一种金线莲组培苗快速繁殖方法与流程

文档序号:12299413阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种金线莲组培苗快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:

A、选取天湖金线莲的健康株系,去掉根、叶片和叶鞘,取其茎条,洗净后切成带节茎段,消毒后接种到不定芽诱导培养基J1上,培养温度为23±2℃,光照强度500~1000lx,光照12h/d,获得不定芽,所述的不定芽诱导培养基J1每升含花宝1号1~2g,蛋白胨0.5~2g,肌醇80~120mg,甘氨酸1.5~2.5mg,盐酸硫胺素0.05~0.2mg,盐酸吡哆醇0.4~0.8mg,烟酸0.4~0.8mg,6-苄基腺嘌呤2.0~5.0mg,萘乙酸0.2~0.5mg,蔗糖15~20g,琼脂6~7g,pH 5.4-5.6;

B、分切不定芽,将高小于3厘米的丛生芽插植于玻璃培养瓶中的增殖培养基J2上,把高大于3厘米的不定芽单株插植于生根培养基JR上,用瓶塞塞住玻璃培养瓶的瓶口,将含有不定芽的增殖培养基J2和生根培养基JR的玻璃培养瓶横放于全自然光培养室中的培养架上,瓶口统一朝一方向,散射光能直接照射不定芽上,培养温度23-25℃,光照强度1000-3000lx,光照时间10-16h/d下培养,当增殖培养基J2在培养下收获增殖材料不定芽,增殖材料不定芽继续接种至新的玻璃培养瓶中的增殖培养基J2上,用瓶塞塞住玻璃培养瓶的瓶口,将含有不定芽的增殖培养基J2的玻璃培养瓶横放于全自然光培养室中的培养架上,瓶口统一朝一方向,散射光能直接照射不定芽上,培养条件为培养温度23-25℃,光照强度1000-3000lx,光照时间10-16h/d下培养,当增殖材料不定芽培养一个继代周期后进行接种转移,高小于3厘米的丛生芽插植于增殖培养基J2中,高大于3厘米的不定芽单株插植于生根培养基JR,如此循环,生根培养基JR上的不定芽长根后成为完整植株进行出瓶移栽;

所述的增殖培养基J2每升含花宝1号2~3g,蛋白胨0.5~2g,肌醇80~120mg,甘氨酸1.5~2.5mg,盐酸硫胺素0.05~0.2mg,盐酸吡哆醇0.4~0.8mg,烟酸0.4~0.8mg,6-苄基腺嘌呤2.0~3.0mg,萘乙酸0.2~0.5mg,蔗糖20~30g,琼脂6~7g,pH 5.4-5.6;

所述的生根培养基JR每升含花宝1号2~3g,蛋白胨0.5~2g,肌醇80~120mg,甘氨酸1.5~2.5mg,盐酸硫胺素0.05~0.2mg,盐酸吡哆醇0.4~0.8mg,烟酸0.4~0.8mg,6-苄基腺嘌呤0.2~0.5mg,萘乙酸2~5mg,活性碳500~1000mg,蔗糖20~30g,琼脂6~7g,pH 5.4-5.6。

2.根据权利要求1所述的金线莲组培苗快速繁殖方法,其特征在于,将步骤A的不定芽转接到不定芽诱导培养基J1上进行继代培养,培养温度为23±2℃,光照度500~1000lx,光照12h/d,继代周期为35-40天,继代培养4-5次后可获得大量的不定芽作为无性繁殖材料。

3.根据权利要求1所述的金线莲组培苗快速繁殖方法,其特征在于,所述的步骤A的消毒是将带节茎段,先用体积分数75%酒精水溶液浸泡30s,再在质量分数0.1%升汞水溶液中浸泡并摇动5~16min,无菌水冲洗3次后,用无菌纸吸干茎段表面水分,并切去两端各1~2mm,再接种到不定芽诱导培养基J1。

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