本发明属于农药
技术领域：
，具体涉及一种抗烟草花叶病毒的农药及其制备方法。
背景技术：
：烟草花叶病毒（TMV）是一种严重危害烟草生产的植物病毒，烟草感染该病毒后，幼嫩叶片侧脉及支脉组织呈半透明状，叶脉两侧叶肉组织渐呈淡绿色。病毒在叶片组织内大量增殖，使部分叶肉细胞增大或增多，出现叶片薄厚不匀，颜色黄绿相间，呈花叶状。后花叶斑驳程度加大，并现大面积深褐色坏死斑，中下部老叶尤甚，发病重的叶片皱缩、畸形、扭曲。早期发病的植株节间缩短，严重矮化，生长缓慢，不能正常开花结实，并易脱落，能发育的荫果小而皱缩，种子量少且小，多不能发芽。烟草花叶病在烟草苗期和大田生长初期最易感病，主要发生在苗床期至大田现蕾期。烟草属草茄木，茄科一年生或有限多年生草本植物，基部稍木质化。花序顶生，圆锥状，多花；蒴果卵状或矩圆状，长约等于宿存萼。夏秋季开花结果。主要分布于南美洲、南亚、中国。烟草除能制成卷烟、旱烟、斗烟、雪茄烟等供人吸食外，尚有多种医疗用途。虽然烟草给人类带了很多危害，甚至被称为“毒草”，许多国家或地区明文限制流通或抽吸，世界卫生组织成员还签署了《烟草控制框架公约》。但作为一种历史悠久的药用植物，其医疗价值不能因其危害性而被抹杀。《全国中草药汇编》记载，烟草性温味甘，有毒，具有消肿、解毒、杀虫等功效，主要用于疔疮肿毒，头癣，白癣，秃疮，毒蛇咬伤等症，还可治疗项疽、背痈、风痰、鹤膝（包括骨结核、慢性化脓性膝关节炎等）等病。烟草花叶病的发生给烟草生产造成了很大的经济损失。因此，防治烟草病虫害是保证烟草优质高产的重要措施。目前，用于抗烟草花叶病毒的制剂和方法有很多，例如，申请号为201110160947.5的专利公开了一种裂褶菌多糖提取物及其制备方法，按照比例将裂褶菌菌丝粉加入到热水中，在100℃水浴中浸提8~10小时，用纱布过滤，所得滤渣在按照相同方法再浸提一次，合并两次滤液，真空浓缩，再与5倍体积的95%乙醇混合，于4℃下静置过夜，离心，将沉淀用乙醇洗涤2次，60℃烘干即可。该发明的裂褶菌多糖提取物可用于防治烟草花叶病毒病，对烟草花叶病毒的抑制率可达到70%以上，且为天然提取物，对人类和环境无害。申请号为201510836720.6的专利公开了一种防治烟草花叶病毒烟草花叶尔灭的制备方法。其菌种组分为：光合菌5%、黑曲霉2%、细黄细黄链霉菌3%、淡紫拟青霉2%、苏云金芽孢杆菌15%、胶质芽孢杆菌15%、巨大芽孢杆菌15%、多粘芽孢杆菌10%、地衣芽孢杆菌10%、绿僵菌3%、蜡状芽孢杆菌15%、侧孢短芽孢杆菌5%，该本发明选用多种有益菌组合，防效明显，防治效果达85%以上。上述公开技术与传统使用化学制剂的方法明显不同，更加安全、环保、绿色，但是防治效果及稳定性相对于传统化学制剂来说，还有待进一步提高。技术实现要素：有鉴于此，本发明所要解决的技术问题是提供一种抗烟草花叶病毒的农药，抗菌效果稳定、药效强且对环境安全、无污染。为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参10~30份、娑罗子10~30份、艾蒿10~30份、荔枝壳5~20份、柠檬皮5~20份、丝瓜皮5~20份、香樟叶5~15份、迷迭香3~12份、连翘3~12份、菖蒲3~12份、生物菌剂1~5份，所述生物菌剂由质量百分比的1~10%苏云金芽孢杆菌、30~40%细黄链霉菌和50~60%光合细菌组成。优选地，所述生物菌剂由质量百分比的8%苏云金芽孢杆菌、35%细黄链霉菌和57%光合细菌组成。优选地，所述抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参20~25份、娑罗子20~25份、艾蒿15~20份、荔枝壳8~12份、柠檬皮8~12份、丝瓜皮8~12份、香樟叶8~12份、迷迭香9份、连翘9份、菖蒲9份、生物菌剂2~3份。优选地，所述抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参20份、娑罗子23份、艾蒿18份、荔枝壳10份、柠檬皮10份、丝瓜皮10份、香樟叶10份、迷迭香9份、连翘9份、菖蒲9份、生物菌剂2份。