一种狭叶竹叶参的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明涉及一种狭叶竹节参的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、苯丙氨酸的调控。本发明的狭叶竹节参组培方法操作简便易行，增殖系数高，繁殖率高，生长速度快，次生代谢物含量高，可以短期内获得大量的狭叶竹节参幼苗，有助于狭叶竹节参资源的开发和利用。
【专利说明】一种狭叶竹叶参的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及组培条件下狭叶竹叶参的培养，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 狭叶竹节参，多年生草本，五加科，Mey. var.，又名竹根七、 野三七、鸡头七，分布于四川、贵州、云南、西藏等地。生于海拔2000-3000m的山中灌木丛 中。散瘀止血；活血定痛；解毒消肿。主治：咯血，吐血，衄血，尿血，便血，崩漏，产后出血过 多，瘀血腹痛，经闭，跌打瘀肿，外伤出血，疮疡肿毒，蛇伤。目前主要采用野外采撷，繁殖主 要是自然繁殖，给狭叶竹节参的开发利用带来了局限性。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供狭叶竹节参的快速繁殖方法，并采用苯丙氨酸 进行调控，增殖率高，生长速度快，操作简单，可以获得大量狭叶竹节参幼苗，有利于狭叶竹 节参资源的开发。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案： 取狭叶竹节参地下部分芽，清水中洗净，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净 工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的狭叶竹 节参芽接入WPM+6-BA1. 5mg/L+2iP0. 8mg/L+NAA0. lmg/L+硫代硫酸钠100mg/L培养基中培 养，附加蔗糖30g/L，琼脂6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照15001x，温度22°C，生长出来的狭叶竹 节参腋芽，放入增殖培养基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L，琼脂 6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 4mg/ L，附加蔗糖25g/L，琼脂5-6g/L，PH5. 8-5. 9,光照30001x，培养出的狭叶竹节参试管苗加入 7mg/L苯丙氨酸，调控其生长及次生代谢物质的含量。
[0005] 采用本发明制备的狭叶竹节参繁殖率高，生根率96%，操作简单，能耗小。
[0006] 下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。
【具体实施方式】 [0007] 实施例1 取狭叶竹节参地下部分芽，清水中洗净，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净 工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理10min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的狭叶竹 节参芽接入WPM+6-BA1. 0mg/L+2iP0. 5mg/L+NAA0. lmg/L+硫代硫酸钠100mg/L培养基中培 养，附加蔗糖30g/L，琼脂6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照15001x，温度22°C，生长出来的狭叶竹节 参腋芽，放入增殖培养基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. Omg/L GA3附加蔗糖30g/L，琼脂 6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 4mg/ L，附加蔗糖25g/L，琼脂5-6g/L，PH5. 8-5. 9,光照30001x，培养出的狭叶竹节参试管苗加入 5mg/L苯丙氨酸，调控其生长及次生代谢物质的含量，生根率90%，。
[0008] 实施例2 取狭叶竹节参地下部分芽，清水中洗净，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净 工作台上75%酒精处理30s，氯化萊处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的狭叶竹节 参芽接入 WPM+6-BA2. 0mg/L+2iPl. Omg/L+NAAO. lmg/L+ 硫代硫酸钠 100 mg/L 培养基中培 养，附加蔗糖30g/L，琼脂6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照15001x，温度22°C，生长出来的狭叶竹 节参腋芽，放入增殖培养基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L，琼脂 6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 4mg/ L，附加蔗糖25g/L，琼脂5-6g/L，PH5. 8-5. 9,光照30001x，培养出的狭叶竹节参试管苗加入 8 mg/L苯丙氨酸，调控其生长及次生代谢物质的含量，生根率92%，。
[0009] 实施例3 取狭叶竹节参地下部分芽，清水中洗净，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净 工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的狭叶竹 节参芽接入WPM+6-BA1. 5mg/L+2iP0. 5mg/L+NAA0. lmg/L+硫代硫酸钠100mg/L培养基中培 养，附加蔗糖30g/L，琼脂6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照15001x，温度22°C，生长出来的狭叶竹 节参腋芽，放入增殖培养基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L，琼脂 6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 4mg/ L，附加蔗糖25g/L，琼脂5-6g/L，PH5. 8-5. 9,光照30001x，培养出的狭叶竹节参试管苗加入 5mg/L苯丙氨酸，调控其生长及次生代谢物质的含量，生根率94%，。
[0010] 实施例4 取狭叶竹节参地下部分芽，清水中洗净，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗45min，超净 工作台上75%酒精处理30s，氯化汞处理lOmin，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的狭叶竹 节参芽接入WPM+6-BA1. 5mg/L+2iPl. Omg/L+NAAO. lmg/L+硫代硫酸钠100mg/L培养基中培 养，附加蔗糖30g/L，琼脂6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照15001x，温度22°C，生长出来的狭叶竹 节参腋芽，放入增殖培养基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L，琼脂 6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照20001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 4mg/ L，附加蔗糖25g/L，琼脂5-6g/L，PH5. 8-5. 9,光照30001x，培养出的狭叶竹节参试管苗加入 8 mg/L苯丙氨酸，调控其生长及次生代谢物质的含量，生根率93%，。
【权利要求】
1. 一种狭叶竹节参的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、 生根培养、苯丙氨酸的调控，其主要步骤如下： (1) 取狭叶竹节参地下部分块茎芽，对其进行消毒处理； (2) 将步骤（1)灭菌处理过的狭叶竹节参芽接入WPM+6-BA1. 0-2. Omg/ L+2iP0. 5-1. 0mg/L+NAA0· lmg/L+硫代硫酸钠100mg/L培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂 6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照 15001x，温度 22°C ; (3) 取步骤（2)生长出来的狭叶竹节参腋芽，放入增殖培养基WPM+TDZO. lmg/ L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3 附加蔗糖 30g/L，琼脂 6-7g/L，PH5. 8-5. 9,光照 20001x ; (4) 取步骤（3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WPM+NAAO. 4mg/L，附加蔗糖 25g/L，琼脂 5-6g/L，PH5. 8-5. 9,光照 30001x ; (5) 取步骤（4)培养出的狭叶竹节参试管苗加入5-8mg/L苯丙氨酸，调控其生长及次生 代谢物质的含量。
2. 按照权利要求1所述的一种狭叶竹节参的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1)中 所述狭叶竹节参芽的消毒处理为：取狭叶竹节参地下部分芽，清水中洗净，在漂白粉中浸泡 3min，流水冲洗45min，超净工作台上75%酒精处理30s，氯化萊处理lOmin，无菌水冲洗5-7 遍。
3. 按照权利要求1所述的一种狭叶竹节参的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2)腋 芽诱导培养中附加了硫代硫酸钠 l〇〇mg/L，用来防止丛生芽诱导过程中的褐化现象。
4. 按照权利要求1所述的一种狭叶竹节参的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（3)中 的增殖培养基中附加了 2. 0mg/LGA3，可以促进芽的生长。
5. 按照权利要求1所述的一种狭叶竹节参的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5)中 加入了 5-8mg/L苯丙氨酸，可以调控其生长及次生代谢物质的含量，且采用过滤灭菌。
【文档编号】A01H4/00GK104186331SQ201410463011
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司