专利名称：刚毛柽柳谷胱甘肽-s转移酶基因及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种谷胱甘肽S-转移酶GST基因及其应用，具体涉及一种从柽柳中克隆获得的能明显提高植物抗旱耐盐能力的柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因及其在培育抗旱耐盐植物中的应用。
背景技术：
谷胱甘妝S-转移酶(Glutathione S-transferases, GSTs)是植物体内一种重要的解毒酶，不仅能催化降解有毒的内源或异源代谢产物，降低这些物质导致的氧化损伤，而且同时具有GPX活性，能够直接清除细胞内的活性氧。目前，虽然已从多种植物中克隆获得了 GST基因，并证实该基因具有提高植物抗逆能力。但大部分都是从不抗逆的甜土植物克隆获得的，因此获得的基因的抗旱耐盐能力较差，且绝大部分抗旱耐盐相关基因都是来自于草本植物和微生物等，由于它们与木本植物的遗传差异，这些基因可能不能很好地提高木本植物的抗旱耐盐能力。柽柳是一种抗旱耐盐能力非常优良的木本盐生植物，能在含盐量I %的土壤上形成自然林，是进行抗旱耐盐基因克隆的理想材料。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从抗旱耐盐能力非常优良的柽柳中克隆获得一个能明显提高植物抗旱耐盐能力的刚毛柽柳(Tamarix hispida)谷胱甘肽-S转移酶基因及其应用，命名为ThGST基因，ThGST基因cDNA全长1048bp，基因序列如下
权利要求
1.刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因，其特征在于所述基因命名为ThGST基因，ThGST基因cDNA全长1048bp，基因序列如下GGGGGTAGAATCTTGGTTTTCTTCTCATCTGTAAACACTAAGCAGGCGGCTTGAGCGCTATGGAGGAAACGCCCAAGTCAGGGATGAAGCTGTATTCATATTGGAAGAGCACGTGCGCATGCCGTGTCCGTATCGCACTGAACTTGAAAGGGCTGAAGTATGAGTACAAGGCAGTGGATTTGCTTAAAGGGGAGCATCACAGTCCTGAGTTCAGTGAGCTAAATCCCCTAGGTTTTGTACCAGTGCTGGTCGATGAGGACATAGTACTTGCTGATTCGTTTGCCATCTTGATGTATATGGAGGAAAAGTATCCTGAACGGCCTTTGTTGCCTCAGGAGCTTCAGAGAAGAGCCATTAATTACCAGGCTGCAAATATCGTTTCCTCAAGCATACAGCCACATCAAAATCTAACCTTACTGAATTACATTGAAGAAAAGCTTGGTGCTGAAGAGATGTATTTATGGGCTCAAAATCAGATTAAGAAAGGTTTTTCTGCGCTGGAGAAGCTTTTGAGCAACCATGCTGGAAGATATGCTACTGGAGATGACATTGCACTGGCAGATGTCTTCCTGGCACCCCAGACTGATGCTGCAATTAAGACATATAACATTAACATGGATGAGTTCCCTCTGTTAAAGAGGTTGAACCATATGTACGGTGAAACACCAGCATTCCAGGATGCTATGCCGGAAAAGCAGCCAGATTCTCCCGACAATGTTAAATAAGGTACCGAGCTCGAATTTCCCCGATCGTTCAAACATTTGGCAATAAAGTTTCTTAAGATTGAATCCTGTTGCCGGTCTTGCGATGATTATCATATAATTTCTGTTGAATTACGTTAAGCATGTAATAATTAACATGTAATGCATGACGTTATTTATGAGATGGGTTTTTATGATTAGAGTCCCGCAATTATACATTTAATACGCGATAGAAAACAAAATATAGCGCGCAAACTAGGATAAATTATCGCGCGCGGTGTCATCTATGTTACTAGATCGGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCT。
2.根据权利要求I所述的刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因，其特征在于所述ThGST基因的cDNA序列编码的氨基酸序列包括221个氨基酸，氨基酸序列如下MEETPKSGMKLYSYWKSTCACRVRIALNLKGLKYEYKAVDLLKGEHHSPEFSELNPLGFVPVLVDEDIVLADSFALMYMEEKYPERPLLPQELQRRAINYQAANIVSSSIQPHQNLTLLNYIEEKLGAEEMYLWAQNQIKKGFSALEKLLSNHAGRYATCDDIALADVFLAPQTDAAIKTYNINMDEFPLLKRLNHMYGETPAFQDAMPEKQPDSPDNVK。
3.权利要求I所述刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因序列用于培育抗旱耐盐转基因植物品种。
4.根据权利要求3所述的刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因的应用，其特征在于所述植物为林木。
5.根据权利要求4所述的刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因的应用，其特征在于所述林木为杨树或白桦。
6.根据权利要求3所述的刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因的应用，其特征在于所述植物为拟南芥或烟草。
全文摘要
刚毛柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因及其应用，涉及一种谷胱甘肽S-转移酶GST基因及其应用。本发明的柽柳谷胱甘肽-S转移酶基因，cDNA全长1048bp，cDNA序列编码的氨基酸序列包括221个氨基酸，可用于培育抗旱耐盐转基因植物品种。将ThGST基因转入模式植物拟南芥中，转基因T3代拟南芥种子在100mM NaCl胁迫后平均发芽率是非转基因野生型的4.6倍，平均根长是非转基因对照的1.6倍，平均鲜重是2.36倍。300mM甘露醇胁迫后转基因拟南芥的平均发芽率是非转基因对照的3.4倍，平均根长比对照增加18～90%，鲜重增加14～42%，具有明显的抗旱耐盐能力，是用于林木基因工程育种的优良基因。
文档编号A01H5/00GK102766642SQ20121023380
公开日2012年11月7日 申请日期2012年7月6日 优先权日2012年7月6日
发明者杨桂燕, 王玉成, 王超, 高彩球 申请人:东北林业大学