一种抗烟草花叶病毒的农药的制备方法，包括以下步骤：1）分别称取干燥的重量份的苦参10~30份、娑罗子10~30份、艾蒿10~30份、荔枝壳5~20份、丝瓜皮5~20份、迷迭香3~12份、连翘3~12份和菖蒲3~12份，混合，冷冻后在氮气保护下进行粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取干燥的重量份的柠檬皮5~20份和香樟叶5~15份，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；2）在所述粉碎物料Ⅰ中加入其重量4~6倍的水，加热至40~50℃，保持40~50分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣Ⅰ，将滤液冷却，密封保存；在所述药渣Ⅰ加入其重量2~3倍的水，加热至50~60℃，保持30~40分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅱ和药渣Ⅱ；将所述滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并得到滤液，将所述滤液浓缩至75℃时相对密度为1.12~1.15的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为75~80%的乙醇溶液，温度25~30℃，保持18~24小时，然后过滤，得到滤液Ⅲ和沉淀物，将所述滤液Ⅲ减压浓缩至55℃时相对密度为1.20~1.25的膏体；3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量3~5倍重量的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为35~40分钟，蒸馏提取2~3次，将提取液合并用有机溶剂进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出有机溶剂，即得萃取物；4）将所述膏体和萃取物分别干燥，粉碎，合并，得到有效成分Ⅰ；5）将所述有效成分Ⅰ与生物菌剂1~5重量份混合，2000~3000rpm搅拌5~10分钟，即得。优选地，所述浸膏与所述乙醇的重量体积比1g：10~20ml。优选地，所述有机溶剂为二氯甲烷。本发明与现有技术相比，其有益效果如下：1）本发明申请人在对烟草种植研究的基础上，提出了一种抗烟草花叶病毒的农药，该农药取材环保，对烟叶及植株无任何危害，并且能够高效杀灭烟草花叶病毒，抗病率达到90%以上，长期使用无抗药性。2）本发明所用原料来源广泛，安全环保。苦参为豆科植物苦参的干燥根，清热，燥湿，杀虫。娑罗子为天师栗的干燥成熟种子，表面棕色或棕褐色，多皱缩，凹凸不平，略具光泽。艾蒿，为多年生草本或略成半灌木状植物，植株有浓烈香气，具有抗菌及抗病毒作用、平喘、镇咳及祛痰作用、止血及抗凝血作用等。荔枝壳，为无患子科植物荔枝的果皮，性味苦、寒，具有除湿止痢，止血作用；荔枝皮中含有黄酮类物质等几十种成分。柠檬皮，为芸香科植物黎檬或洋柠檬的果皮，气香，味微苦，提取物含多种抑菌活性成分。丝瓜皮，为丝瓜的果皮，食用可清热解毒。香樟叶，为黄樟的鲜叶，主要含挥发油成分，其中1，8-桉叶素含量约60%、樟脑约0.75%，其他成分有柠檬醛、癸醛、α-蒎烯、莰烯、α-松油烯、对-聚伞花素、芳樟醇、α-松油醇及苄系倍半萜等。迷迭香，为唇形科植物迷迭香的全草，所含挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等有一定的抗菌作用。连翘，又名黄花条、连壳、青翘、落翘、黄奇丹等，含木脂体类化合物、黄酮类化合物、苯乙烯类衍生物等，有抗菌、强心、利尿、镇吐等药理作用。菖蒲，能为辟秽开窍，宣气逐痰，解毒，杀虫。上述原料是申请人经过多年研究、筛选，经过科学复配所得；且与生物菌剂结合使用，彼此相互补益，对烟草整个生长周期发生的烟草花叶病毒具有明显的防治效果，烟叶可吸收利用后，有利于烟叶品质的提高，且本发明农药对非靶标对象没有任何伤害。具体实施方式为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步清楚阐述本发明的内容，但本发明的保护内容不仅仅局限于下面的实施例。在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本发明更为彻底的理解。然而，对于本领域技术人员来说显而易见的是，本发明可以无需一个或多个这些细节而得以实施。