一种暗纹东方鲀活体提取皮肤组织的方法
【专利摘要】本发明公开了一种暗纹东方鲀活体提取皮肤组织的方法，首先将活体暗纹东方鲀一侧的表皮向外提起，用手术剪剪开一个小口，从小口中向四周剪取皮肤组织，然后用浓度为8-12∶2000（w/v）的金霉素溶液进行伤口涂抹处理，待金霉素溶液颜色明显变淡时将鱼养在盐水中，饲养第3天后，采用同浓度的金霉素溶液再次对鱼体浸泡，待金霉素溶液颜色明显变淡时将鱼取出，再在相同浓度盐水中饲养。本发明方法操作简便、经济实用，能够做到暗纹东方鲀非致命性获得体色差异皮肤组织，在获得用于研究的样品同时保存珍贵的遗传材料。
【专利说明】
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，具体而言是提取暗纹东方 飩皮肤组织以及术后处理的方法，属于水产养殖【技术领域】。 一种暗纹东方鈍活体提取皮肤组织的方法
【背景技术】
[0002] 在已有技术中，进行组织提取的方法一般都需要采取将鱼杀死，然后剪取特定部 位的组织。但是，由于暗纹东方飩种质资源很宝贵，尤其是研究一些体色突变体使需要保有 尽可能多的群体。在此之前，暗纹东方飩组织提取多采用的传统方法，鱼死亡后，遗传材料 就消失了。对体色突变体的研究只能限于已有的遗传材料，限制了后续研究的跟进。暗纹 东方飩剪取皮肤后，存活率情况不太明晰。一般认为，剪取皮肤后，可能会导致感染引发死 亡。因此需要一种在活体提取组织后还能够保持暗纹东方飩很好存活率的处理方法，来保 证遗传材料的延续性。
[0003]
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于为了克服以上现有技术的不足，而提供一种暗纹东方飩活体提 取皮肤组织的方法。
[0005] 本发明是通过以下技术手段实现的： 一种暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，首先将活体暗纹东方飩一侧的表皮向外提 起，用手术剪剪开一个小口，从小口中向四周剪取皮肤组织，然后用浓度为8-12:2000 (w/ v)的金霉素溶液进行伤口涂抹处理，待金霉素溶液颜色明显变淡时将鱼养在盐水中，饲养 第3天后，采用质量浓度为8-12:2000的金霉素溶液再次对鱼体浸泡，待金霉素溶液颜色明 显变淡时将鱼取出，再在相同浓度盐水中饲养。
[0006] 所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，剪取皮肤组织时，尽量保留尽可能 多的皮肤下方结缔组织，同时要避开肌肉层中的血管。
[0007] 所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，剪取皮肤组织的面积不超过本侧皮 肤表面积的三分之一。
[0008] 所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，所述盐水浓度可以为6?8%。（w/ V)。
[0009] 所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，所述皮肤剪取暗纹东方飩个体可以 为体重0. 8kg?1. 5kg的成鱼。
[0010] 本发明采用了浓度为8-12:2000 (w/v)的金霉素溶液作为创口的抗菌处理剂，可 以对暗纹东方飩的创口进行有效的抗菌保护，同时采用浓度为6?8%。（w/v)的盐水进行 培养，能够加快皮肤组织的重生，加快伤口愈合。
[0011] 本发明提供的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法经实施验证能够达到100%的 组织提取后存活率，既能满足组织提取的要求，又能保有宝贵的体色突变体遗传材料，对暗 纹东方飩养殖过程影响小，并保有较高数目的体色突变体群体。
[0012]
【具体实施方式】： 下面结合实施例对本发明进一步说明，但不构成对本发明的限制。
[0013] 实施例1 首先用镊子将暗纹东方飩一侧面的表皮向外提起，用手术剪剪开一个小口，从小口中 向四周剪取约四分之一本侧面表皮的面积。剪取不同体色皮肤组织时，要尽量保留尽可能 多的皮肤下方结缔组织，利于伤口愈合。剪取皮肤组织时，要避开肌肉层中的血管，尤其是 鳍条基部的血管，防止大出血。组织剪取后，用浓度8:2000 (W/W)的金霉素溶液对伤口进 行涂抹处理，防止感染。待金霉素溶液颜色变淡后，即可将手术后的暗纹东方飩放入盐水 中，暂养盐水浓度为6%。（w/v)。暂养盐水中后第3天，采用同样浓度（8:2000，W/W)的金 霉素溶液再次对鱼体浸泡，浸泡后待金霉素溶液颜色变淡后再将鱼转入同样浓度的盐水中 培养，被剪取皮肤暗纹东方飩个体为体重约〇. 8kg的成鱼，利于提高术后个体成活率。术后 约6天，在伤口处逐渐开始重新长出新的皮肤组织。以上对30尾体重约0. 8kg的暗纹东方 飩进行以上活体组织提取试验，存活率达到100%。
