愈伤组织继代培养基及其制备方法、使用方法与流程

文档序号:12138473阅读:来源:国知局

技术特征:

1.愈伤组织继代培养基,其特征在于:培养基原料包括6-苄氨基腺嘌呤、玉米素、吲哚-3-乙酸、维生素C、蔗糖、琼脂粉、水解酪蛋白,以及改良MS培养基;

所述改良MS培养基pH值为5.5~5.8;

所述改良MS培养基是以MS培养基为基础,在其它成分不变的条件下,调整肌醇、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇和烟酸的含量分别为:1~5mg/L、3~6mg/L、0.5~2mg/L、0.5~3mg/L。

2.如权利要求1所述的愈伤组织继代培养基,其特征在于:所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为2.0mg/L、玉米素1.0mg/L、吲哚-3-乙酸0.3mg/L、维生素C50mg/L、琼脂粉7g/L、水解酪蛋白200~500g/l、蔗糖25-30g/L。

3.如权利要求1所述的愈伤组织继代培养基的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

步骤一:将6-苄氨基腺嘌呤、玉米素、吲哚-3-乙酸、维生素C、蔗糖、琼脂粉、水解酪蛋白分别灭菌,3-5℃保存备用;

步骤二:将愈伤组织继代基础培养基原料溶解,加入6-苄氨基腺嘌呤、玉米素、吲哚-3-乙酸、维生素C、蔗糖、琼脂粉、水解酪蛋白溶液,定容至1L;

步骤三:将定容好的的培养基PH调到5.5-5.8。

步骤四:将配制好的培养基进行高温灭菌,制得愈伤组织继代培养基。

4.如权利要求3所述的愈伤组织继代培养基的制备方法,其特征在于:所述步骤四中的灭菌方法为抽滤灭菌或高温灭菌;灭菌完成后20-25℃放置。

5.如权利要求3所述的愈伤组织继代培养基的制备方法,其特征在于:所述步骤四中高温灭菌的温度为121℃,灭菌时间为30min。

6.一种愈伤组织继代培养基的使用方法:将绿萝的愈伤组织在无菌条件下转接到愈伤组织继代培养基中,进行愈伤组织的继代培养。

7.根据权利要求6所述的愈伤组织继代培养基的使用方法,其特征在于,所述继代增殖的步骤包括:

利用愈伤组织继代培养基在温度为23~25℃、湿度为50~65%的条件下,光照下条件下进行愈伤组织的继代培养,获得新一代的愈伤组织。

8.根据权利要求7所述的愈伤组织继代培养基的使用方法,其特征在于,所述光照条件的光照强度为1500~20001x。

9.根据权利要求7所述的愈伤组织继代培养基的使用方法,其特征在于,所述光照条件的光照时间为12小时。

10.根据权利要求7所述的愈伤组织继代培养基的使用方法,其特征在于,愈伤组织的继代培养时长为40天。

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