一种动物用饲料脱霉剂及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种动物用饲料脱霉剂及其制备方法和应用，该脱霉剂按质量份数计包含以下组分：枯草芽孢杆菌50～150份，嗜酸乳杆菌冻干粉5～15份，亚硒酸钠0.1～1份，维生素E25～55份，饲用活性干酵母100～300份，葡甘露聚糖5～15份，蒙脱石50～150份和改良水合硅铝酸盐350～700份。本发明所制备的脱霉剂绿色无污染，对各种常见的霉菌毒素均有极强的吸附力，并形成稳定的复合物，不被肠道吸收，随粪便排出体外。本发明的脱霉剂不但能够脱毒，还能够抑制霉菌的生长，并提高动物免疫力和促进动物生长。
【专利说明】一种动物用饲料脱霉剂及其制备方法和应用
【技术领域】:
[0001]本发明涉及一种绿色、安全微生物脱霉制剂的研制，具体涉及一种动物用饲料脱霉剂及其制备方法和应用，该脱霉剂包含改良水合硅铝酸盐、维生素E、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、葡甘露聚糖和饲用活性酵母等，拌料使用，适用于各种家禽和家畜，并命名为“美托
由，，
康
技术背景:
[0002]霉菌毒素是霉菌在生长过程中产生的一系列有毒代谢产物，主要有黄曲霉毒素BI (AFBl)、玉米赤霉烯酮(ZON)、脱氧雪腐镰刀菌醇(DON)、赭曲霉毒素A (OTA)和伏马菌素Bl(FMBl)等，广泛污染各种饲料及原料，危害着养殖的发展，带来巨大的经济损失。据联合国粮农组织估计，每年全世界有25%的粮食作物受到毒素的污染，由此造成的经济损失每年达数千亿美元。据2010年不完全统计，仅在中国，霉菌毒素就给养猪业造成高达50亿元的经济损失。江苏省地处长江中下游，每年的梅雨季节时间长、气温高，储存的饲料和饲料原料都容易发生霉败。
[0003]动物食入含有真菌毒素的饲料或食品后会引起中毒，会引起精神不振、生长发育缓慢、消瘦、食欲大减而喜饮、排粪频繁、稀软、甚至腹泻、脱水，共济失调、肌肉震颤、乃至休克而死亡，并且死亡率较高。其中危害最大的是真菌毒素的免疫抑制而引起的免疫失败，造成疾病的流行和重大的经济损失。下面主要介绍两种毒素对于动物的影响。
[0004]黄曲霉毒素是曲霉属真菌分泌的一类强致癌、致突变物质，由黄曲霉和寄生曲霉、
A.nomius和A.pseudotamarii四种真菌产生。黄曲霉毒素目前已分离鉴定出20余种异构体，其中已经分离鉴定出的有B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、黄曲霉毒醇等10多种。常见的主要为前5种，其毒性大小的排列顺序为:B1>M1>G1>B2>G2。产毒黄曲霉只产生B1、B2两种毒素，但大部分寄生曲霉都能产生以上6种毒素。黄曲霉毒素具有诱导突变、抑制免疫和致癌作用，其中危害最大的为黄曲霉毒素BI，其毒性为氰化钾的10倍、砒霜的68倍，黄曲霉毒素极易在玉米、花生、棉子及其饼柏等动物性饲料存在。黄曲霉毒素能抑制细胞DNA、mRNA以及蛋白质的合成，还可以导致染色体异常，微核的产生、姐妹染色单体的交换、DNA的无序合成、染色体链的断裂，以及在人类和啮齿类细胞中形成加合物。
[0005]由于黄曲霉毒素的主要靶器官为肝脏，动物摄入后肝脏中浓度最高，可引起畜禽急、慢性肝中毒或诱发原发性肿瘤，尤其是肝癌，并引发其它器官如肾、肺、胃、肠等产生癌变。黄曲霉毒素对家畜造成的影响为生长迟缓、饲料率下降、黄疸、被毛粗糙、低蛋白血症、抑郁、厌食、急性肝病、肝癌、免疫抑制等。对家禽造成的影响为法氏囊和胸腺萎缩、皮下出血、免疫反应差、抵抗力下降、疫苗失败、对疾病感受态提高、蛋变小、蛋黄重量降低、受精率、孵化率降低、胚胎死亡增加。因黄曲霉毒素毒性极强、不易破坏，所以去除饲料中的黄曲霉毒素越来越弓I起人们的关注。
[0006]赭曲霉毒素对家畜的影响为攻击肾脏、免疫系统及造血系统，肝脏变的脆弱，轻度肾脏病变，增重下降、剧渴、生长迟缓、氮血症、多尿、下痢、糖尿症。对家禽造成的影响为抑制肾脏，免疫及造血系统，钙磷吸收不全，骨骼脆弱，蛋壳钙化不全，破蛋率高，皮下出血，容易挫伤。
