专利名称：一种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质—槲皮素含量的方法
技术领域：
本发明的目的是为了提供ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法。本发明的技术原理
通过利用磁场物理手段，在荞麦籽粒萌发过程中，激发苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮异构酶(CHI)等内源性酶活性，从而提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量。
背景技术：
荞麦是我国特有的药食两用的双子叶植物，荞麦中含有蛋白质、B族维生素、槲皮素等生物活性物质、矿物营养素及植物纤维素等。槲皮素等生物活性物质是ー种很强的抗氧剂，可有效清除肌体内的氧自由基，可以帮助人体改善血液循环，提高免疫力，对预防糖尿病、高血脂、高血压具有重要作用。目前，提高槲皮素等生物活性物质含量的技术主要有对荞麦籽粒进行萌发处理的技术，并无在萌发前通过磁场诱导处理等技术相结合的综合技木，因而限制了槲皮素等生物活性物质的含量増加。磁化处理是种子加工过程中为进ー步提高种子发芽力而采用的ー种物理手段。国内外已对水稻、小麦、大豆、玉米、油菜以及许多蔬菜作物的种子进行过磁化研究，均证实磁场有利于促进种子发芽，提高发芽势和发芽率，但对于槲皮素等生物活性物质的含量影响尚无相关研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种在提高荞麦籽粒发芽カ和活力的同时，有效提高槲皮素等生物活性物质形成过程中重要的两种酶(苯丙氨酸解氨酶、查尔酮异构酶)的比活力，进而提高荞麦芽中槲皮素等生物活性物质含量的方法，以满足荞麦功能性食品加工的要求。本发明的技术方案
ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法，即首先采用磁场对荞麦籽粒进行诱导处理，再将诱导处理后的荞麦籽粒萌发7天，即得到含有较高生物活性物质ー槲皮素含量的荞麦芽；
上述的磁场的磁场强度优选为O. 2T O. 6T,诱导处理时间优选为30min ；
上述的荞麦籽粒萌发条件优选控制温度28°C、湿度85%。上述的ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法，具体包括如下步骤
(1)、荞麦籽粒的预处理 采用清水淘洗荞麦籽粒以去除不饱满籽粒和病虫籽粒，再以35°C温水浸种24h，然后用清水冲洗2-3次后浙干水分；
(2)、将步骤(I)经预处理并浙干水分的荞麦籽粒置于强度为O.2T O. 6T的磁场中诱导处理30min，然后在温度28°C、湿度85%条件下萌发7天，即得到含有较高生物活性物质一槲皮素含量的荞麦芽。本发明的有益效果
本发明的ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法，在提高荞麦籽粒发芽率和发芽势的同时，可以显著提高荞麦萌发过程中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮异构酶(CHI)的活性，进而显著提高荞麦芽中生物活性物质ー槲皮素的含量，尤其是经磁场强度为O. 4T处理 过的荞麦芽较没有经磁场处理的荞麦芽相比，其生物活性物质ー槲皮素含量提高了近23%。
具体实施例方式下面通过实施例对本发明进行阐述，但并不限制本发明。本发明实施例中荞麦芽萌发过程中的各种指标的测试方法如下
方法I :发芽势和发芽率的測定(《国际种子发芽规程》(ISTA))
发芽势(GE) = 土i X100%发芽率(GK 100%
'Mr M
式中=M1 —发芽势天数内的正常发芽粒数；
M2-全部正常发芽粒数；
M —供试种子粒数
方法2 :PAL、CHI粗酶液的提取(张必弦，胡小梅，朱延明等.野生大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在不同诱导条件下变化规律[J]·大豆科学，2011，30(4) :703-705，709.)
取样品I g液氮中研碎；加5 mL的O. I mol/L的硼酸硼砂缓冲液(pH 8. 8,内含I mmol/L的EDTA、5 mmol/L的巯基こ醇，1%的PVP，1%的甘油)，研磨成匀浆；12 000r/min，4°C离心20 min;取上清液(即为粗酶液)立即使用或者一 80°C保存备用。方法3:PAL活性的测定(Lister C E, Lancaster J E. Developmental changesm enzymes of flavonoia biosynthesis in the skins of red and green applecultivars [J]· Science of Food Agriculture, 1996, 71:313-320.)