实施例1：一种抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参20份、娑罗子23份、艾蒿18份、荔枝壳10份、柠檬皮10份、丝瓜皮10份、香樟叶10份、迷迭香9份、连翘9份、菖蒲9份、生物菌剂2份，所述生物菌剂由质量百分比的8%苏云金芽孢杆菌、35%细黄链霉菌和57%光合细菌组成。苏云金芽孢杆菌，Bacillusmucilaginosus，有效活菌数为5~10亿cfu/g；细黄链霉菌，Streptomycesmicroflavus，有效活菌数≥2亿/g；光合细菌，有效活菌数为50~100亿/g。上述菌剂均可通过市场渠道购买获得，或通过常规方法发酵获得。本实施例抗烟草花叶病毒的农药的制备方法，包括以下步骤：1）分别称取干燥的上述苦参、娑罗子、艾蒿、荔枝壳、丝瓜皮、迷迭香、连翘和菖蒲，混合，冷冻后在氮气保护下进行粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取干燥的上述柠檬皮和香樟叶，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；2）在所述粉碎物料Ⅰ中加入其重量5倍的水，加热至50℃，保持45分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣Ⅰ，将滤液冷却，密封保存；在所述药渣Ⅰ加入其重量2倍的水，加热至55℃，保持35分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅱ和药渣Ⅱ；将所述滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并得到滤液，将所述滤液浓缩至75℃时相对密度为1.13的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为75%的乙醇溶液，温度28℃，保持24小时，然后过滤，得到滤液Ⅲ和沉淀物，将所述滤液Ⅲ减压浓缩至55℃时相对密度为1.23的膏体；3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量4倍重量的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为38分钟，蒸馏提取2次，将提取液合并用二氯甲烷进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出二氯甲烷，即得萃取物；4）将所述膏体和萃取物分别干燥，粉碎，合并，得有效成分Ⅰ；5）将所述有效成分Ⅰ与生物菌剂2重量份混合，2500rpm搅拌10分钟，即得。所述浸膏与所述乙醇的重量体积比为1g：16ml。所述抗烟草花叶病毒的农药的使用方法是：加入所述抗烟草花叶病毒的农药重量100倍以上的水，充分搅拌混合，制成喷雾剂，均匀喷洒在烟叶表面。实施例2：一种抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参25份、娑罗子25份、艾蒿15份、荔枝壳12份、柠檬皮8份、丝瓜皮12份、香樟叶12份、迷迭香9份、连翘9份、菖蒲9份、生物菌剂3份，所述生物菌剂由质量百分比的8%苏云金芽孢杆菌、35%细黄链霉菌和57%光合细菌组成。本实施例抗烟草花叶病毒的农药的制备方法，包括以下步骤：1）分别称取干燥的上述重量份配比的苦参、娑罗子、艾蒿、荔枝壳、丝瓜皮、迷迭香、连翘和菖蒲，混合，冷冻后在氮气保护下进行粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取干燥的上述重量份配比的柠檬皮和香樟叶，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；2）在所述粉碎物料Ⅰ中加入其重量4倍的水，加热至40℃，保持45分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣Ⅰ，将滤液冷却，密封保存；在所述药渣Ⅰ加入其重量2倍的水，加热至50℃，保持38分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅱ和药渣Ⅱ；将所述滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并得到滤液，将所述滤液浓缩至