[0007]然而要解决真菌毒素的污染问题要从多方面着手:一、是培养抗真菌毒素的饲料品种；二、做好收获和储存工作，一般要求饲料中水分低于10% ;三、是采用物理，化学或者是生物的方法对污染的饲料进行脱毒，提高饲料的利用率。在实际生产中不管饲料是否发生霉变，都要加入一定的脱毒剂。
[0008]国内对真菌毒素的脱毒方法研究较晚，系统性的认识尚未普及。经过多年的发展取得了一定的成果，方法包括物理方法、化学方法、生物方法等。物理的方法:人工挑拣发霉谷物，紫外线灭活真菌毒素，吸附脱毒法和热灭活等；化学的方法:氨化灭活等；生物学的方法:发酵脱毒、微生物失活真菌毒素和酶制剂脱毒等。虽然方法有很多，但是要考虑大生产以及实际操作的简便性问题，可用的有物理吸附脱毒和生物脱毒。
[0009]吸附脱毒法是比较经济、有效和具有现实意义的方法。吸附脱毒法是通过吸附剂吸引真菌毒素的极性官能团，将它们吸附、捕获和固定，阻止机体对毒素的吸收，从而降低毒素对机体的危害和毒素在农产品中的残留。吸附脱毒法已在生产实践中得以较大范围推广，目前市场上出现了各种各样的天然或人工合成的真菌毒素吸附剂。现有技术中常用的吸附剂有水合硅铝酸钙钠盐(HSCAS)、蒙脱石、膨润土、粘土、沸石和活性炭等。但是采用现有的脱霉剂存在以下技术问题:常规的脱霉剂只是着眼于霉菌毒素的脱出，而忽略了对霉菌生长的抑制，脱霉剂吸附有饱和与不彻底的时候，因此治标不治本。
【发明内容】
:
[0010]本发明的目的在于提供一种动物用饲料脱霉剂。
[0011]本发明的另一目的在于提供一种动物用饲料脱霉剂的制备方法。
[0012]本发明的又一目的在于提供一种动物用饲料脱霉剂的应用。
[0013]本发明的目的通过以下技术方案实现:
[0014]一种动物用饲料脱霉剂，该脱霉剂按质量份数计包含以下组分:枯草芽孢杆菌(CICC20872)50?150份，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074)5?15份，亚硒酸钠0.1?I份，维生素E25?55份,饲用活性干酵母100?300份,葡甘露聚糖5?15份,蒙脱石50?150份和改良水合硅铝酸盐350?700份。
[0015]优选的:该脱霉剂中各组分的含量为:枯草芽孢杆菌(CICC20872)70?130份，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074) 7?13份，亚硒酸钠0.2?0.8份，维生素E30?50份，饲用活性干酵母140?260份，葡甘露聚糖7?13份，蒙脱石70?130份和改良水合硅铝酸盐400 ?650 份。
[0016]更进一步优选，该脱霉剂中各组分的含量为:枯草芽孢杆菌(CICC20872) 100份，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074)10份，亚硒酸钠0.55份，维生素E40份，饲用活性干酵母200份，葡甘露聚糖10份，蒙脱石100份和改良水合硅铝酸盐540份。
[0017]所述改良水合硅铝酸盐采用以下方法制备:将水合硅铝酸盐矿物，经过细碎机破碎并过筛得粒径为3?IOmm矿物，然后在玛瑙球磨罐上进行研磨，装载体积与罐体积比为1:1.5?3,采用干-湿球磨的方式,前25?35h采用干式球磨法研磨,后25?35h加入无水乙醇采用湿式球磨法研磨，研磨之后将样品烘干即得改良水合硅铝酸盐。[0018]上述无水乙醇的添加量为--每50g矿物加入10~20ml的无水乙醇。
[0019]所述的改良水合硅铝酸盐优选为改良水合硅铝酸钙钠盐。
[0020]上述的动物用饲料脱霉剂的制备方法，包括以下步骤:
[0021 ] (I)制备改良水合硅铝酸盐:将水合硅铝酸盐矿物，经过细碎机破碎并过筛得粒径为3~IOmm矿物，然后在玛瑙球磨罐上进行研磨，装载体积与罐体积比为1:1.5~3，采用干-湿球磨的方式，前25~35h采用干式球磨法研磨,后25~35h加入无水乙醇采用湿式球磨法研磨，研磨之后将样品烘干即得改良水合硅铝酸盐；
