含硒量随之增加，体内SOD活力和GPX活力不一定呈线性增强，这是因为纳米硒虽然有营养作用，但过量时也会发生中毒或延缓生长等现象，因此纳米硒鲜海带的比例也是配制富硒海带饲料的关键。
上文所述的富硒海带饲料,优化条件下,按纳米硒鲜海带为I. OOmg Ikg的比例将纳米硒稀释液喷洒到鲜海带上。本发明的另一方面在于，提供一种养殖富硒鲍鱼的方法，其上文所述的富硒海带饲料饲养鲍鱼。上文所述的养殖富硒鲍鱼的方法，优化条件下，其具体饲养方法包括①取浓度0. 50mg/mL粒径100 140nm红色纳米硒溶液30. OmL,加水970mL稀释均匀后，分别全部均匀喷洒在15kg条状或浆料鲜海带的表面，海带放置1-2天晾干后，获得富硒海带；加工海带为5 IOcmX 5 IOcm条形，为条状海带；用齿爪式粉碎机碎成小于0. 5cm2海带片，为浆料海带；②利用步骤①获得的富硒海带饲养鲍鱼120 180天，饲养条件为室内水泥养殖池中，池底铺入养殖鲍附着板，投加鲍鱼3000只/15m2，池中放满经沉淀、过滤处理后的清洁海水，海水含盐量30%。、？11为7. 8 8. 2 ;溶解氧6 8mg/L ;在养殖过程中水温保持在10-24°C，毎日16-17时投喂饲料；投料量为鲍鱼总体重的10%，次日 9-11时更换养殖海水，冲刷池壁。本文所述及的上述饲养富硒鲍鱼的方法，也可广泛的应用于生产富硒海參、富硒鱼或富硒虾等方面。本领域技术人员可以通过结合现有技术或公知常识，向海參、鱼、虾等的饵料中投加纳米硒I. 00-1. 50mg/kg,晾干后，按不同的投料比，喂养海參、鱼、奸等，即得含硒量 0. 50-1. 00mg/kg的富硒海參、富硒鱼和富硒奸,等等。由于提高了抗氧化免疫力，降低发病率，所以可減少或者不加抗生素药物的使用量，同时也提高5-15%产量，在具体的生产应用中，其经济效益增长显著。本发明的有益效果是(I)在纳米硒投加量0. 50-2. 00mg/kg,条状和浆料海带的富硒商品鲍鱼含硒量分别0. 205-0. 706mg/kg和0. 282-0. 781mg/kg,而对照组条状和浆料海带的商品鲍鱼含硒量分别为0. 132-0. 166mg/kg和0. 175-0. 202mg/kg,富硒商品鲍鱼含硒量是对照组商品鲍鱼的I. 6-5. 8倍和I. 6-4. 6倍，属于富硒鲍鱼，且符合国家食品中硒限量卫生标准 (GB13105-91)硒含量彡1.00mg/kg的要求，为人们提供安全补硒的商品鲍鱼。(2)养殖富硒商品鲍鱼过程其体内SOD活力、GPX活力不断増加，分别是对照组 (条状和浆料海带)的2. I倍和I. 9倍、I. 4倍和I. 3倍，说明自身的抗氧化免疫カ提高，成活率上升。富硒条状海带成活率从85. 0%上升到91. 3%，富硒浆料海带成活率从88. 5%上升到92. 7%，增重率分别上升到19. 6%和21. 53%，是对照组的I. 3倍和I. 4倍，其经济效益是相当可观的。(3)富硒商品鲍鱼养殖方法简便，具有可操作性，节省能耗、原材料、エ序，经济效果可观。(4)纳米硒使用安全性高,纳米硒海带加工、操作、控制硒浓度、使用方法简单方便；饲养鲍鱼吸收性好，没有环境污染问题。(5)也可用于富硒海參、珍贵鱼虾等的生产。(6)富硒鲍鱼不是通过在繁殖环境中加入抗病药物，而是通过提高鲍鱼自身抵抗
5力，存活率，利于食品安全、环境污染的治理或者根治。
具体实施例方式下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。本发明实施例中所提及的“红色液体纳米硒”是指购于大连理工大学化工学院的纳米硒产品(电话0411-83020358)，其制备方法是，按照发明专利ZL200810011963. 6中的，实施例I中的“纳米硒有机生物中间体”的方法制备(即，按照原专利授权文本中，说明书第9页
行所列表格中的原料配比，
的方法制备)；本产品的粒径为100 140nm,使用前配制成浓度为纳米硒的浓度为0. 50mg/mL的液体。SOD活力測定方法依据下述參考文献中的方法完成邹国林等.ー种SOD的测活方法。生物化学和生物物理进展，1986，4 :71-73.GPX活力测定方法依据下述參考文献中的方法完成Bell，J. G. et, 1985. Some eii'ects of vitamin E and selenium deprivation on tissue enzyme levels and indices of tissue peroxidation in rainbow trout(Salmon gairdneri). Br. J. Nutr. 53 :149-157.含硒量的测定依据GB5009. 93-2010的方法。