一种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术的制作方法
【专利摘要】本发明公开一种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术，其方法包括培育杂交冬虫夏草真菌：a、采集新鲜冬虫夏草，分离得到优良虫草菌株，其菌号为虫草拟青霉和虫草头孢霉；b、将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫草菌株进行筛选、训化、培养，使其改变生理性能；c、将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫草菌株进行原生质体融合即杂交；d、采用健康细胞繁殖法，将健康细胞导入循环育种过程中，剔劣留优，培育出纯壮的虫草菌丝体备用；本发明摆脱了虫源，便于在虫源较少的地区推广，生长周期短，从接种发菌到虫草成熟，共培育40天即可采收，培育工艺简单、成本较低，效益高。
【专利说明】一种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术，属于用杂交冬虫夏草真菌感染大米固体培养基或琼脂、葡萄糖半固体培养基进行人工培育生长虫草的生物工程【技术领域】。
【背景技术】
[0002]目前，市场上现有的冬虫夏草，其技术要点是:1、首先培育冬虫夏草纯壮菌种:采集野生鲜冬虫夏草，用组织分离法获得虫草菌种，采用健康细胞繁殖法扩接菌种并保存备用；培育用于感染虫体的斜面母种和液体菌；2、选用易感染菌的寄主虫或代寄主虫，并喷菌液感染虫体；3、在发菌阶段和长草阶段模拟野生虫草生长条件进行培植。上述技术虽然能够培育出具有完整外形的冬虫夏草以解决天然冬虫夏草的资源紧缺和供求矛盾，但是在寄主虫源或代寄主虫源较少的地区推广有一定的困难。另外，它的生长周期较长，共需260天。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种具有培育工艺简单、生长周期短，摆脱了虫源的人工培育的冬虫夏草快速栽培技术。
[0004]为了实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案为:一种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术，其方法为:1、培育杂交冬虫夏草真菌:a、采集新鲜冬虫夏草，分离得到优良虫草菌株， 其菌号为虫草拟青霉和虫草头孢霉山、将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫草菌株进行筛选、训化、培养，使其改变生理性能；C、将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫草菌株进行原生质体融合即杂交；d、采用健康细胞繁殖法，将健康细胞导入循环育种过程中，剔劣留优，培育出纯壮的虫草菌丝体备用；
[0005]2、将纯壮的虫草菌丝体接种感染大米固体培养基或琼脂、葡萄糖半固体培养基上，并培育无虫体虫草。虫草的培育方法是模拟野生冬虫夏草的生育条件，进行人工培育，在接种后的发菌期，室温控制在20~28°C，室内光线暗些，勤通风换气，发菌期为15~20天;
[0006]当菌丝长满培养基时，即改为在变温条件下培养，白天室温控制在26~28V,夜间室温控制在4~6°C，室内光线为散射光，勤通风保持空气清新，培养5~7天即长出子座，10天后小草丛生，小草长半寸高时，其色泽由乳白色变为黄褐色，开始散发孢子即成熟，从接种到虫草成熟共40天即可采收。
[0007]所述的大米固体培养基各组分的重量份数比为:大米1000，蚕蛹粉> 2 ;大米固体培养基的制作方法为:将大米煮熟，浙净水份，拌入蚕蛹粉，然后分装在容器内，容器内培养基的厚度为3~4厘米，用聚丙烯塑料布将容器口封住，进行消毒。
[0008]所述的琼脂、葡萄糖半固体培养基各组分的重量份数比为:琼脂20，蚕蛹粉2，葡萄糖30，蛋白胨3，酵母浸膏1，磷酸二氢钾1，硫酸镁0.5，生长素1，无菌水1000 ；PH值自然；琼脂、葡萄糖半固体培养基的制作方法同常规制菌法中的制作方法。
[0009]本发明的有益效果如下:1、摆脱了虫源，便于在虫源较少的地区推广应用。2、生长周期短，从接种发菌到虫草成熟，共培育40天即可采收。3、培育工艺简单、成本较低，效益闻。
【具体实施方式】
[0010]一、培育杂交冬虫夏草真菌:a.采集新鲜冬虫夏草，分离得到优良虫草菌株，其菌号为虫草拟青和虫草头孢霉；b.将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫草菌株进行筛选‘、训化、培养，使其改变生理性能将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫草菌株进行原生质体融合即杂交；d.采用健康细胞繁殖法，将健康细胞导入循环育种过程中，剔劣留优，培育出纯壮的虫草菌丝体备用。
[0011]二、配制大米固体培养基及琼脂、葡萄糖半固体培养基:
[0012]按下列配比称取大米固体培养基各组分:大米100g,蚕蛹粉2g或3g ;大米固体培养基的制作方法为:将大米煮熟，浙净水份，拌入蚕蛹粉，然后分装在容器内，容器内培养基的厚度为3~4厘米，用聚丙烯塑料布将容器口封住，进行消毒。
[0013]按下列配比称取琼脂、葡萄糖半固体培养基各组分:琼脂20g，蚕蛹粉2g，葡萄糖30g,蛋白胨3g,酵母浸膏Ig,磷酸二氢钾lg，硫酸镁0.5g,
[0014]生长素Ig,无菌水 1000ml ;PH值自然；琼脂、葡萄糖半固体培养基的制作方法同常规制菌法中的制作方法。
[0015]三、将纯壮的虫草菌丝体接种感染大米固体培养基或琼脂、葡萄糖半固体培养基上，并培育无虫体虫草。
[0016]虫草的培育方法是模拟野生冬虫夏草的生育条件，进行人工培育，在接种后的发菌期，室温控制在20~28°C，室内光线暗些，勤通风换气，发菌期为15~20天；当菌丝长满培养基时，即改为在变温条件下培养，白天室温控制在26~28°C，夜间室温控制在4~6°C，室内光线为散射光，勤通风保持空气清新，培养5~7天即长出子座，10天后小草丛生，小草长半寸高时，其色泽由乳白色变为黄褐色，开始散发孢子即成熟，从接种到虫草成熟共40天即可采收。
【权利要求】
1.一种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术，其方法为:1、培育杂交冬虫夏草真菌:a、采集新鲜冬虫夏草，分离得到优良虫草菌株，其菌号为虫草拟青霉和虫草头孢霉山、将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫 草菌株进行筛选、训化、培养，使其改变生理性能；C、将虫草拟青霉和虫草头孢霉两个虫草菌株进行原生质体融合即杂交；d、采用健康细胞繁殖法，将健康细胞导入循环育种过程中，剔劣留优，培育出纯壮的虫草菌丝体备用。
2.根据权利要求1所述的一种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术，所述的大米固体培养基各组分的重量份数比为:大米1000，蚕蛹粉> 2 ;大米固体培养基的制作方法为:将大米煮熟，浙净水份，拌入蚕蛹粉，然后分装在容器内，容器内培养基的厚度为3~4厘米，用聚丙烯塑料布将容器口封住，进行消毒。
【文档编号】A01G1/04GK104025900SQ201310068907
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2013年3月5日 优先权日:2013年3月5日
【发明者】王云飞 申请人:王云飞