[0022](2)将枯草芽孢杆菌(CICC20872)，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074)，亚硒酸钠，维生素E，饲用活性干酵母，葡甘露聚糖，蒙脱石和步骤(I)制备的改良水合硅铝酸盐按比例混合。
[0023]上述的制备方法，其在于所述无水乙醇的添加量为:每50g矿物加入10~20ml的
无水乙醇。
[0024]上述的动物用饲料脱霉剂在动物饲料中的应用。
[0025]上述脱霉剂中的枯草芽孢杆菌(CICC20872)的含量为I X 101(lCfu/g，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074)的含量为2X101°cfu/g，维生素E为 500IU/g。
[0026]本发明研制的是一种绿色、安全的微生物脱霉剂。该脱霉剂在饲料中的添加量为
0.05%~0.2%,即I吨的饲 料中添加0.5~2kg脱霉剂。
[0027]本发明脱霉剂的配方主要有两大类组分构成，一是能够直接吸收霉菌毒素的成分包括葡甘露聚糖、蒙脱石、改良水合硅铝酸盐；第二类是能够抑制霉菌生长以及调节动物肠道的菌群和微量元素包括枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、亚硒酸钠、维生素E。其中配方中的饲用活性酵母兼具吸附和调节动物肠道促进生长双重作用。
[0028]葡甘露聚糖、蒙脱石和改良水合硅铝酸盐中的每一种物质都具有吸附霉菌毒素的作用，但是其吸附效果和吸附霉菌毒素的种类有限，但是发明人将以上四种具有脱霉功能的成分组合在一起，会产生协同增效作用，可吸附绝大多数的霉菌毒素且其吸附效果显著增加。
[0029]为了更好的发挥水合硅铝酸盐的作用，对天然硅酸盐材料进行改良处理，不仅使孔隙增加，增加了吸附的面积，还增加了其吸附的速度。
[0030]吸附剂能够脱霉，但是不能够抑制霉菌的生长，不能抑制毒素的产生，为了从源头控制，我们加入了饲料可以应用的微生物。这两种细菌进入体内之后迅速生长，改变肠道环境，抑制各种病原菌的生长，同时产生各种酶、酸和维生素帮助动物消化和吸收。同时处方中加入了饲用活性酵母、亚硒酸钠和维生素E，用于缓解动物的不良反应，提高其免疫力。
[0031]本处方是一个有机整体，不能看单一的某种组分的功能，组方中去除任何一种组分，都会破坏整体。此处方不仅能够脱除各种霉菌毒素，还能够促进动物的生长。该处方中的各组分具有协同增效的作用。其脱毒、抑制霉菌的生长和提高动物免疫力促进动物生长的综合效果均显著高于各组分单独使用的效果之和。
[0032]本发明处方中添加的葡甘露聚糖、蒙脱石和改良水合硅酸铝盐对各种常见的霉菌毒素如黄曲霉毒素、褐曲霉毒素、烟曲霉毒素、棒曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐霉素、T-2毒素及腐马素等均有极强的吸附力，并形成稳定的复合物，不被肠道吸收，随粪便排出体外。
[0033]蒙脱石、膨润土、粘土等铝硅酸盐矿物作为非营养性添加剂，已经被大量用于饲料中真菌毒素的吸附。关于铝硅酸盐吸附真菌毒素毒性的机理，一般认为是由于铝硅酸盐吸附了真菌毒素并形成了稳定复合物，阻止了真菌毒素在动物消化道中的吸收，因而减少了进入动物机体内的毒素量，使其毒性减轻或消除。这些铝硅酸盐矿物材料具有孔隙多、表面积大和离子交换能力强等特性，对真菌毒素具有一定的吸附作用。然而这些普通的铝硅酸盐材料吸附能力有限，且选择性较差。如提取自沸石的水合硅铝酸钙钠盐(HSCAS)对黄曲霉毒素BI有较好的选择性吸附能力，但对其它几种主要的真菌毒素吸附能力不是太好，如对ZON、OTA、T-2及DONN的吸附效果不佳。HSCAS吸附剂的另一个缺点是它对维生素及矿物盐具有一定的吸附能力。