75℃时相对密度为1.15的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为80%的乙醇溶液，温度25℃，保持24小时，然后过滤，得到滤液Ⅲ和沉淀物，将所述滤液Ⅲ减压浓缩至55℃时相对密度为1.25的膏体；3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量3倍重量的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为35分钟，蒸馏提取2次，将提取液合并用二氯甲烷进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出二氯甲烷，即得萃取物；4）将所述膏体和萃取物分别干燥，粉碎，合并，得有效成分Ⅰ；5）将所述有效成分Ⅰ与生物菌剂3重量份混合，2000rpm搅拌8分钟，即得。所述浸膏与所述乙醇的重量体积比为1g：12ml。所述抗烟草花叶病毒的农药的使用方法同实施例1，不再赘述。实施例3：一种抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参22份、娑罗子20份、艾蒿20份、荔枝壳8份、柠檬皮12份、丝瓜皮8份、香樟叶8份、迷迭香9份、连翘9份、菖蒲9份、生物菌剂2份，所述生物菌剂由质量百分比的8%苏云金芽孢杆菌、35%细黄链霉菌和57%光合细菌组成。本实施例抗烟草花叶病毒的农药的制备方法，包括以下步骤：1）分别称取干燥的上述重量份配比的苦参、娑罗子、艾蒿、荔枝壳、丝瓜皮、迷迭香、连翘和菖蒲，混合，冷冻后在氮气保护下进行粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取干燥的上述重量份配比的柠檬皮和香樟叶，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；2）在所述粉碎物料Ⅰ中加入其重量6倍的水，加热至50℃，保持45分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣Ⅰ，将滤液冷却，密封保存；在所述药渣Ⅰ加入其重量3倍的水，加热至60℃，保持40分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅱ和药渣Ⅱ；将所述滤液Ⅰ和滤液Ⅱ合并得到滤液，将所述滤液浓缩至75℃时相对密度为1.12的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为75%的乙醇溶液，温度30℃，保持20小时，然后过滤，得到滤液Ⅲ和沉淀物，将所述滤液Ⅲ减压浓缩至55℃时相对密度为1.21的膏体；3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量5倍重量的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为40分钟，蒸馏提取3次，将提取液合并用二氯甲烷进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出二氯甲烷，即得萃取物；4）将所述膏体和萃取物分别干燥，粉碎，合并，得有效成分Ⅰ；5）将所述有效成分Ⅰ与生物菌剂2重量份混合，3000rpm搅拌8分钟，即得。所述浸膏与所述乙醇的重量体积比为1g：18ml。所述抗烟草花叶病毒的农药的使用方法同实施例1，不再赘述。实施例4：一种抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参10份、娑罗子10份、艾蒿30份、荔枝壳5份、柠檬皮5份、丝瓜皮5份、香樟叶15份、迷迭香12份、连翘12份、菖蒲3份、生物菌剂1份，所述生物菌剂由质量百分比的10%苏云金芽孢杆菌、40%细黄链霉菌和50%光合细菌组成。本实施例中抗烟草花叶病毒的农药的制备方法和使用方法参阅实施例1，不再赘述。实施例5：一种抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参10份、娑罗子30份、艾蒿10份、荔枝壳20份、柠檬皮20份、丝瓜皮20份、香樟叶5份、迷迭香3份、连翘3份、菖蒲12份、生物菌剂5份，所述生物菌剂由质量百分比的5%苏云金芽孢杆菌、35%细黄链霉菌和60%光合细菌组成。