三种苦荞麦茎秆提取物的制备及其杀虫活性的应用的制作方法

本发明属于农药领域，具体涉及KX2008-07、海子鸹、额角豆幽三种品种的苦荞麦茎秆提取物的杀虫活性，同时提供这三种植物的提取物及其植物源杀虫剂的制备方法。

背景技术：

随着现代农业集约化耕作制度的大面积推广和各式各样化学杀虫剂的不断使用,大量化学农药的滥用,虽然在一定程度上有效地控制了虫害的发生和危害,但同时也对大量的有益生物造成一定的杀伤,其中就包括一些害虫的天敌,从而导致害虫的不断猖撅,虫害的发生更加频繁和密集。另一方面,化学农药的频繁使用,也进一步导致害虫对化学农药产生日益严重的耐药性。高效、低毒、易降解、对有益生物及畜禽、人体安全是未来农药的发展方向，植物源农业是其中的一个重要的类群。

植物源农药又称植物性农药。利用植物资源开发的农药，植物源农药包括从植物中提取的活性成分、植物本身和按活性结构合成的化合物和衍生物。类别有植物毒素、植物内源激素、植物源昆虫激素、拒食剂、引诱剂、驱避剂、绝育剂、增效剂、植物防卫素、异株克生物质等。

KX2008-07(注明下拉丁文或来源)、海子鸹(注明下拉丁文或来源)、额角豆幽(注明下拉丁文或来源)是三种苦荞麦品种，发明人经过研究发现这三个品种的苦荞麦提取物能毒杀斜纹夜蛾这种在农业上危害极大且耐药性强的农业害虫。目前尚未发现有这三种苦荞麦提取物的杀虫活性的报道。本发明首次发现这三种苦荞麦的提取物可用于毒杀害虫，为新型天然植物源杀虫剂的开发和应用提供了新的有效成分。此外，本发明选用的材料为三种苦荞麦茎秆。其来源广泛且为生产废料，本研究废物利用，解决焚烧秸秆带来的环境污染问题还为新型天然植物源杀虫剂的开发应用提供理论依据。

技术实现要素：

为解决现有技术中存在的问题本发明在于提供kx008-07、海子鸹、额角豆幽三种苦荞麦茎秆提取物的杀虫活性，同时提供这三种植物的提取物及其植物源杀虫剂的制备方法。

本发明的目的之一是，提供一种苦荞麦茎秆杀虫提取物及其制备方法。本发明的目的之二是，提供一种以所述提取物为有效成分的生物杀虫剂组合物。本发明的目的之三是，提供所述提取物在制备生物杀虫剂中的应用。

本发明比较了三种品种（KX008-07、海子鸹、额角豆幽）的苦荞麦茎秆提取物的杀虫活性，确定了具有杀虫活性的提取物及其制备方法。

本发明所述的三种苦荞麦茎秆提取物是经过提取、浓缩、系列萃取得到，其制备方法包括以下步骤：取苦荞麦茎秆粗粉，用乙醇浸泡，超声波助溶提取，过滤，滤渣重复上述提取步骤，过滤，合并提取液，减压浓缩既得。

所用乙醇优选50-95%，最优选70%的乙醇。

本发明还提供以所述方法制备的各提取物的植物源杀虫剂组合物。所述生物杀虫剂组合物是以本发明的提取物为有效成分，与农药上可接受的载体所组成，并以合适的农用制剂形式存在，这些制剂可以是溶液剂、喷雾剂等。

本发明还提供了以三种苦荞麦茎杆提取物为植物源杀虫剂的有效成份，以重量份计，含量分别为：提取物干浸膏40-75份、溶剂70-100份、表面活性剂1-10份。所用溶剂优选去离子水，所用表面活性剂优选吐温80。

本发明进一步提供了各种提取物在制备生物杀虫剂中的应用。为此进行的杀虫相关实验以杀虫率为活性指标。实验结果表明，kx008-07、海子鸹、额角豆幽三种品种的苦荞麦茎杆乙醇提取物对斜纹夜蛾（Prodenia litura（Fabricius）具有不同程度的杀虫活性，可用于制备植物源杀虫剂。