[0034]为了克服以上缺点，我们实验研究后发现，通过应用纳米技术对HSCAS进行改性后可以提高HSCAS对非极性毒素的吸附作用和选择性吸附能力。经改性后的HSCAS纳米复合物孔径增大且分布规则，比表面积增大，大大提高了其对被吸附物质的吸附选择性、专一性和高效性。这种新型纳米复合物能高效吸附饲料中的真菌毒素，阻止其通过吸收途径进入体内，并从粪便中排出体外，从而降低毒素在动物体组织中的残留，减轻毒素对动物生长的不良影响。
[0035]伊枯草菌素是由枯草杆菌产生的一大类脂肽类化合物，家族成员包括Iturin A、
B、C、D、E,芽孢菌素(Bacillomycin)D、F、L以及抗霉枯草菌素(Mycosubtilin)等。它们都是由7个氨基酸残基组成的一个肽环，和β -氨基脂肪酸支链组成的两性化合物，它们对大多数的致病酵母和霉菌具有强烈的抗菌能力。枯草芽孢杆菌可以产生芽孢霉素D，抑制黄曲霉菌产生黄曲霉毒素。枯草芽孢杆菌产生的抑菌物质具有较好的耐热性，若能将其分泌的活性物质进行纯化和鉴定，并将其活性物质用于黄曲霉毒素污染的控制，将给农作物的生产带来巨大的效益。
[0036]在储藏过程以枯草芽孢杆菌以孢子形式存在，处于体眠期，不消耗饲料的营养成分，不影响饲料品质，使饲料的质量得到保证。枯草芽孢杆菌不仅可以抑制霉菌毒素的产生，还对动物生长具有很多促进作用。
[0037]芽孢杆菌在肠道内迅速萌发转变为具有新陈代谢作用的营养型菌体，消耗大量的氧气，维持肠道严氧环境。芽孢杆菌能产生胃蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性、能降解木聚糖、羟甲基纤维素、多聚半乳糖醛酸及其他一些复杂的植物性碳水化合物，分泌有机酸促进有益菌的繁殖等，所以芽孢杆菌是一种预防腹泻的饲料添加剂。此外还能减少臭气的排放。
[0038]酵母也可以吸附真菌毒素，在酸性条件下酵母对赭曲霉素的吸收效果较好。酵母细胞壁的吸附力尤其明显，因为细胞壁中丰富的肽聚糖、蛋白质和脂类，为吸收真菌毒素提供了种类多样、机制不同的吸附中心。酿酒酵母中的Ρ450能结合黄曲霉毒素，能有效地降低B1、B2、G1、G2的含量。
[0039]嗜酸乳杆菌产生乳酸及醋酸，能分泌蛋白酶，促进蛋白质的消化吸收。可提高胃内食物的预消化，提高钙、磷、铁的利用率和维生素D的吸收；还可产生抗菌素，如嗜酸菌素、嗜酸乳菌素和乳酸杀菌素。产生的大量维生素B群能促进神经细胞的发育。
[0040]因此本发明利用以上几种成分制作了一种绿色无污染的脱霉剂。
[0041]本发明脱霉剂的一个特点就是有多种具有吸附各种毒素功能的组分构成，能够吸附常见的毒素。本发明脱霉剂的另一个特点就是加入了多种活性菌，这些细菌不仅能够抑制霉菌的生长，更重要的是其分泌物能够促进动物的生长，调节肠胃功能，增强动物的免疫力。这些细菌都是从工业微生物保藏中心购买，可以直接应用到饲料中。
[0042]本发明的有益效果:
[0043]本发明所制备的脱霉剂绿色无污染，对各种常见的霉菌毒素均有极强的吸附力，并形成稳定的复合物，不被肠道吸收，随粪便排出体外。本发明的脱霉剂不但能够脱毒，还能够抑制霉菌的生长，并提高动物免疫力和促进动物生长。
【具体实施方式】:
[0044]实施例1制备动物用饲料脱霉剂
[0045]制备改良水合硅铝酸钙钠盐:首先将水合硅铝酸钙钠盐矿物(购自美国密尔白有限公司，有效含量95%以上)经过细碎机进行破碎(上海维沃强力颚式破碎机PEW180X 1300)然后过筛得到3~IOmm的矿物，然后在玛瑙球磨罐(南京桑力电子设备厂生产QM-4H球磨机)上进行研磨，装载与罐体积比为1:2，采用干一湿球磨的方式，前30h采用干式球磨法(转速为200r/min)研磨，后30h采用湿式球磨法研磨，方法同干式球磨法，只是研磨时加入12~15ml的无水乙醇(每50g矿物加入的量)，研磨之后将样品烘干。采用日本电子2000F型透射显微镜观察研磨的颗粒，发现IOOnm的颗粒占78%，100~150nm的占7%，> 150nm的占15%。此发法可以使达到纳米级别的颗粒占到85%以上，因此此方法可以制备纳米级的颗粒，即改良水合硅铝酸钙钠盐。