本实施例中抗烟草花叶病毒的农药的制备方法和使用方法参阅实施例1，不再赘述。实施例6：一种抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参10份、娑罗子15份、艾蒿25份、荔枝壳15份、柠檬皮15份、丝瓜皮15份、香樟叶6份、迷迭香6份、连翘6份、菖蒲10份、生物菌剂4份，所述生物菌剂由质量百分比的1%苏云金芽孢杆菌、40%细黄链霉菌和59%光合细菌组成。本实施例中抗烟草花叶病毒的农药的制备方法和使用方法参阅实施例1，不再赘述。实施例7：本实施例所描述的抗烟草花叶病毒的农药，与实施例1不同的是：还包括：助剂1重量份，所述助剂是由皂角粉、聚乙烯醇、柠檬酸钠以重量比3：2：1.2组成的混合物。其中，皂角粉为原生植物皂角经精细加工、研磨而成，具有良好的分散、润湿、悬浮等功能。聚乙烯醇，粉末状固体，用于农药，可改良土壤或具有增效作用。柠檬酸钠，白色到无色晶体，具有良好的络合性能。上述三种助剂合用，能够增强农药药效的发挥，提高农药的抗病能力。实施例8：本实施例所描述的抗烟草花叶病毒的农药，与实施例1所不同的是：还包括：助剂2重量份，所述助剂是由皂角粉、聚乙烯醇、柠檬酸钠以重量比2：1：0.8组成的混合物。对比例1：抗烟草花叶病毒的农药，由如下重量份的原料制备而成：苦参20份、娑罗子23份、艾蒿18份、荔枝壳10份、柠檬皮10份、丝瓜皮10份、香樟叶10份、迷迭香9份、连翘9份、菖蒲9份。对比例2：抗烟草花叶病毒的农药，由如下质量百分比的微生物菌剂制备而成：8%苏云金芽孢杆菌、35%细黄链霉菌和57%光合细菌。对比例3：抗烟草花叶病毒的农药，与实施例1所不同的是：还包括：助剂2重量份，所述助剂是由皂角粉、聚乙烯醇、柠檬酸钠以重量比1：1：1组成的混合物。效果评价1.1供试药剂实验组：ⅠA~ⅠF：依次为本发明实施例1~6制备的抗烟草花叶病毒的农药；ⅠG~ⅠH：依次为本发明实施例7~8制备的抗烟草花叶病毒的农药；对照组：ⅡA：对比例1制备的抗烟草花叶病毒的农药；ⅡB：对比例2制备的抗烟草花叶病毒的农药；ⅡC：对比例3制备的抗烟草花叶病毒的农药。1.2抑制活性试验1）测定方法供试病菌：烟草花叶病毒（Tobaccomosaicvirus）。供试植物：枯斑寄主心叶烟。育苗时将心叶烟种子先用温汤浸种30min。然后将种子直接播于育苗盆内，将其放入光照培养箱，温度22℃，光照16h/d，湿度60%，进行培养，当烟草长到5~6片真叶时供试。接种：采用汁液摩擦法接种；选用5~6叶期心叶烟作为供试病菌的枯斑寄主；试验在防虫温室内进行。取供试药剂，用蒸馏水配置成0.05g/ml水溶液，加入供试病菌，使病毒终浓度为10μg/ml。混合10min，在枯斑寄主心叶烟采用半叶法摩擦接种左（右）半叶上，另以含TMV病毒的蒸馏水（病毒终浓度为10μg/ml）为对照，每处理接种5片叶，试验重复3次。3天后待出现明显枯斑后，及时记录枯斑数目，计算抑制率（%），以平均抑制率进行评价抑制效果；抑制率=（对照枯斑数-处理枯斑数）/对照枯斑数×100。1.3抑菌活性表1供试药剂对供试病菌的抑制率组别ⅠAⅠBⅠCⅠDⅠEⅠFⅠGⅠHⅡAⅡBⅡC供试病菌/抑制率，%98.297.697.195.794.696.199.599.139.245.685.9从表1可以看出，本发明实施例1~6所制备的抗烟草花叶病毒的农药对烟草花叶病毒的抑制率为94.6~98.2%，均高于90%，抑制率波动小，药效稳定，而且明显高于对比例1和2，增效明显。此外，实验组ⅠG的抗病毒效果均优于ⅠA~ⅠF，ⅠH与ⅠG基本相同，两组对烟草花叶病毒的抑制效果都有所增强，可以作为更加优选的方案。对比例3的抑制率为85.9%，较实施例7而言，明显降低，说明助剂的合理配比对本发明农药药效的发挥具有重要的影响，同时说明，本发明助剂能够提高本发明农药的抗病毒能力。上述实验表明，本发明农药用于烟草花叶病毒的防治具有显著且稳定的抑制效果，药效强，增效明显。虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是熟悉本
技术领域：
的技术人员应当理解，我们所描述的具体的实施例只是说明性的，而不是用于对本发明的范围的限定，熟悉本领域的技术人员在依照本发明的精神所作的等效的修饰以及变化，都应当涵盖在本发明的权利要求所保护的范围内。当前第1页1 2 3