下述实施例中所述的鲍鱼的养殖环境均按如下要求执行养殖环境将自养的半成品鲍鱼(皱纹盘鲍)，平均壳长6 7cm，重50g左右，放在大连市旅顺ロ区北海街道的大连善水海产有限公司室内养殖基地的水泥池中，池底面积 15m2，每池底铺入养殖鲍附着板。投加上述半成品鲍鱼3000只，约150kg，这样每池为一組， 平均分成3格。池中放满经沉淀、过滤处理后的清洁海水，含盐量30%。、？11为7. 8 8. 2.在养殖过程中水温保持在10-24°C，溶解氧6 8mg/L。每日16-17时投喂饲料。投料量为鲍鱼总体重的10%，即每格4-5kg，可根据摄食情况进行调整。次日9-11时更换养殖海水，冲刷池壁。养殖天数为120-180天。在相同的养殖环境中，用不同的饲料喂养鲍鱼，饲料分如下几种(I)对照组饲料鲜海带条状饲料鲜海带,条形,5 IOcmX 5-10cm ;称为条状海带；即，Control I组。鲜海带浆料饲料取鲜海带，用齿爪式粉碎机碎成小于0. 5cm2海带片；称为浆料海带；即，Control 2组。(2)实验组饲料按照“纳米硒海带=0. 50 2. OOmg 1kg”的比例将稀释后的红色液体纳米硒喷洒在鲜海带(分为条状海带、浆料海帯)表面，放置1-2天晾干，即制得含不同剂量纳米硒的海带饲料，备用。喷洒前，对红色液体纳米硒按多个不同的比例加水稀释；其目的是摸索稀释浓度对喂养的富硒鲍鱼各项特征指标的影响，即稀释浓度相对较高的组，喷洒在海带表面不均匀，局部浓度过高；稀释浓度相对较小的组，纳米硒在海带表面吸着力小，当投入养殖池中纳米硒容易从海带表面释放到水中，不利于鲍鱼摄取纳米硒，所以各项特征值偏低。因此，即使在海带与纳米硒比例一定的情况下，由于喷洒前稀释纳米硒的稀释浓度不同，也会导致饲喂鲍鱼效果的差异。下面结合具体实施例对本发明做进ー步说明下表为各实施例中，含不同剂量纳米硒的稀释方法和富硒海带饲料的制备方法
权利要求
1.一种养殖富硒鲍鱼的富硒海带饲料，其特征在于，通过以下步骤制备向粒径为 100 140nm、浓度为O. 50mg/mL的红色纳米硒溶液中，加7 100倍体积的水，制得纳米硒稀释液，再按纳米硒鲜海带为O. 50 2. OOmg Ikg的比例，将全部稀释液均匀喷洒在条状或浆料状的鲜海带上，海带晾干后制成。
2.根据权利要求I所述的富硒海带饲料，其特征在于，纳米硒稀释液按红色纳米硒溶液与水的体积比为I : 16 67制得。
3.根据权利要求2所述的富硒海带饲料，其特征在于，纳米硒稀释液按红色纳米硒溶液与水的体积比为I : 30 35制得。
4.根据权利要求3所述的富硒海带饲料，其特征在于，纳米硒稀释液按红色纳米硒溶液与水的体积比为30 970制得。
5.根据权利要求1、2、3或4中任一项所述的富硒海带饲料,其特征在于,按纳米硒鲜海带为O. 80 I. 20mg Ikg的比例将纳米硒稀释液喷洒到鲜海带上。
6.根据权利要求5所述的富硒海带饲料，其特征在于，按纳米硒鲜海带为 I. OOmg Ikg的比例将纳米硒稀释液喷洒到鲜海带上。
7.一种养殖富硒鲍鱼的方法，其特征在于，利用权利要求I所述的富硒海带饲料饲养鲍鱼。
8.根据权利要求7所述的养殖富硒鲍鱼的方法，其特征在于，具体饲养方法包括①取浓度O.50mg/mL粒径100 140nm红色纳米硒溶液30. OmL,加水970mL稀释均勻后，全部均匀喷洒在15kg条状或浆料的鲜海带表面，海带晾干后，获得富硒海带；②利用步骤①获得的富硒海带饲养鲍鱼120 180天，饲养条件为室内养殖水泥池中，池底铺入养殖鲍附着板，投加鲍鱼3000只/15m2，池中放满经沉淀、 过滤处理后的清洁海水，海水含盐量30%。、pH为7. 8 8. 2 ;溶解氧6 8mg/L ;在养殖过程中水温保持在10-24°C，每日16-17时投喂饲料；投料量为鲍鱼总体重的10%，次日9_11 时更换养殖海水，冲刷池壁。
9.如权利要求7所述的方法在生产富硒海参、富硒鱼或富硒虾方面的应用。
全文摘要
本发明公开一种含纳米硒的海带饲料养殖富硒鲍鱼的方法，其将粒径100～140nm的、浓度为0.50mg/mL的红色纳米硒溶液，加水440～1485mL稀释均匀后，喷洒在海带饲料上，每kg海带饲料中投加纳米硒的量为0.50～2.0mg，养殖120～180天，富硒商品鲍鱼的壳长、体重、SOD、GPX、含硒量、成活率和增重率均比对照组明显增大。此外，对纳米硒投加量、稀释浓度、海带饲料的形状、养殖的天数等参数进行对比试验，进一步确认养殖富硒商品鲍鱼的最佳方法。此方法也适用于生产富硒海参、鱼和虾。
文档编号A23K1/14GK102599374SQ20121007895
公开日2012年7月25日 申请日期2012年3月23日 优先权日2012年3月23日
发明者吴敦富, 吴敦虎, 田福平 申请人:吴敦虎, 李万玉