[0046]按以下用量称取各物质并进行混合:枯草芽孢杆菌(CICC20872) IOOg (含量为1父101°0扣/^)，嗜酸乳杆菌冻干粉((:10:6074)1(^(含量为2 X 101Qcfu/g)，亚硒酸钠0.55g，维生素E40g (500IU/g)，饲用活性干酵母200g (安琪酵母股份有限公司)，葡甘露聚糖10g，蒙脱石100g，改良水合硅铝酸钙钠盐540g。
[0047]表1 0.1%饲料添加剂的主要成分组成
【权利要求】
1.一种动物用饲料脱霉剂，其特征在于:该脱霉剂按质量份数计包含以下组分:枯草芽孢杆菌(CICC20872) 50?150份，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074) 5?15份，亚硒酸钠0.1?I份，维生素E25?55份，饲用活性干酵母100?300份，葡甘露聚糖5?15份，蒙脱石50?150份和改良水合硅铝酸盐350?700份。
2.根据权利要求1所述的动物用饲料脱霉剂，其特征在于:该脱霉剂中各组分的含量为:枯草芽孢杆菌(CICC20872) 70?130份，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074) 7?13份，亚硒酸钠0.2?0.8份，维生素E30?50份，饲用活性干酵母140?260份，葡甘露聚糖7?13份，蒙脱石70?130份和改良水合硅铝酸盐400?650份。
3.根据权利要求2所述的动物用饲料脱霉剂，其特征在于:该脱霉剂中各组分的含量为:枯草芽孢杆菌(CICC20872)100份，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074) 10份，亚硒酸钠0.55份，维生素E40份，饲用活性干酵母200份，葡甘露聚糖10份，蒙脱石100份和改良水合硅铝酸盐540份。
4.根据权利要求1所述的动物用饲料脱霉剂，其特征在于所述改良水合硅铝酸盐采用以下方法制备: 将水合硅铝酸盐矿物，经过细碎机破碎并过筛得粒径为3?IOmm矿物，然后在玛瑙球磨罐上进行研磨，装载体积与罐体积比为1:1.5?3，采用干-湿球磨的方式，前25?35h采用干式球磨法研磨，后25?35h加入无水乙醇采用湿式球磨法研磨，研磨之后将样品烘干即得改良水合硅铝酸盐。
5.根据权利要求4所述的动物用饲料脱霉剂，其特征在于所述无水乙醇的添加量为:每50g矿物加入10?20ml的无水乙醇。
6.根据权利要求1?4中任意一项所述的动物用饲料脱霉剂，其特征在于所述的改良水合娃招酸盐为改良水合娃招酸I丐钠盐。
7.权利要求1?3中任意一项所述的动物用饲料脱霉剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤: Cl)制备改良水合硅铝酸盐:将水合硅铝酸盐矿物，经过细碎机破碎并过筛得粒径为3?IOmm矿物，然后在玛瑙球磨罐上进行研磨，装载体积与罐体积比为1:1.5?3，采用干-湿球磨的方式，前25?35h采用干式球磨法研磨,后25?35h加入无水乙醇采用湿式球磨法研磨，研磨之后将样品烘干即得改良水合硅铝酸盐； (2)将枯草芽孢杆菌(CICC20872)，嗜酸乳杆菌冻干粉(CICC6074)，亚硒酸钠，维生素E，饲用活性干酵母，葡甘露聚糖，蒙脱石和步骤(I)制备的改良水合硅铝酸盐按比例混合。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于所述无水乙醇的添加量为:每50g矿物加入10?20ml的无水乙醇。
9.权利要求1?4中任意一项所述的动物用饲料脱霉剂在动物饲料中的应用。
【文档编号】A23K1/16GK103461677SQ201310442236
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年9月25日 优先权日:2013年9月25日
【发明者】邓学兵, 马光友, 马兴旺, 刘俐君 申请人:南京日升昌生物技术有限公司