按照酶粗提液0. 5mL、L-苯丙氨酸(0. Olmol じ1) I. 5mL、硼酸硼砂缓冲液3mL混合,作为待测样品(总体积为5mL)，用蒸馏水代替粗酶液与L-苯丙氨酸(0. Olmol じ1)、硼酸硼砂缓冲液进行混合，作为空白对照；将混合好的溶液用紫外分光光度计测定OD29tl值，并记录；将待测样品在30°C保温Ih用0. 2mL, 20%的HCl終止反应；再次用紫外分光光度计(上海菁华仪器科技有限公司754型紫外可见分光光度计)測定反应后的OD29tl值，并记录。按照每h每mL酶液在290nm处吸光值改变0. 01为I个酶活单位，换算PAL的活性。PAL 活性=-—~
1x0.5x0.01
方法 4 :CHI 活性的狈Ij定(Lister C Ej Lancaster J E. Developmental changes inenzymes of flavonoid biosynthesis in the skins of red and green apple cultivars[J]· Science of Food Agriculture, 1996， 71:313-320.)
取0. 75mL粗酶液加入2mL反应液(pH7. 4，0. 05M的Tris-HCL溶液，内含终浓度为7. 5mg/mL牛血清白蛋白)，然后加50uL，lmg/mL的羟基查尔酮溶液，在34 °C恒温反应30min,另取同量的粗酶提取液加入2mL反应液，沸水浴IOmin作为对照，用紫外分光光度计(上海菁华仪器科技有限公司754型紫外可见分光光度计)測定OD381处吸光值，按照每min每mL酶液在38Inm处吸光值变化O. 001为I个酶活单位，换算出CHI的活性。
权利要求
1.ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法，其特征在于首先采用磁场对荞麦籽粒进行诱导处理，再将处理后的荞麦籽粒萌发7天，即得含有较高生物活性物质ー槲皮素含量的荞麦芽。
2.如权利要求I所述的ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法，其特征在于所述的磁场的磁场强度为O. 2T O. 6T,所述的荞麦籽粒萌发条件为温度28°C、湿度85%。
3.如权利要求2所述的ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法，其特征在于所述的磁场诱导处理时间为30min。
4.如权利要求3所述的ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含 量的方法，其特征在于所述的磁场的磁场强度为O. 4T。
5.如权利要求1、2、3或4所述的ー种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质ー槲皮素含量的方法，其特征在于具体包括如下步骤 (1)、荞麦籽粒的预处理 采用清水淘洗荞麦籽粒以去除不饱满籽粒和病虫籽粒，再以35°C温水浸种24h，然后用清水冲洗2-3次后浙干水分； (2)、将步骤(I)经预处理并浙干水分的荞麦籽粒置于磁场強度中进行诱导处理，然后萌发，即得含有较高生物活性物质ー槲皮素含量的荞麦芽。
全文摘要
本发明公开了一种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质—槲皮素含量的方法。首先采用磁场对荞麦籽粒进行诱导处理，再将诱导处理后的荞麦籽粒萌发7天后即得含有较高生物活性物质—槲皮素含量的荞麦芽。本发明的一种利用磁场诱导处理提高荞麦芽生物活性物质—槲皮素含量的方法，在提高荞麦籽粒发芽率和发芽势的同时，可以显著提高荞麦萌发过程中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮异构酶(CHI)的活性，进而显著提高荞麦芽中生物活性物质—槲皮素的含量。
文档编号A01C1/00GK102640596SQ20121015686
公开日2012年8月22日 申请日期2012年5月21日 优先权日2012年5月21日
发明者刘宁, 吴维维, 周一鸣, 周小理, 孟晓晓, 崔琳琳, 方向 申请人:上海应用技术学院