附图说明

图1 三种苦荞麦茎秆提取物杀虫剂的胃毒杀虫效果。

图2 三种苦荞麦茎秆提取物杀虫剂的触杀杀虫效果。

具体实施方式

以下通过具体实施例来说明本发明，但本发明不仅仅是以下全部实施例

实施例1所述三种苦荞麦茎秆提取物的提取方法包括以下步骤：

（1）取采集于四川凉山州的三种苦荞麦茎秆在55℃烘箱内烘烘干至发脆后剪碎；

（2）取一定量的茎秆加入30倍量70%的乙醇,在具有磨口塞的三角瓶内（25℃）浸提12 h后超声波提取30min,抽滤得到滤液；

（3）在旋转蒸发仪上控制温度为53℃减压蒸馏回收溶剂，浓缩成浸膏，

并将浸膏在55℃下烘干至恒重；

（4）4℃下保存。

提取率约为11%。

提取率=干浸膏质量/原药材质量。

实施例2 KX2008-07茎秆提取物杀虫剂的制备

（1）将1.0g吐温80和99去离子水搅拌5分钟，制得1%的吐温80的水溶液；

（2）称取55g KX2008-07茎秆提取物干浸膏，向其中加入1/3上述吐温水溶液，密封常温静置1h，之后用超声波处理30min；

（3）将（1）中剩余的吐温水溶液分2次加入（2）所得到的混合物，每次搅拌15min，即得到KX2008-07茎秆提取物杀虫剂。

实施例3 海子鸹茎秆提取物杀虫剂的制备

（1）将1.0g吐温80和99去离子水搅拌5分钟，制得1%的吐温80的水溶液；

（2）称取55g海子鸹茎秆提取物干浸膏，向其中加入1/3上述吐温水溶液，密封常温静置1h，之后用超声波处理30min；

（3）将（1）中剩余的吐温水溶液分2次加入（2）所得到的混合物，每次搅拌15min，即得到海子鸹茎秆提取物杀虫剂。

实施例4 额角豆幽茎秆提取物杀虫剂的制备

（1）将1.0g吐温80和99去离子水搅拌5分钟，制得1%的吐温80的水溶液；

（2）称取55g额角豆幽茎秆提取物干浸膏，向其中加入1/3上述吐温水溶液，密封常温静置1h，之后用超声波处理30min；

（3）将（1）中剩余的吐温水溶液分2次加入（2）所得到的混合物，每次搅拌15min，即得到额角豆幽茎秆提取物杀虫剂。

实施例5 三种苦荞麦茎秆提取物杀虫剂的胃毒作用

采用实施例2-4中制备的苦荞麦茎秆提取物杀虫剂进行杀虫活性实验。

将所制得的杀虫剂分别稀释2被和4倍。称取10g饲料，向其中加入300µl的药液，混匀，均匀涂抹于直径为8cm的培养皿中，然后将饥饿4h后3龄大小均一、健康的斜纹夜蛾的幼虫接入培养皿。每个处理重复3次，每次10头，以等量的1％吐温80的水溶液为空白对照。最后置于温度为26℃，光照周期 16∶8( L∶ D)，湿度为70%恒温光照培养箱中培养，并于24h、48h后观察统计，结果见图1。

计算公式：

实施例6 三种苦荞麦茎秆提取物杀虫剂的触杀作用

采用实施例2-4中制备的苦荞麦茎秆提取物杀虫剂进行杀虫活性实验。

将所制得的杀虫剂分别稀释2被和4倍。触杀采用点滴法，用移液枪在每头三龄幼虫的前胸背板点滴1µl药液，使背部充分接触药液，待溶剂挥发后，接入培养皿中。每个处理重复 3 次，每次10头虫，以等量的1％吐温80的水溶液为空白对照。在恒温光照培养箱中培养，培养温度 26℃，光照周期 16∶8( L∶ D) ，湿度为70%，于处理后24h、48h观察并统计，结果见图2。

计算公式：

结论：由图2可以得出，KX2008-07干浸膏所制杀虫剂的2倍稀释液杀虫率高达93.33%，海子鸹干浸膏所制杀虫剂的2倍稀释液杀虫率达33.33%，额角豆幽干浸膏所制杀虫剂的2倍稀释液杀虫率达36.67%，所以当杀虫方式为触杀时三种苦荞麦茎杆提取物均具有一定的杀虫活性，其中KX2008-07干浸膏所制杀虫剂效果最佳。

综上所述，选择KX008-07、海子鸹、额角豆幽三种苦荞麦茎杆提取物制备的植物杀虫剂均具有一定的杀虫作用，可以用于植物源杀虫剂的制备，其中选择KX2008-07干浸膏所制杀虫剂效果较好。

最后应该说明的是:以上所述均为本发明的一部分实例，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的描述，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例记载的技术方案进行改良，或者对其中的部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所做任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。