[0014] 实施例2 首先用镊子将暗纹东方飩一侧面的表皮向外提起，用手术剪剪开一个小口，从小口中 向四周剪取约五分之一本侧面表皮的面积。剪取不同体色皮肤组织时，要尽量保留尽可能 多的皮肤下方结缔组织，利于伤口愈合。剪取皮肤组织时，要避开肌肉层中的血管，尤其是 鳍条基部的血管，防止大出血。组织剪取后，用浓度9:2000 (W/W)的金霉素溶液对伤口进 行涂抹处理，防止感染。待金霉素溶液颜色变淡后，即可将手术后的暗纹东方飩放入盐水 中，暂养盐水浓度为7%。（w/v)。暂养盐水中后第3天，采用同样浓度（9:2000，W/W)的金 霉素溶液再次对鱼体浸泡，浸泡后待金霉素溶液颜色变淡后再将鱼转入同样浓度的盐水中 培养。被剪取皮肤暗纹东方飩个体为体重约1.2kg的成鱼，利于提高术后个体成活率。术 后约5天，在伤口处逐渐开始重新长出新的皮肤组织。以上对30尾体重约1. 2kg的暗纹东 方飩进行以上活体组织提取试验，存活率达到100%。
[0015] 实施例3 首先用镊子将暗纹东方飩一侧面的表皮向外提起，用手术剪剪开一个小口，从小口中 向四周剪取约四分之一本侧面表皮的面积。剪取不同体色皮肤组织时，要尽量保留尽可能 多的皮肤下方结缔组织，利于伤口愈合。剪取皮肤组织时，要避开肌肉层中的血管，尤其是 鳍条基部的血管，防止大出血。组织剪取后，用浓度10:2000 (W/W)的金霉素溶液对伤口进 行涂抹处理，防止感染。待金霉素溶液颜色变淡后，即可将手术后的暗纹东方飩放入盐水 中，暂养盐水浓度为8%。（w/v)。暂养盐水中后第3天，采用同样浓度（10:2000，W/W)的金 霉素溶液再次对鱼体浸泡，浸泡后待金霉素溶液颜色变淡后再将鱼转入同样浓度的盐水中 培养。被剪取皮肤暗纹东方飩个体为体重约1.5kg的成鱼，利于提高术后个体成活率。术 后约7天，在伤口处逐渐开始重新长出新的皮肤组织。以上对30尾体重约1. 5kg的暗纹东 方飩进行以上活体组织提取试验，存活率达到100%。
[0016] 实施例4 首先用镊子将暗纹东方飩一侧面的表皮向外提起，用手术剪剪开一个小口，从小口中 向四周剪取约三分之一本侧面表皮的面积。剪取不同体色皮肤组织时，要尽量保留尽可能
【权利要求】
1. 一种暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，其特征在于，首先将活体暗纹东方飩一 侧的表皮向外提起，用手术剪剪开一个小口，从小口中向四周剪取皮肤组织，然后用浓度为 8-12:2000 (w/v)的金霉素溶液进行伤口涂抹处理，待金霉素溶液颜色明显变淡时将鱼养在 盐水中，饲养第3天后，采用同浓度的金霉素溶液再次对鱼体浸泡，待金霉素溶液颜色明显 变淡时将鱼取出，再在相同浓度盐水中饲养。
2. 根据权利要求1所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，其特征在于，剪取皮 肤组织时，尽量保留尽可能多的皮肤下方结缔组织，同时要避开肌肉层中的血管。
3. 根据权利要求1所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，其特征在于，剪取皮 肤组织的面积不超过本侧皮肤表面积的三分之一。
4. 根据权利要求1所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，其特征在于，所述盐 水浓度为6?8%。（w/v)。
5. 根据权利要求1所述的暗纹东方飩活体提取皮肤组织的方法，其特征在于，所述皮 肤剪取暗纹东方飩个体为体重〇. 8kg~l. 5kg的成鱼。
【文档编号】A01K61/00GK104082210SQ201410316100
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月4日 优先权日:2014年7月4日
【发明者】金武, 顾若波, 闻海波, 杜兴伟, 郑金良 申请人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心